Reproductores y cultivo

En mayo de 2004, los reproductores utilizados en este estudio (n= 17) fueron capturados con anzuelo en la zona norte de la isla San José, Baja California Sur (México) y fueron transportados al Centro de Investigaciones Biológicas del Noroeste (CIBNOR) en tanques cilíndricos de 500 L provistos de oxigenación suplementaria. En el laboratorio, los organismos fueron anestesiados con 50 mg·L^-1de tricaína metanosulfonato (MS-222), pesados y marcados en el dorso con marcas Spaghetti Floy Tags externas (Floy Tags & Mfg.; Seattle, WA, EE. UU.) para su posterior identificación.

Los peces fueron colocados en el exterior en un tanque circular (7 m³, 1 m de profundidad) a una densidad de 1.40 kg·m^-3en condiciones naturales de temperatura y fotoperiodo. El grupo estaba formado por 14 hembras y 3 machos con peso medio (desviación estándar [DE]) de 1.17 (0.36) kg y 1.36 (0.15) kg, respectivamente. Los peces fueron alimentados en días alternos con sardina congelada y caballa hasta saciedad. De 2004 a 2007, los peces fueron mantenidos en el exterior; luego, fueron transferidos a un tanque negro cilíndrico (7 m³) en un laboratorio cerrado, donde se mantuvieron hasta 2009. Las condiciones de agua adecuadas y estables se mantuvieron a través de un sistema de recirculación compuesto por sedimentadores, filtros, lámparas de luz UV, y enfriadores. Este tipo de sistema permite controlar los parámetros fisicoquímicos, como temperatura, oxígeno disuelto, CO₂, nitrógeno amónico, nitritos y nitratos. La oxigenación suplementaria se proporcionó con aireación por sopladores.

Se midió diariamente la temperatura (registrador de temperatura sumergible HOBO TidbiT, Onset; Bourne, MA, EE. UU.), la salinidad (refractómetro ATAGO; Bellevue, WA, EE. UU.) y el oxígeno disuelto (YSI 85, Yellow Springs Instruments; Yellow Springs, OH, EE. UU.). La temperatura media del agua durante el periodo de desove fue de 22.9 (1.2) °C, y osciló entre 21.1 y 23.8 °C. La temperatura del agua anual y el fotoperiodo se muestran en la Figura 1. La salinidad fue de 37 y el oxígeno disuelto osciló entre 5.3 y 6.2 mg·L^-1.

Figura 1.  Fotoperiodo (línea continua) y temperatura registrados en los tanques donde se mantuvieron los ejemplares de cabrilla sardinera en 2007 (línea discontinua) y 2008 (línea punteada). El área sombreada corresponde a la temporada de desove. 

Madurez

Los peces fueron pesados, y se tomaron muestras de las gónadas para determinar el estado de maduración y el sexo en febrero, julio, septiembre y noviembre de 2007 y enero de 2008. Se tomaron muestras de semen aplicando suave presión abdominal, y las muestras se colocaron en tubos Eppendorf para posteriormente observar la motilidad espermática. Las muestras de gónadas de hembras se obtuvieron introduciendo una cánula de polietileno en el oviducto. Para determinar el diámetro del ovocito y el estado de madurez, se capturaron imágenes de las muestras con una cámara digital Coolsnap-Pro Color (MediaCybernetics; Rockville, MD, EE. UU.) instalada sobre un microscopio óptico Bx-41 (Olympus; Tokio, Japón), y las imágenes se procesaron con el software Image-Pro Plus (v.5.0, MediaCybernetics).

