Introducción

El objetivo principal de un sistema de producción vaca-cría (producción de destetes para carne) es tener un becerro al año por vaca, por ser el factor que más impacta la rentabilidad de un rancho (^{Hess et al., 2005}; ^{Mejía-Bautista et al., 2010}). Es por esto que el reinicio del estro, dentro de un tiempo relativamente corto después del parto (≤90 días) es de suma importancia, porque optimiza el comportamiento reproductivo de la vaca y garantiza una producción constante y periódica de crías (^{Hess et al., 2005}; ^{Martins et al., 2012}). No obstante, a pesar de la importancia productiva y económica del anestro posparto en el ganado (^{Ciccioli et al., 2003}; ^{Mejía-Bautista et al., 2010}), el rendimiento reproductivo de las vacas de carne en las regiones tropicales es deficiente, y se refleja en intervalos entre el parto y la concepción ≥ 300 días y tasas de concepción al 45-55 % (^{Mejía-Bautista et al., 2010}; ^{Diskin & Kenny, 2016}). Estas condiciones se han atribuido principalmente al efecto del vínculo vaca-becerro que se da durante el amamantamiento (^{Galina et al., 2001}; ^{Crowe et al., 2014}). Además, se ha observado que aunado al efecto de la presencia del becerro (como inhibidor del reinicio de la actividad ovárica posparto) durante el amamantamiento, si la vaca no tiene un manejo nutricional adecuado y/o buena condición corporal (BC), se mantendrá el estatus de inactividad ovárica después del parto, prolongando los días abiertos (^{Crowe, 2008}; ^{Diskin & Kenny, 2014}; ^{Bayemi et al., 2015}; ^{Stevenson et al., 2015}; ^{Diskin & Kenny, 2016}).

Por lo tanto, controlar la interacción entre el amamantamiento y la nutrición de la vaca se vuelve una prioridad zootécnica que facilita las condiciones necesarias para el reinicio de la actividad ovárica y la gestación temprana (≤90 días posparto) (^{Wettemann et al., 2003}; ^{Quintans et al., 2009}; ^{Watanabe et al., 2013}; ^{Crowe et al., 2014}; ^{Diskin & Kenny, 2016}). El destete temprano y el amamantamiento restringido o controlado son las prácticas zootécnicas que más se han utilizado para acortar el periodo de anestro posparto y hacer más eficiente la reproducción de las vacas (^{Galina et al., 2001}; ^{Montiel & Ahuja, 2005}; ^{Waterman et al., 2012}; ^{Barreiros et al., 2014}).

La complementación alimenticia en el posparto de la vaca coadyuva de manera directa a la reducción del anestro, aumentando las probabilidades de que pueda quedar preñada en un menor tiempo después del parto (^{Wettemann et al., 2003}; ^{Watanabe et al., 2013}). Es decir, que las vacas que mantengan una buena alimentación posparto tendrán una adecuada BC y a su vez, mejor desempeño reproductivo (^{Stagg et al., 1998}; ^{Crowe, 2008}; ^{Stevenson et al., 2015}). Sin embargo, el uso de esta tecnología en regiones tropicales es limitado (^{Galina et al., 2001}; ^{Mejía-Bautista et al., 2010}), debido a varios factores que pueden desincentivar en los productores su implementación, por ejemplo, información insuficiente sobre cómo utilizar esta tecnología (^{Galina et al., 2001}; ^{Vendramini et al., 2006}; ^{Mejía-Bautista et al., 2010; Hernández-Martínez et al., 2011}), el desconocimiento del costo del consumo de alimento comparado con el destete tradicional (7-8 meses de vida), y el manejo constante de los animales que puede requerir (^{Galina et al., 2001}; ^{Blanco et al., 2009}).

Sin embargo, los programas de manejo para el destete temprano o para disminuir la frecuencia del amamantamiento, así como la complementación alimenticia estratégica de las vacas, son prácticos y rentables en producciones vaca-cría, comparados al manejo tradicional (sin destete temprano ni complementación alimenticia a la vaca); además, el destete temprano mejora la condición corporal y las ganancias de peso de las vacas bajo condiciones de pastoreo, circunstancias necesarias para obtener buenos resultados en la temporada de empadre (^{Galina et al., 2001}; ^{Quintans et al., 2004}; ^{Blanco et al., 2009}; ^{Waterman et al., 2012}; ^{Martins et al., 2012}).

