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El arroz (Oryza sativa L.) es considerado como un alimento básico para más de la mitad de la población en el mundo (Singh, 2015). Convirtiéndose en un producto agrícola importante, generando ingresos a lo largo del siglo XX, el mismo que ha ido evolucionando desde un cultivo de secano, hasta convertirse en un cultivo altamente tecnificado y productivo (Dugan, 2015). La plaga que más problemas ha causado en los últimos años en el cultivo de arroz es el caracol manzana dorado, Pomacea canaliculata (Lamarck) y está considerado entre las 100 peores especies invasoras del mundo (Global Invasive Species Database, 2013; Carvalho, 2019). Para la producción de arroz se requiere gran cantidad de agua, pero esto facilita la diseminación, alimentación y multiplicación del caracol manzana (Quiroz, 2012).
En los arrozales, P. canaliculata tiene una alta fecundidad y sus poblaciones pueden aumentar rápidamente en condiciones favorables (Ding et al., 2017). El caracol causa más daño después de la eclosión de los huevecillos (Gilioli et al., 2017). Además, esta plaga ha sido identificada como un vector importante de Angiostrongylus cantonensis, causando meningitis eosinofílica en humanos (Huang et al., 2019). P. canaliculata ha reducido significativamente la productividad del arroz en todo el mundo, particularmente en los países asiáticos y latinoamericanos (Correoso et al., 2017; Castillo et al., 2018). Según la Dirección General de Alimentación y Fomento Agroalimentario (2014) las pérdidas pueden alcanzar hasta 60%-90% de las plantas.
Los daños más importantes se producen durante los primeros estados fenológicos de las plántulas ya que las devoran causando daños extensos tanto en el arroz trasplantado como en el de semillas directas (al boleo) (Ibrahim et al., 2017). Su hábito de alimentación es hacia los tallos y hojas jóvenes de arroz con cáscara y podría consumir de 7 a 24 plántulas de arroz por día lo que daría como resultado un daño extremo al cultivo de arroz (Lee et al., 2019). En muchos países, las principales medidas de control utilizadas por los productores de arroz son los molusquicidas sintéticos como el metaldehído y la niclosamida (Hamid et al., 2015; Olivier et al., 2016).
La niclosamida, actualmente es reconocido como uno de los pesticidas más efectivos en el control de P. canaliculata, así como otros caracoles, como Biomphalaria y Oncomelania (Yang et al., 2016). Sin embargo, estos productos son tóxicos para especies no objetivo como peces, crustáceos, algas, renacuajos y larvas de mosquitos (Attademo et al., 2016). El uso de molusquicidas oxidantes basados en ozono y peróxidos es una buena alternativa ecológica; sin embargo, el control completo requiere una exposición casi continua a los residuos oxidantes para inducir la mortalidad, lo que puede no ser posible para todos los escenarios de tratamiento (Lake y Hofmann, 2019).
Los molusquicidas no oxidantes tienen un costo por volumen más alto que los químicos oxidantes, pero siguen siendo rentables debido a las menores tasas de uso, exposición corta requisitos de tiempo y rápida toxicidad (The United States Army Corps of Engineers, 2012; Naghma et al., 2017). Uno de ellos son las sales y quelatos de cobre, además de ser de uso orgánico (Capinera y Dickens, 2016). El cobre (Cu2+) es uno de los elementos micronutrientes esenciales para las plantas, pero el Cu2+ excesivo es tóxico para los organismos vivos (Hammond y Ferris, 2019); causando una amplia gama de efectos nocivos como la inhibición de la fotosíntesis y la síntesis de pigmentos, el daño a las membranas plasmáticas y otras alteraciones metabólicas (Yruela, 2009).