Recolección y análisis de huevos

Después del desove, los huevos flotantes se pasaron a través de la tubería de salida al tanque recolector, donde se retuvieron por una malla (300 µm). Los huevos fueron recolectados todas las mañanas de los días de desove, lavados con agua de mar estéril y transferidos a un tanque (35 L) con aireación para estimar el número de huevos liberados y la tasa de fertilización (%). En este estudio, la tasa de fertilización representa los huevos obtenidos en un día de desove y no representa la fertilización de una hembra en particular. El número total de huevos se calculó contando el número de huevos en 20 muestras de 15 mL. El diámetro medio de los huevos se midió con el programa Sigma Scan 5.0 (Systat Software; Chicago, IL, USA). Los huevos fueron examinados bajo el estereoscopio para monitorear el desarrollo embrionario, y la tasa de fertilización se calculó tomando en cuenta las primeras etapas del desarrollo embrionario. Los huevos se colocaron individualmente en placas de microtitulación de 96 pocillos (en réplicas), un huevo por pocillo, y se mantuvieron a 23.0 ± 1.2 °C.

La tasa de fertilización se evaluó diariamente y se calculó como el número de huevos fertilizados/huevos flotantes totales. El número de huevos viables se calculó multiplicando el número total de huevos por la tasa de fertilización. En cuanto a la producción de huevos, se calculó el número relativo de huevos liberados anualmente (huevos·kg^-1) y la producción de huevos viables (huevos·kg^-1) tomando en cuenta la masa total de las hembras (kg) en el tanque. La hora del día en que se produjo el desove se determinó cuando se recogió el primer huevo en el tanque recolector.

Análisis estadístico

Las diferencias mensuales y anuales en el número de huevos recolectados y la tasa de fertilización para las 2 temporadas de desove se examinaron utilizando un análisis de varianza (ANDEVA,P< 0.05). El efecto lunar sobre la fecundidad se determinó mediante un ANDEVA de una vía, después de registrar el número de huevos por fase lunar y mes. La significancia estadística se determinó mediante elsoftwareStatistica v.8.0 (Stat Soft; Tulsa, OK, EE. UU.). Se modeló la tasa de fertilización esperada usando la función de enlace logit del modelo lineal generalizado en R v.4.1.2 (^{RStudio Team 2020}) en función de la fecha de desove y el número de huevos liberados por día. Se utilizó la desviación residual para evaluar la bondad de ajuste y la prueba de chi cuadrada para evaluar la validez del modelo.

Para asignar las fases lunares, se asignaron valores del 0 al 29 a cada fecha, donde 0 representa luna llena, y los demás valores, los días sucesivos. Los días se agruparon en 8 fases lunares adaptadas por ^{Grant et al. (2009)} de ^{Stolov (1965)} y ^{Bell y Defouw (1966)}. El histograma circular se realizó con la longitud de la barra que representa el número acumulado de huevos liberados (×10⁶), las líneas discontinuas y los puntos que representan la frecuencia de desove y el color que representa la tasa de fertilización según la fase lunar. Los datos se analizaron para determinar la posible correlación con la fase lunar utilizando la prueba de Rao. En este caso, se supuso significancia conP< 0.1 (^{Grant et al. 2009}).

Este estudio se llevó a cabo bajo los Lineamientos del Consejo de la Unión Europea (2010/63/EU) y el Gobierno de México (NOM-062-ZOO-1999) para la producción, el cuidado y el uso de animales de experimentación. Los protocolos y procedimientos experimentales contaron con la revisión y la aprobación del comité de acuicultura del CIBNOR. Los autores confirman que se cumplieron las políticas éticas de la revista Ciencias Marinas, como se indica en las directrices para autores, y que se recibió la aprobación del comité de revisión ética correspondiente.

Época de desove

En 2006, luego de 22 meses desde el inicio del estudio, ocurrió una puesta de 90,000 huevos no fecundados, el único desove en ese año. Los primeros huevos fértiles se recolectaron hasta 2007. En ese año, el primer lote de huevos se recolectó el 9 de marzo y el último se recolectó el 29 de junio. En 2008, la fecha del primer desove fue el 12 marzo, y la temporada de desove finalizó el 21 de mayo. Las épocas de puesta ocurrieron en los periodos en los cuales la temperatura aumentó (de 21.1 a 23.8 °C en 2007 y de 21.2 a 23.6 °C en 2008) con el incremento de las horas de luz (Fig. 1). Durante este experimento, los primeros huevos fertilizados se recolectaron justo antes de la oscuridad total, entre el atardecer y el anochecer, cuando era imposible observar algún signo de cortejo. El diámetro de los huevos presentó una media (±DE) de 864.0 ± 22.0 µm y un rango de 848.0 a 884.0 µm.