Por lo tanto, junto con el destete temprano, es necesario ofrecer suplementos alimenticios a las vacas para disminuir o inhibir los efectos negativos que el estado nutricional y el amamantamiento ejercen sobre el desarrollo folicular y la ovulación después del parto, y que afectan la concepción temprana. Con base en lo anterior, el objetivo de este estudio fue determinar el efecto del amamantamiento restringido y la complementación alimenticia sobre el desarrollo folicular posparto y la concentración sérica de progesterona y estradiol en vacas Simbrah.

Material y Métodos

Todos los procedimientos realizados durante este experimento estuvieron de acuerdo con la Norma Oficial Mexicana NOM-062-ZOO-1999 sobre las Especificaciones técnicas para la producción, cuidado y uso de los animales de laboratorio y experimentales.

Variables de estudio

Análisis estadístico

Las variables de actividad folicular y concentración sérica de P₄ y E₂ se analizaron con ANOVA univariado de medidas repetidas. La tasa de ovulación se analizó con la prueba de Chi-cuadrada. La probabilidad de ovulación según el tratamiento se evaluó con el análisis de sobrevivencia de Kaplan-Meier. Para conocer el efecto del tratamiento sobre la tasa de ovulación, la actividad folicular y concentración sérica de P₄ y E₂ se realizó regresión logística. Todas estas pruebas se realizaron utilizando el paquete estadístico SPSS (Statistical Package for Social Sciences V. 15).

Resultados y Discusión

Se encontró mayor número de folículos y diámetro folicular en las vacas de T3, comparado con las vacas de T1, T2 y T4 (p<0.05) (Tabla 1).

Los resultados de este estudio indican que el amamantamiento controlado, en las condiciones en las que se desarrolló este experimento, sí mejoró la eficiencia reproductiva de las vacas. Las vacas del T2 (amamantamiento restringido) tuvieron mayor número de folículos, diámetro folicular y concentraciones séricas de P₄ y E₂ en comparación con las vacas de T1 y T4 (amamantamiento continuo). También se observó que el efecto del amamantamiento controlado se vio potencializado cuando se combinó con complementación alimenticia en el posparto temprano; esto se evidenció con el mayor número de folículos, diámetro folicular y concentraciones séricas de P₄ y E₂ en las vacas del T3 comparadas con las vacas de T1, T2 y T4. Aunque la tasa de ovulación fue 100 % en todos los tratamientos (Tabla 1) porque el estudio terminó una vez que todas las vacas habían ovulado, el análisis de sobrevivencia de Kaplan-Meier indicó que la ovulación se presentó en diferente tiempo por tratamiento, con mayor probabilidad de ovulación en vacas del T3 que en las de los demás tratamientos (p<0.05) (Figura 1).

T1= Amamantamiento continuo con complementación alimenticia. T2= Amamantamiento restringido sin complementación alimenticia. T3= Amamantamiento restringido con complementación alimenticia. T4= Amamantamiento continuo sin complementación alimenticia.

Figura 1 Análisis de sobrevivencia de Kaplan-Meier que indica la probabilidad de ovulación después del parto. 

Por otra parte, las concentraciones séricas de P₄ (ng/mL) y E₂ (pg/mL) fueron mayores en las vacas del T3 que en las de T1, T2 y T4 (Tabla 2).

Si los tratamientos se analizan por separado, el amamantamiento restringido combinado con la complementación alimenticia de las vacas (T3) podría ser considerado como el más conveniente desde el punto de vista productivo. Por otro lado, si no fuera posible implementar el amamantamiento controlado junto con la complementación alimenticia, el amamantamiento controlado (T2) por sí solo ofrece mejoras reproductivas y productivas de las vacas, contrario a dar complementación alimenticia a la vaca sin separar el becerro (T1), o no separar al becerro de la madre ni ofrecerle a la vaca complementación alimenticia (T4). En este sentido, estudios previos en vacas (^{Arthington & Kalmbacher, 2003}; ^{Arthington & Minton, 2004}; ^{Schultz et al., 2005}; ^{Galindo-González et al., 2007}; ^{Quintans et al., 2009}; ^{Vittone et al., 2011}; ^{Martins et al., 2012}; ^{Waterman et al., 2012}; ^{Crowe et al., 2014}; ^{Lopes-Silva et al., 2015}; ^{Mondragón et al., 2016}; ^{Diskin & Kenny, 2016}) han demostrado que el destete temprano (EW), comparado con el amamantamiento continuo (CS), mejora la ganancia de peso (EW 491 ± 5.0 vs. CS 452 ± 5.0 kg), la tasa de gestación (EW 95.0 vs. CS 65.0 %), la tasa de ovulación (EW 100 vs. CS 75 %), la condición corporal (escala de 1-9) (EW 6.34 ± 0.07 vs. CS 4.75 ± 0.07), el número de folículos (EW 18 ± 2 vs. CS 12 ± 2), el diámetro folicular (EW 12.0 ± 0.14 vs. CS 8.0 ± 0.10 mm), la concentración sérica de P₄ (EW 5.0 ± 2.0 vs. CS 3.0 ± 1.0 ng/mL) y de E₂ (EW 110.0 ± 25.0 vs. CS 30.0 ± 15.0 pg/mL) y reduce el periodo de anestro posparto (EW 90 ± 10.0 vs. CS 134 ± 16.0 días).