La mortalidad de los moluscos se debe a que sus altas concentraciones son tóxicas en la naturaleza, causando una interrupción final de la estructura del ADN y las proteínas, lo que finalmente resulta en la muerte (de Oliveira-Filho et al., 2004). Por lo tanto, se planteó evaluar el efecto del quelato de cobre en combinación con agua ozonizada (un molusquicida oxidante y un no oxidante) en el control del caracol manzana y con esto lograr disminuir la carga de pesticidas químicos usados para el cultivo de arroz.
Localización
Se realizaron los ensayos en una finca del cantón Salitre, provincia del Guayas. Se realizó en terrenos de la Hacienda ‘Delia María’ en el km 46. Estos terrenos fueron cedidos por los dueños para poder realizar los estudios. Las condiciones edafoclimáticas son típicas de un clima tropical (Cuadro 1).
Material vegetal
Se trabajó con arroz variedad INIAP-14 (Instituto Nacional de Investigaciones Agropecuarias, 1999). Ciclo vegetativo de 113- 117 días. Altura de planta de 99-107 cm, grano largo, arroz entero al pilar 62%, latencia de la semilla 4-6 semanas (INIAP, 1999).
Diseño experimental
El método utilizado en el ensayo fue experimental de campo, para lo cual se utilizó un diseño de bloque completo al azar (DBCA) con prueba de significancia Duncan al 5%. El ensayo fue dividido en parcelas, cada una correspondía a un bloque experimental con cinco tratamientos y cuatro repeticiones. La unidad experimental en la finca es una parcela de 5 x 5 m, que equivale a 25 m2, el área total del ensayo fue de 25 x 25 m = 625 m2 y el área útil del ensayo fue de 25 m2 (área útil de la parcela) x 20 parcelas = 500 m2.
Los tratamientos en estudio (Cuadro 2) fueron cultivados bajo sistema de piscina. Para cada tratamiento se colocaron 50 caracoles en total. Se estudiaron cinco tratamientos en los cuales se evalúa la dosis de 1 L y 2 L de quelato de cobre y la influencia del ozono, con concentración de 2 ppm, en el control del caracol.
Cuadro 2 Tratamientos de quelato de cobre y agua ozonizada utilizados en el estudio.
| Tratamiento | Dosis |
| T1 | 1 L de quelato de cobre/200 L de agua |
| T2 | 2 L de quelato de cobre/200 L de agua |
| T3 | 1 L de quelato de cobre/200 L agua ozonizada (C= 2 ppm) |
| T4 | 2 L de quelato de cobre/200 L agua ozonizada (C= 2 ppm) |
| T5 | Agua ozonizada (C= 2 ppm) |
Ozonización de agua
Para ozonizar el agua se utilizó un equipo generador de ozono (O3) de tipo descarga de corona de 20 g O3 h, alimentado por gas oxigeno (O2) de 99.99% de pureza y mediante burbujeo se mezcló el gas ozono con el agua hasta llegar a 2 ppm. Para medir la concentración de ozono en el agua se utilizó un colorímetro (CHEMetrics®).
Mortalidad
La mortalidad de los caracoles se evaluó al día siguiente después del tratamiento. Se investigó un total de diez cuadros cuadrados (0.1 m2) en cada parcela mediante muestreo sistemático aleatorio. Se recogieron todos los caracoles dentro de los marcos, se lavaron con agua desclorada y se dejaron recuperar durante 24 h. Los caracoles fueron considerados muertos por la presencia de decoloración, la ausencia de contracción muscular, hemorragia y el deterioro del cuerpo. El porcentaje de mortalidad (IM= número de caracoles muertos*100/número total de caracoles) se basa en la observación de caracoles muertos encontrados en un número total de individuos.
Análisis de datos
Usando el programa InfoStat los datos recogidos fueron sometidos al análisis de varianza (Anova) con cuatro repeticiones. La prueba de significancia utilizada fue la de Duncan al 5%.