Maduración

Los peces muestreados en febrero de 2007 mostraron evidencia de madurez, aunque diferentes estados de madurez para los machos y las hembras. Once días después de este muestreo, se observó el primer desove de ese año. El tamaño de los ovocitos (media ± DE) osciló entre 107 ± 42 y 554 ± 103 µm. En julio de 2007, solo los machos estuvieron maduros (machos fluyentes); 4 hembras mostraron ovocitos vitelogénicos y 10 hembras mostraron ovocitos previtelogénicos. En septiembre y noviembre de 2007 no se observó ningún signo de madurez en ningún individuo. En enero de 2008, 3 hembras mostraron ovocitos hidratados, pero los machos aún no estaban maduros.

Producción de huevos

Hubo 43 días de desove en 2007 y 27 en 2008, con un número similar de días de desove (9 a 13 días) y huevos en cada mes, excepto en marzo de 2008, cuando solo se registraron 5 días de desove debido a que la temporada de desove comenzó a mediados de ese mes. El número medio mensual y anual de huevos obtenidos por día de desove (± error estándar) y la tasa de fertilización media (± error estándar) para 2007 y 2008 se presentan en la Tabla 1. Hubo una gran variación en la liberación de huevos diaria, de 18,560 o 471,000 huevos liberados por día en 2007 (media [± error estándar]: 101,705 [13,876]) y 800 a 145,000 huevos liberados por día en 2008 (media [± error estándar]: 40,510 [7,874]) (Fig. 2). No se observó ni una tendencia constante durante la temporada de desove. El número total de huevos obtenidos fue de 4.37 × 10⁶en 2007 y 1.07 × 10⁶en 2008 (Fig. 3, Tabla 2). El número relativo anual de huevos liberados fue de 288,750 huevos·kg^-1en 2007 y 72,919 huevos·kg^-1en 2008, y la producción de huevos viables fue de 184,800 huevos·kg^-1en 2007 y 25,375 huevos·kg^-1en 2008.

Figura 2.  Huevos liberados por día en 2007 (barras negras) y 2008 (barras grises) y tasa de fertilización en 2007 (puntos negros) y 2008 (puntos grises) con base en los desoves naturales de la cabrilla sardinera. Se muestra la relación entre el número de huevos liberados y la fecha de desove en 2007 (línea discontinua negra) y para los valores combinados de 2007 y 2008 (línea discontinua roja) con base en el enlace logit del modelo lineal general. 

Figura 3.  Huevos de la cabrilla sardinera acumulados durante la temporada de desove de 2007 y de 2008 en cautiverio. 

Análisis estadístico

El número de huevos recolectados por día de desove varió de 68,200 (abril) a 144,600 (junio) en 2007 y de 38,900 (marzo) a 47,000 (mayo) en 2008. No hubo diferencias estadísticamente significativas dentro de cada año (P> 0.05; Tabla 1), pero sí se observaron diferencias significativas entre 2007 y 2008 (P< 0.05). Se registró una tasa de fertilización baja cuando comenzó la temporada de desove, y esta aumentó gradualmente, con diferencias significativas entre meses en 2007 (P< 0.05). La tasa de fertilización presentó mayor variación diaria en 2007 en comparación con 2008, y se encontraron diferencias significativas (P< 0.05) entre los 2 años, con una disminución del 61.1% en 2007 al 32.3% en 2008.

En 2007 hubo una interacción significativa entre la tasa de fertilización y la fecha de desove, pero no se detectó una relación entre la tasa de fertilización y el número de huevos liberados diariamente (Fig. 2). La misma interacción significativa entre la tasa de fertilización y la fecha de desove se detectó para los datos combinados de 2007 y 2008. La expectativa no se desvió de cero. Además, la mayoría de los residuos presentaron un valor absoluto menor que 2. Aparentemente, no hubo puntos de datos influyentes, solo 3 valores atípicos sin influencia. La prueba de chi cuadrada para la desviación estándar residual arrojó un valor P de 0.99 para ambos modelos, por lo que podemos concluir que el modelo se ajustó bien. Para 2008, no se observó relación entre factores.