En ganado cárnico criado bajo condiciones tropicales, el amamantamiento es uno de los principales factores que afectan el periodo de anestro posparto (^{Montiel & Ahuja, 2005}; ^{Quintans et al., 2010}; ^{Waterman et al., 2012}). El destete precoz o el amamantamiento controlado han sido recomendados como manejos enfocados en mejorar la eficiencia reproductiva (^{Galina et al., 2001}; ^{Montiel & Ahuja, 2005}). Esto fue confirmado con los resultados del presente estudio, dado que el amamantamiento controlado se reflejó en mejoras productivas y reproductivas. Sin embargo, el mecanismo preciso mediante el cual el amamantamiento altera la función reproductiva no está totalmente comprendido (^{Montiel & Ahuja, 2005}; ^{Quintans et al., 2009}; ^{Mondragón et al., 2016}). Después de un parto normal (sin complicaciones obstétricas) se requieren alrededor de 30 días para la involución uterina completa y para la restauración de la actividad del eje hipotálamohipófisis-ovarios en lo relativo a la síntesis y liberación de gonadotropinas (^{Diskin & Kenny, 2016}).

Al momento del parto, las concentraciones de P₄ y E₂ se reducen a niveles basales (≤ 0.5 ng/mL y ≤ 2 pg/mL, respectivamente), lo que inhibe su retroalimentación negativa (de origen lúteal y placentario) sobre la síntesis de hormona folículo estimulante (FSH) y hormona luteinizante (LH). En los días siguientes, la FSH es sintetizada y liberada en la circulación periférica, observándose un incremento transitorio (alrededor de 30 ng/mL 3-5 días posparto); esto ocurre subsecuentemente a intervalos de 7 a 10 días (^{Crowe et al., 1998}, ²⁰¹⁴). El primer aumento de FSH estimula la primera oleada de crecimiento folicular posparto y generalmente resulta en la formación de un DF de 7 a 10 días después del parto (^{Murphy et al., 1990}; ^{Savio et al., 1990}; ^{Crowe et al., 1993}). Por otro lado, la recuperación de las reservas de LH en la pituitaria anterior es lenta, y se requieren de 2 a 3 semanas para completarse. Durante este periodo, las concentraciones circulantes y la frecuencia de pulsos de LH son bajas, y este primer DF que se forma no ovula. Esto ocurre en todas las vacas, independientemente de que sean ordeñadas o estén amamantando (^{Silveira et al., 1993}; ^{Griffith & Williams, 1996}). La mayoría (85 %) de las vacas de carne son capaces de ovular a los 25 a 35 días después del parto (^{Crowe et al., 1993}; ^{Duffy et al., 2000}; ^{Mackey et al., 2000}; ^{Crowe et al., 2014}). Sin embargo, esto no sucede, dado que el amamantamiento evita la secreción hipotalámica de hormona liberadora de gonadotropinas (GnRH), necesaria para la síntesis de la LH; este efecto negativo reduce el desarrollo folicular y su competencia para ovular un ovocito viable (^{Quintans et al., 2009}; ^{Crowe et al., 2014}; ^{Mondragón et al., 2016}).

