INTRODUCCIÓN

Symbiodinium Gert Hansen & Daugbjerg es un género fotosintético con clados y subclados oportunistas y de vida libre, distribuidos en zonas tropicales y subtropicales (^{Takabayashi et al. 2012}, ^{Granados-Cifuentes et al. 2015}, ^{Hoppenrath et al. 2023}). El nombre del género es considerado como neutro y significa ‘‘viviendo juntos’’ y ‘‘girando’’ (^{LaJeunesse et al. 2018}). A estos organismos también se les ha denominado Zooxanthella K. Brandt (^{Guiry y Andersen 2018}). Esto hace referencia a la simbiosis mutualista que presenta el alga, en este caso, a la simbiosis del dinoflagelado con invertebrados como cnidarios, almejas, copépodos, platelmintos, esponjas y algunos protozoarios como foraminíferos, radiolarios y ciliados (^{Baker 2003}, ^{Hirose et al. 2008}, ^{LaJeunesse et al. 2018}). También, se les clasifica como citobiontes o simbiontes intracelulares (^{Taylor y Harrison 1983}).

Especies de la familia Symbiodiniaceae (e.g., Symbiodinium microadriaticum LaJeunesse y Symbiodinium pilosum Trench & R.J. Blank ex La Jeunesse) presentan respuestas fotosintéticas distintas en condiciones idénticas de laboratorio. Estas diferencias fotosintéticas explican la presencia de esta familia en nichos diversos que pueden ocupar (^{Iglesias-Prieto y Trench 1994}). La especificidad huésped-simbionte demuestra la capacidad de un simbionte para estar especializado a cierto huésped que habite en una región en concreto, además, se muestran variaciones en dicha especificidad en amplios rangos geográficos. Las variables físicas (temperatura e irradiancia) y biológicas (diversidad y abundancia de huésped, y diversidad y abundancia de simbiontes) modulan la especificidad entre simbionte y huésped (^{Iglesias-Prieto et al. 1992}, ²⁰⁰⁴; ^{Iglesias-Prieto and Trench 1994}, ¹⁹⁹⁷). Además de su rol como simbiontes, se han reportado que extractos de cepas de la familia Symbiodiniaceae aislados de la anémona Stichodactyla haddoni (Saville-Kent) son citotóxicos para el crustáceo Artemia salina (Linnaeus) (^{Bigham-Soostani et al. 2021}).

La familia Symbiodiniaceae es un grupo diverso que comprende varios clados genéricos y subgenéricos, cada uno de ellos formado por un número desconocido de subespecies o subclados (^{Iglesias-Prieto et al. 2004}, ^{LaJeunesse et al. 2018}). Las reconstrucciones filogenéticas con genes ribosomales (28S y 23S) y de cloroplastos (psbA) han revelado 9 clados (A al I) (^{Hirose et al. 2008}, ^{Hansen y Daugbjerg 2009}, ^{Pochon y Gates 2010}, ^{Yamashita y Koike 2013}, ^{LaJeunesse et al. 2018}). Se han propuesto nuevos géneros con respecto a las agrupaciones filogenéticas: Symbiodinium Gert Hansen & Daugbjerg (clado A), Breviolum J.E. Parkinson & LaJeunesse (clado B), Cladocopium (clado C), Durusdinium LaJeunesse (clado D), Effrenium LaJeunesse & H.J. Jeong (clado E), Fugacium LaJeunesse (clado F) y Gerakladium LaJeunesse (clado G) (^{LaJeunesse et al. 2018}). Son pocos los clados donde existe una aparente diferencia morfológica: el clado B que presenta tamaños celulares de 6 a 12 µm, y el clado C que presenta un surco apical llamado acrobase (^{LaJeunesse et al. 2018}).

Las cepas analizadas en este estudio pertenecen al clado A, correspondiente al linaje más antiguo de la familia Symbiodiniaceae, que está integrado por S. microadriaticum, Symbiodinium necroappetens LaJeunesse, S. Y. Lee, Knowlton & H. J. Jeong, Symbiodinium tridacnidarum S. Y. Lee, H. J. Jeong, N. S. Kang & LaJeunesse, Symbiodinium natans Gert Hansen & Daugbjerg y Symbiodinium linucheae (^{Hansen y Daugbjerg 2009}, ^{LaJeunesse et al. 2018}). El clado A incluye especies de vida libre como S. pilosum y S. natans (^{Yamashita y Koike 2013}, ^{LaJeunesse et al. 2015}), además de grupos con formas transitorias, oportunistas, de vida libre y simbióticas que se pueden encontrar asociados a un hospedador invertebrado o protista (^{LaJeunesse et al. 2018}). También puede habitar diferentes sustratos como la arena (^{Carlos et al. 1999}, ^{Hoppenrath et al. 2023}), y formar simbiosis con corales blandos (e.g., Stereonephthya cundabiluensis Verseveldt), corales pétreos o corales duros como Orbicella faveolata (Ellis & Solander) (^{Hirose et al. 2008}, ^{Kemp et al. 2014}).