La frecuencia de desove fue significativamente diferente según las fases lunares. Se observaron más días de desove (9 días) durante la fase de luna llena en comparación con las fases gibosa menguante (4 días), menguante (3 días) o primer cuarto (2 días). Además, el número de huevos liberados fue significativamente mayor durante las fases de luna llena (1,067,696 huevos) y gibosa menguante (742,876 huevos) y significativamente menor durante el primer cuarto (107,222 huevos) en comparación con el número de huevos en las otras fases lunares (de 371,540 a 637,046 huevos). No se hallaron diferencias significativas en la tasa de fertilización. No obstante, se observó una tendencia a mayores tasas de fertilización desde la fase gibosa creciente hasta la de tercer cuarto (Fig. 4).

Figura 4.  Fecundidad (número acumulado de huevos ×10⁶), frecuencia de desove (número de días de desove) y tasa de fertilización de los desoves naturales de la cabrilla sardinera según las fases lunares. FM: luna llena; WnG: gibosa menguante; 3Q: cuarto menguante; WnC: luna menguante; NM: luna nueva; WxC: luna creciente; 1Q: cuarto creciente; WxG: gibosa creciente. 

Condiciones para el desove natural en cautiverio

La aclimatación de los organismos a las condiciones de cautiverio, la madurez gonadal y el desove natural están influenciados por un gran número de factores biológicos, físicoquímicos y ambientales. Por ejemplo, los peces criados en cautiverio pueden presentar problemas reproductivos si las condiciones ambientales no son adecuadas (^{Mustafa et al. 2015}). Por tanto, el mantener a los individuos de diferentes especies a temperatura y condiciones de tanque adecuadas con una alimentación y cuidados apropiados puede promover la reproducción espontánea en cautiverio. Nuestros resultados comprueban que el sistema de recirculación utilizado en los tanques (7 m³) en este estudio fue eficiente y produjo condiciones deseables para la maduración y la reproducción natural de la cabrilla sardinera. Además, los regímenes de alimentación y fotoperiodo y las condiciones de oxígeno, salinidad y temperatura fueron adecuados para el buen mantenimiento de los reproductores silvestres y el desarrollo de la reproducción con desove espontáneo de esta especie. El desove natural se ha reportado en un gran número de especies que incluye la seriola,Seriola dumerili(^{Jerez et al. 2006}), y el lenguado fino,Paralichthys adspersus(^{Angeles y Mendo 2005}). Existen numerosos ejemplos de especies de cabrilla en los que los individuos se mantuvieron en tanques de fibra de vidrio, jaulas o tanques de concreto con sistemas de recirculación (^{Toledo et al. 1993}, ^{James et al. 1997}, ^{Jagadis et al. 2006}, ^{Mathew 2010}, ^{Ranjan et al. 2017}).

La dieta proporcionada durante este estudio estuvo compuesta principalmente de sardina, caballa y calamar. Esta dieta fue similar a las observadas en estudios de alimentación natural de poblaciones silvestres deM. rosaceacon organismos del mismo tamaño que aquellos utilizados en el presente estudio (^{Peláez-Mendoza 1997}, ^{Pérez-Rojo 2016}). La dieta fue suficiente para mantener reproductores saludables y lograr la maduración y el desove. Sin embargo, se necesitan más estudios para desarrollar dietas artificiales que mejoren la calidad y cantidad de desoves. A pesar de que se conoce la importancia de la nutrición de los reproductores sobre la calidad de los huevos y las larvas, y la fecundidad, la nutrición de meros no ha sido estudiada adecuadamente (^{Luo et al. 2005}). Durante un estudio del desove natural deEpinephelus tauvina, los reproductores fueron alimentados con morralla, pequeños cefalópodos, vitaminas E y B12, y otros suplementos nutricionales para proporcionar un enriquecimiento esencial deácido eicosapentaenoico, ácido docosahexaenoico y ácidos grasos poliinsaturados (^{Mathew 2010}).