Teóricamente, este proceso se da a través de la señal que se genera cuando el becerro se amamanta y activa las neuronas productoras de opioides que poseen asociación neural con las neuronas productoras de GnRH; esto ejerce un bloqueo de manera directa, dado que inhibe la liberación de GnRH y en consecuencia la secreción de LH (^{Pérez-Hernández et al., 2001}; ^{Crowe, 2008}; ^{Crowe et al., 2014}). El efecto del amamantamiento se vuelve menos potente conforme avanza el periodo posparto; es decir, el mecanismo que prolongada la inactividad posparto puede ser atribuido al vínculo materno que se da con la cría, ya que se ha observado que una vaca que amamanta a su propio becerro mantiene el patrón de supresión en la liberación de LH; por el contrario, si la vaca amamanta a un becerro ajeno, los pulsos de LH se reestablecen de manera normal como cuando se aproxima la ovulación (^{Williams et al., 1996}; ^{Stevenson et al., 1997}). Esto se explica, a través de la teoría de que el amamantamiento del becerro incrementa la sensibilidad del hipotálamo a la retroalimentación negativa del estradiol producido por el ovario, resultando en baja secreción de LH; a medida que el período postparto transcurre, el generador de pulsos de GnRH se vuelve menos sensible al estímulo del amamantamiento, con lo que evita los efectos de retroalimentación negativa del estradiol (^{García-Winder et al., 1984}; ^{Pérez-Hernández et al., 2001}; ^{Crowe et al., 2014}). Esto resulta en incremento en secreción pulsátil de LH, surgimiento del pico preovulatorio de LH y ovulación (^{Pérez-Hernández et al., 2001}; ^{Crowe, 2008}). Esto se puede lograr a partir del día 30 posparto mediante el amamantamiento restringido y/o aislamiento temporal (48 h) del becerro de su madre, resultando en un inmediato (2-5 días) incremento de la frecuencia pulsátil de LH, lo que estimula la ovulación del primer DF hasta en 85 % de las vacas (^{Stagg et al., 1998}; ^{Sinclair et al., 2002}).

Por lo tanto, aunque hasta el momento no se haya esclarecido la vía mediante la cual el amamantamiento afecta el anestro posparto, la evidencia presentada indica que durante el posparto la vaca pasa por tres etapas fisiológicas antes de poder reiniciar sus funciones reproductivas: 1) involución uterina, que requiere ≥ 30 días; 2) restauración del eje hipotálamo-hipófisis-ovarios en lo relativo a la síntesis y liberación principalmente de GnRH y LH, lo cual ocurre entre 25 a 35 días posparto; y 3) inhibición y/o disminución de la sensibilidad a nivel hipotalámico y del vínculo materno para restaurar la liberación de hormonas gonadotrópicas, que se puede inducir mediante el amamantamiento controlado y/o separación temporal del becerro a partir del día 30 posparto.

En este estudio, también se observó que, independientemente del efecto que el amamantamiento ejerce sobre el reinicio de la actividad reproductiva posparto, también está presente el factor nutricional; esto fue observado en vacas del T3 en comparación con vacas del T1, T2 y T4. El reinicio de la actividad reproductiva posparto también se ve influenciado por el estatus nutricional que mantienen las vacas (^{Wettemann et al., 2003}; ^{Waterman et al., 2012}; ^{Diskin & Kenny, 2016}). Si el consumo de nutrientes después del parto es inadecuado, ocasionará una marcada disminución en las reservas corporales de grasa de la vaca, afectando su comportamiento reproductivo al incrementar el periodo de anestro posparto y disminuir la tasa de gestación (^{Diskin & Kenny, 2014}, ²⁰¹⁶).

Desde un punto de vista biológico, en el postparto temprano los mamíferos favorecen la lactancia sobre la fertilidad, dado que el uso de nutrientes se prioriza (^{Lucy, 2003}). Como en la primera etapa de la lactancia los nutrientes pueden resultar escasos, la hembra lactante invierte preferencialmente sus limitados recursos en la supervivencia del neonato, priorizando el sostenimiento de la cría sobre la producción de ovocitos viables, que de ser fertilizados y el embrión resultante implantado, la vaca tendría que cubrir el costo fisiológico de establecer una nueva gestación (^{Wettemann et al., 2003}; ^{Granja et al., 2012}). Es decir, las funciones reproductivas como la ciclicidad estral y el establecimiento de una nueva gestación tienen escasa prioridad dentro de la escala de utilización de nutrientes en la vaca al inicio de la lactancia, y estas funciones solo serán activadas cuando la demanda de nutrientes para lactación, mantenimiento, crecimiento y reservas corporales haya sido satisfecha (^{Wettemann et al., 2003}; ^{Granja et al., 2012}; ^{Watanabe et al., 2013}).