El cobre es un molusquicida no oxidante que es efectivo contra el caracol manzana y es permitido como un molusquicida en plantaciones de tipo orgánico, esto debido a su baja toxicidad (McCartney, 2016; Wang et al., 2019). La quelatación del metal es importante puesto que hace los iones metálicos sean más disponibles para la absorción por las plantas o para el bloqueo de metales pesados Clemens et al. (1990). Los quelatos más comunes utilizados en la agricultura son EDTA (Ethylenediaminetetraacetic acid), EDDS (Ethylenediamine-N, N’-disuccinic acid), DTPA (diethylenetriaminepentaacetic acid) y EDDHA (ethylenediamine-N, N’-bis (2-hydroxyphenylacetic acid)) (Murali et al., 2018).
El ozono es una molécula con un potencial electroquímico alto y por lo tanto capaz de afectar las membranas de las células de los organismos vivos, además de brindar beneficios agronómicos a los cultivos (Landa et al., 2018; Pandiselvam et al., 2019). El Cuadro 3 indica que el quelato de cobre y el agua ozonizada presentaron efectos molusquicidas frente al P. caniculata.
Cuadro 3 Efecto Molusquicida de los tratamientos con quelato de cobre y agua ozonizada frente al P. canaliculata en pruebas de campo por el método de inmersión.
| Tratamiento | Mortalidad (%) |
| T1 | 83 ±5.29 b |
| T2 | 91.75 ±1.91 cd |
| T3 | 88 ±3.65 bc |
| T4 | 94 ±3.27 d |
| T5 | 10.5 ±1.91 a |
Medias con una letra común no son significativamente diferentes (p> 0.05). Los valores de promedio representan la media ± desviación estándar.
Existe diferencia significativa entre los tratamientos con cobre quelatado y el tratamiento testigo T5, por lo que podemos considerar como efectivo el efecto del quelato de cobre sobre los caracoles. Se observa que la dosis de 2 L ha-1, que corresponden a los tratamientos T2 y T4 con 91.75% y 94% respectivamente, es de mejor efectividad, frente al P. canaliculata, que los tratamientos T1 y T3 con 83% y 88% respectivamente, en los cuales se utilizó una menor la dosis de 1 L ha-1. Esto concuerda con investigaciones previas donde indican que el cobre en ciertas concentraciones es toxico para los organismos vivos como los moluscos (Chakraborti et al., 2016; Rhys, 2018).
En el estudio de Osorio et al. (2012) demostraron que la composición de la formula con cobre quelatado fue eficaz para disminuir la cantidad de posturas del caracol, pero no así para el control de los animales adultos dentro de las parcelas, dando una mortalidad menor de 70%. Además, se observa que el ozono en sinergia con el quelato de cobre es mejor que los tratamientos individuales, evidenciándose en los tratamientos T3 y T4. El tratamiento que presento mayor índice de mortalidad es el T4, donde se utilizó 2 L ha-1 de quelato de cobre con 200 L de agua ozonizada con 2 ppm de concentración, este dio una mortalidad de 94% siendo una alternatiova para disminuir el uso de pesticidas químicos.
Estudios realizados por Guzman (2019) en la misma zona indican que el agua ozonizada con quelato de cobre mejora el control del P. canaliculata en cultivos de arroz. Se cree que el mecanismo de acción de los productos a base de cobre se dirige a procesos fisiológicos específicos, como el transporte de electrones en el fotosistema, la división celular y la fijación de nitrógeno y al combinarlo con el agua ozonizada mejora el control del P. canaliculata, posiblemente por la doble acción molusquicida oxidante y no oxidante, demostrándose en los resultados del Cuadro 3.
Conclusiones
El resultado de este ensayo indica que el aplicar diferentes dosis de quelato de cobre, incide en la mortalidad del caracol manzana (Pomacea canaliculata) en el cultivo del arroz. El tratamiento 4, el cual estaba formulado con 2 L de quelato de cobre y 200 L de agua ozonizada con concentración de 2 ppm, dio el mejor resultado ya que controlo al caracol manzana en 94%. Se sugiere investigar a mayores concentraciones de ozono.