El tiempo de aclimatación y la madurez de peces en cautiverio dependen de varios factores, como las instalaciones, el manejo, la nutrición, y los aspectos biológicos de las especies. Los peces marinos comoSolea solea(^{Ofelio et al. 2020}) yS. dumerli(^{Jerez et al. 2006}) pueden tardar 2 y 6 años en madurar en cautiverio, respectivamente. Los meros han sido descritos como especies que pueden madurar y desovar naturalmente en cautiverio después de un periodo de aclimatación poscaptura, que puede ser relativamente corto en especies comoEpinephelus suillus(^{Toledo et al. 1993}),Epinephelus polyphekadion(^{James et al. 1997}) yEpinephelus merra(^{Jagadis et al. 2006}).

Ciclo reproductivo, época de desove e influencia de la temperatura, el fotoperiodo y la fase lunar

En la naturaleza, se ha observado que la cabrilla sardinera desova de mayo a junio (^{Estrada-Godínez et al. 2011}), de marzo a mayo (^{Sala et al. 2003}) o de abril a junio (^{Erisman et al. 2007}). ^{Estrada-Godínez et al. (2011)} observaron, en la temporada de desove, temperaturas que variaron entre 21 y 25 °C y aproximadamente 13 h de luz (^{Estrada-Godínez et al. 2011}). Las diferencias en la temporada de desove entre los diferentes estudios podrían referirse a diferencias en la temperatura y otras variables entre los sitios de estudio. ^{Sala et al. (2003)} sugirieron que las diferencias latitudinales en el golfo de California, relacionadas con la temperatura del agua, pueden provocar diferencias en los periodos de desove de la cabrilla sardinera. El ciclo reproductivo de la cabrilla sardinera en la naturaleza y en cautiverio muestra diferentes fases reproductivas a lo largo del año (^{Erisman et al. 2008}, ^{Estrada-Godínez et al. 2011}). Hay un periodo de reposo, desde agosto hasta noviembre, en el que los ovocitos comienzan a desarrollarse (^{Kiewek-Martínez et al. 2010}). Luego ocurre un periodo de maduración de 4 meses, que comienza cuando las horas de luz y la temperatura aumentan progresivamente.

En el presente estudio, la maduración final en las hembras y la maduración completa en los machos se observó en febrero de 2007 y enero de 2008 tras el análisis de los ovocitos. Con base en los huevos recolectados, el desove comenzó en marzo y duró hasta mayo-junio. Notamos que el comienzo de la época de desove ocurrió conforme incrementó el fotoperiodo, que puede ser lo que desencadena la madurez gonadal después del solsticio de invierno. No obstante, se requieren más estudios para comprobar esta hipótesis. De hecho, se han realizado pocos estudios sobre la influencia del fotoperiodo y la temperatura del agua en los meros a pesar de que estas variables son importantes en el proceso reproductivo (^{Rimmer y Glamuzina 2019}). ^{Kanemaru et al. (2012)} observaron la maduración en ejemplares deE. merraluego de la inducción con un análogo de la hormona liberadora de gonadotropina (GnRHa) y un fotoperiodo largo. La influencia de la temperatura sobre la madurez gonadal y el desove es poco conocida, y la temperatura por sí sola no fue suficiente para controlar el desarrollo gonadal enEpinephelus fuscoguttatus(^{Rimmer y Glamuzina 2019}).

La frecuencia de desove y la frecuencia de la liberación de huevos diaria fueron significativamente diferentes según las fases lunares, aunque no se hallaron diferencias significativas en las tasas de fertilización luego del análisis de 70 días a lo largo de la temporada de desove. Cabe señalar que estos resultados se basan en el efecto de la luna sobre un grupo de peces y no son los resultados de observaciones de peces individuales. Se ha encontrado que el ritmo lunar influye en el desove natural deE. merra(^{Jagadis et al. 2006}) yE. tauvina(^{Mathew 2010}) en cautiverio. En otro estudio, se encontró que la asociación del desove con el ciclo lunar se debilitó durante el periodo experimental (^{Ranjan et al. 2017}).