Así, la duración del anestro posparto inicialmente se debe al efecto del amamantamiento, al menos durante el primer mes posparto. Posteriormente, el estatus nutricional que mantenga la vaca será el responsable de la actividad reproductiva; por lo tanto, se puede predecir un desempeño reproductivo satisfactorio si las vacas tienen un estatus nutricional adecuado (^{Wettemann et al., 2003}; ^{Granja et al., 2012}; ^{Diskin & Kenny, 2016}). Sin embargo, el mecanismo por el cual los factores nutricionales actúan sobre la reproducción es un tema complejo y no ha sido bien determinado (^{Wettemann et al., 2003}; ^{Diskin & Kenny, 2016}). Se ha reportado que en vacas inducidas a anestro nutricional se presenta disminución en la concentración plasmática de LH e inhibición en la frecuencia de pulsos de LH como resultado de la reducción en la secreción de GnRH a nivel hipotalámico (^{Crowe et al., 2014}; ^{Diskin & Kenny, 2016}). Esto se ha atribuido a una sensibilización aumentada del hipotálamo a la retroalimentación negativa del estradiol producido por el ovario durante la restricción alimenticia, que genera disminución en la liberación pulsátil de GnRH y LH (^{Richards et al., 1991}; ^{Crowe et al., 2014}).

Por otro lado, se ha reportado que vacas con restricción alimenticia liberan más LH en respuesta a una inyección de GnRH comparadas con vacas en un plano nutricional moderado o alto (^{Whisnant et al., 1985}; ^{Rasby et al., 1991}). Esto sugiere que la disminución o supresión en la secreción de LH en vacas con restricción alimenticia no es debida a la falta de LH en la hipófisis anterior, sino a la disminución en la liberación de GnRH. Sin quedar claro cómo se genera este proceso, se presume que hay factores a nivel metabólico que modulan la función del generador del pulso de GnRH y la respuesta de la hipófisis a ésta (^{Lents et al., 2008}; ^{Crowe et al., 2014}; ^{Diskin & Kenny, 2016}). Existen diferentes hipótesis que tratan de explicar cómo el anestro posparto, el desarrollo folicular y la ovulación pueden estar reguladas por sustancias químicas cuya concentración sanguínea varía según el estado nutricional del animal (BC o reserva de grasa corporal) y que actúan simultáneamente como indicadores metabólicos a varios sitios del eje hipotálamo-hipófisis-ovarios.

Entre estos indicadores metabólicos se menciona a la leptina (^{Ciccioli et al., 2003}; ^{Zieba et al., 2005}), el factor de crecimiento similar a la insulina (IGF-I) (^{Richards et al., 1991}; ^{Diskin et al., 2003}), y los ácidos grasos no esterificados (NEFA) (^{Salas et al., 2003}; ^{Wettemann et al., 2003}). A estos indicadores se les atribuyen funciones en el control del desarrollo folicular o la liberación de gonadotropinas durante el posparto (^{Funston, 2004}; ^{Lents et al., 2008}), y es probable que sean importantes mediadores de los efectos de la ingesta alimentaria y el balance energético en los bovinos. Así, los niveles séricos de estas hormonas y factores de crecimiento que regulan dichas funciones y su desempeño se ven afectados por los cambios en el peso corporal o estado nutricional que tienen las vacas en el posparto (^{Diskin et al., 2003}; ^{Barb & Kraeling, 2004}).

Por lo tanto, podría asumirse que en la duración del anestro posparto influyen y/o interactúan con varios factores y/o etapas fisiológicas que deben superarse y/o manipularse para reiniciar las funciones reproductivas: 1) involución uterina; 2) restauración del eje hipotálamo-hipófisis-ovarios; 3) inhibición y/o disminución de la sensibilidad a nivel hipotalámico y del vínculo materno para restaurar la liberación de hormonas gonadotrópicas; y 4) mantenimiento de un estatus nutricional posparto adecuado para indicar metabólicamente al cuerpo del animal que existen las condiciones necesarias para reiniciar la actividad reproductiva.

Finalmente, los resultados del presente estudio permiten inferir que, aunque no está clara la vía mediante la cual el amamantamiento controlado, el destete temprano o precoz y la complementación alimenticia ayudan a disminuir el anestro posparto, el amamantamiento controlado es una herramienta de manejo útil para hacer más eficiente el desempeño reproductivo de vacas cárnicas. Así, es necesario considerar las etapas por las cuales debe pasar la vaca durante el posparto para controlar de manera eficiente el anestro, y al mismo tiempo, seguir desarrollando investigación enfocada en develar las vías por las cuales la separación temporal o permanente del becerro de su madre reactivan el proceso reproductivo de las vacas.

Conclusiones

El amamantamiento restringido combinado con complementación alimenticia disminuyó el anestro posparto en vacas Simbrah bajo condiciones tropicales al incrementar el número y diámetro folicular, así como las concentraciones séricas de P₄ y E₂ durante el período posparto.