Producción de huevos

Los meros se aclimatan bien al confinamiento y generalmente pueden reproducirse espontáneamente en esas condiciones (^{Tucker 1994}). La eficiencia de la producción de huevos por animal fue muy clara, lo que respalda que la puesta natural es un componente importante en la reproducción de la cabrilla, especialmente si se consideran los beneficios asociados adicionales como menores costos de personal, instalaciones y energía y menos manejo de animales. El total de huevos liberados durante la temporada de desove fue de 4.3 × 10⁶en 2007 y 1.0 × 10⁶en 2008. Además, el desove natural también dio resultados exitosos en la producción de huevos.

En estudios previos, se recolectaron un total de 47.00 × 10⁶huevos conEpinephelus coioides(^{Ranjan et al. 2017}), 9.20 × 10⁶huevos conE. tauvina(^{Mathew 2010}) y más de 17.00 × 10⁶huevos enE. polyphekadion(^{James et al. 1997}). Son evidentes las grandes diferencias en la producción de huevos entre estos estudios, pues utilizaron diferentes especies, tamaños de individuos, condiciones de confinamiento, métodos de alimentación e instalaciones. En el presente estudio hubo diferencias entre 2007 y 2008, incluso diferencias significativas en el número de huevos recolectados y sus tasa de fertilización. Estas diferencias pueden deberse a que los animales fueron trasladados a un laboratorio cerrado en 2007 después de la época de desove. No obstante, las razones de estas diferencias no son claras, ya que los parámetros físicoquímicos, la alimentación y el manejo fueron similares en ambos años.

Es difícil comparar los resultados del presente estudio con aquellos estudios que han empleado la inducción hormonal. Los resultados aquí expuestos se obtuvieron de un grupo de peces y no provinieron de datos de los individuos. Sin embargo, los resultados colectivos de todos los estudios sobre este tema permiten visualizar las mejoras que se han producido con el desove natural en comparación con la inducción hormonal. La tasa de fertilización y la fecundación que se han obtenido tras la inducción con hormonas (hCG y LHRHa) enM. rosaceason muy variables y oscilan entre 3 × 10³y 571 × 10³huevos por puesta (^{Kiewek-Martínez et al. 2010}), lo que resultó en la producción de 3.70 × 10⁶huevos viables con 97 hembras y una baja tasa de fertilización. En general, los estudios de la reproducción en la cabrilla sardinera demuestran los beneficios de la reproducción natural dado que, en comparación con la inducción hormonal, la reproducción natural rinde una mayor producción de huevos con un menor número de ejemplares.

La producción de huevos estimada fue de 288 × 10³y 73 × 10³huevos·kg^-1en 2007 y 2008, respectivamente. La variación interespecífica en la fecundidad se ha observado con otras especies que presentan mayor fecundidad que la cabrilla sardinera. Por ejemplo, se observó que la fecundidad relativa anual fue mayor que 400,000 huevos·kg^-1con el pargo rojo,Pagrus pagrus(^{Mylonas et al. 2004}), y de 2.80 a 4.90 × 10⁶huevos·kg^-1con el pargoDiplodus puntazzo(^{Papadaki et al. 2008}).

Número de puestas

Las hembras de cabrilla sardinera presentan desarrollo ovárico sincrónico por grupos (^{Maldonado-García et al. 2018}). Los peces sincrónicos grupales tienen ovarios con distintos tipos de ovocitos al mismo tiempo. Estos peces pueden ovular una vez o durante unos pocos días o semanas en un ciclo reproductivo. En el presente estudio, se observaron 43 días de desove en 2007 y 27 días de desove en 2008, y el número de días de desove por mes se mantuvo relativamente constante (9-13 días de desove por mes) excepto en marzo de 2008. En este mes, los peces comenzaron a desovar el 12 de marzo, lo que dio como resultado solo 5 desoves en ese mes.

En general, las especies de mero que se reproducen de forma natural en cautiverio desovan varias veces al mes durante varios meses del año. El desove natural ha sido observado en casi todos los meses durante 2 años consecutivos (^{Mathew 2010}). Durante la temporada de desove, se ha observado un aumento en la frecuencia de desove de 5 a 13 puestas por mes (^{Ranjan et al. 2017}). Además, se observaron múltiples puestas entre agosto y octubre en 2004, con un número de huevos por puesta que osciló entre 22,000 y 180,000 (^{Jagadis et al. 2006}). Finalmente, se encontró que meros que habían desovado unas cuantas veces al año durante 3 años consecutivos fueron capaces de desovar 2-3 veces al mes durante 4 meses después de que se implementaron cambios a la nutrición de los reproductores (^{James et al. 1997}). Como futura meta de investigación, se deben incorporar organismos reproductores silvestres en los programas de crianza en cautiverio para aprovechar su composición genética y evitar la endogamia, lo que puede impactar de manera negativa las generaciones posteriores (^{Bright et al. 2016}, ^{Superio et al. 2021}).

Época de desove

La falta de luz en el momento del cortejo y el desove no permitió la observación directa de estas 2 acciones. Sin embargo, las observaciones directas a lo largo de este experimento permitieron confirmar que los primeros óvulos fecundados obtenidos en el recolector aparecieron entre la puesta del sol y la noche, justo antes de la oscuridad total. ^{Erisman et al. (2007)} estudió el comportamiento de desove de la cabrilla sardinera en su entorno natural e indicó que el desove ocurrió al final de la tarde a pocas horas antes de la puesta del sol. El desove conforme se acerca la oscuridad es un comportamiento regular que se ha observado con frecuencia en otras especies, como el meroEpinephelus marginatus, el cual fue observado desovar una hora antes y media hora después de la puesta del sol alrededor del periodo de la luna nueva (^{Zabala et al. 1997}). Este comportamiento de desove también se ha observado con el mero de Nassau,Epinephelus striatus(^{Whaylen et al. 2004}). El desove de entre 10 y 17 individuos se observó en el anochecer a pocos días después de la luna llena (^{Rowell et al. 2019}). Los desoves naturales en cautiverio a menudo se han observado durante la tarde, el atardecer y la noche (^{Jagadis et al. 2006}, ^{Mathew 2010}, ^{Ranjan et al. 2017}), pero también pueden ocurrir por la mañana (^{James et al. 1997}).

Tamaño de los ovocitos fertilizados

El diámetro medio (±DE) de huevos del desove natural fue de 864.0 ± 22.0 μm (848.0 a 884.0 μm). Se han encontrado diámetros de huevo similares mediante la inducción hormonal, a saber: 859.0 ± 18.0 μm (^{Gracia-López et al. 2005}), 860.0 ± 30.0 μm y 880.0 ± 20.0 μm (Gracia-López et al. 2004a), y 872.0 ± 15.0 μm (^{Gracia-López et al. 2004b}). Los huevos deE. merrafueron descritos como perfectamente esféricos y flotantes, con diámetros que oscilaron entre 710.0 y 730.0 μm (^{Jagadis et al. 2006}). Los huevos fertilizados deE. coioideseran redondos y midieron alrededor de 857.7 μm (^{Fourooghifard et al. 2017}). El diámetro de los huevos deE. polyphekadionfue de 757.3 ± 37.4 μm (^{James et al. 1997}). Es importante mencionar que el diámetro de huevo resultante fue mayor en los huevos obtenidos por desove natural que en aquellos obtenidos por inducción hormonal (^{Papanikos et al. 2003}).

En conclusión, con nuestra metodología, podemos asegurar una producción de huevos constante en cautiverio con peces capturados en libertad y mantenidos durante aproximadamente 2 años sin manipular los parámetros que comúnmente afectan la reproducción de los peces. La cabrilla sardinera desova durante 3-4 meses y puede producir 184 × 10³huevos viables·kg^-1. En este estudio, la época de desove (marzo a mayo-junio) estuvo relacionada con el incremento de la temperatura y el fotoperiodo, aunque se requieren más estudios para confirmar el efecto de estas variables sobre la reproducción de la cabrilla sardinera. Por último, la fase lunar tuvo un efecto sobre la fecundidad a lo largo de la temporada de desove.