MATERIALES Y MÉTODOS

Aislamiento y condiciones de cultivo

Las células fueron aisladas de la columna de la anémona solitaria Actinostella sp. (Hexacorallia: Actinaria: Actiniidae; Fig. 1) que fue recolectada por Ana E Ramos-Santiago el 9 de agosto de 2018 en la playa del CETMAR (24°08′39.2″ N, 110°20′41.0″ W; Fig. 2), Bahía de La Paz, en el suroeste del Golfo de California, México. Las células no móviles fueron aisladas en un microscopio invertido AXIO Vert.A1 (Carl Zeiss, Oberkochen, Alemania), con ayuda de capilares con punta reducida. Se realizó un escalamiento progresivo hasta obtener cultivos de 25 mL en tubos planos de 50 mL de volumen. Las cepas SNCETMAR-1 y SNCETMAR-2 se mantuvieron en medio GSe con extracto de lombricomposta (^{Bustillos-Guzmán et al. 2015}) y medio K (^{Keller et al. 1987}) modificado con la adición de extracto de lombricomposta (^{Keller et al. 1987}), a una salinidad de 34, temperatura de 24 °C ± 1 °C, con iluminación continua de 150 μmol E·m^-2·s^-1 y un ciclo de 12 h luz:12 h oscuridad.

Figura 1 Symbiodinium-clado A y la anémona hospedera Actinostella sp. Ejemplar de la anémona Actinostella sp. preservado en formalina al 4%, se observa la vista superior del collar y disco oral con tentáculos retraídos (flecha roja); vista lateral de la columna (flecha azul) (a). Detalle de Actinostella sp. viva, se observa coloración, detalle inferior del collar con verrugas pequeñas alineadas (flecha gris) (b). Vista lateral de la columna con verrugas grandes y numerosas (flechas blancas) (c). Células de Symbiodinium sp. (cepa SNCETMAR-2) recién aisladas, con cloroplastos verde-amarillos (cl) y pirenoide (pi) (flechas negras) (d). 

Figura 2 Localización de la Bahía de La Paz, Baja California Sur, México. El sitio de muestreo playa CETMAR se indica con el marcador rojo (24°08′39.2″ N, 110°20′41.0″ O). 

RESULTADOS

Morfología de Symbiodinium-clado A

Células solitarias, de coloración rojiza, con movimiento giratorio, las cuales se distribuyen en el fondo y paredes del tubo de cultivo (Fig. 3a, b). Cloroplastos reticulados, parduzcos y periféricos (Fig. 3c). El pirenoide se encuentra en la zona central de la célula y tiene un diámetro de 2.65 ± 0.52 µm (Fig. 3c-e). Las células mastigote (móviles) tienen forma de hongo, comprimidas lateralmente, con el epicono ligeramente más grande que el hipocono (Fig. 3c-i). Las células móviles miden de 10.93 ± 0.98 µm de largo y 7.79 ± 1.06 µm de ancho (media ± DE; n = 30) en la cepa SNCETMAR-1 (Tabla S1), y 11.78 ± 1.05 µm de largo y 8.02 ± 1.38 µm de ancho (media ± DE; n = 30) en la cepa SNCETMAR-2 (Tabla S1). El núcleo está localizado en la parte anterior de la célula (Fig. 3h, l). Otro morfotipo observado fueron células no móviles cocoides, con un diámetro de 12.01 ± 0.83 µm (media ± DE; n = 30; Fig. 3j-l). El morfotipo no móvil carece de rasgos morfológicos típicos de las células móviles.

Figura 3 Subclado Symbiodinium natans-clado A de la Bahía de La Paz. Cepa SNCETMAR-2 en medio GSe (a). Cepa SNCETMAR-1 (c-f). Cepa SNCETMAR-2 (b, g-l). Células cocoides, no móviles, agrupadas por medio de mucílago (b). Vista ventral de células móviles con la forma típica de hongo (c-e). Quistes reproductivos redondeados y alargados, presentan sustancias de reserva o una mancha ocular (flecha blanca) (f). Células no móviles en forma de hongo y estado cocoide (g, j). Con tinción DAPI se muestra la posición y forma del núcleo (n) en las 2 fases del ciclo de vida de Symbiodinium sp. (h, l). Imágenes de epifluorescencia de los cloroplastos (i, k). cl = cloroplastos, pi = pirenoide, fl = flagelo longitudinal. 

Se documentaron 2 formas de vida en ambas cepas de Symbiodinium, células móviles y células inmóviles en estado cocoide, siendo esta última la fase dominante. Se observaron células no móviles en predivisión (Fig. 4a-c). Se documentaron diferentes fases de los procesos de división, díadas que habían duplicado los pirenoides y la presencia de un cuerpo de acumulación, por otro lado, células con 2 cuerpos de acumulación que podrían indicar la fusión de 2 gametos (Fig. 4c-f). También, se observaron células formando agrupaciones en tríadas y tétradas (Fig. 3g-j) y la presencia de cigotos formados por fusión (singamia) de gametos (Fig. 4k, l). En células cocoides en proceso de reproducción se observaron cuerpos de acumulación de color rojo-naranja, probablemente lípidos como sustancias de reserva o una mancha ocular (Fig. 5).

Figura 4 Quistes de Symbiodinium natans-clado A de la Bahía de La Paz. Cepa SNCETMAR-1 (e, h, j-l). Cepa SNCETMAR-2 (a, b, c, d, f, g, i). Quiste de predivisión inmóvil o estadio cocoide (a-c). Quiste de división bicelular (fase díada) (d-f). Meiosis I, fase de tríada (g-i). Meiosis II, fase de tétrada, donde se forman 4 células haploides (j). Cigoto (diploide) (k, l). Flecha blanca con margen = sustancias de reserva (lípidos) o una mancha ocular, asterisco (*) = proceso de fisión binaria. 

Figura 5 Células de Symbiodinium-clado A (cepa SNCETMAR-2) en microscopio de epifluorescencia. Micrografías ópticas de quiste inmóvil (a, d, g, i, k). Autofluorescencia del cloroplasto en vista ventral de la célula (b, c, f, j). Tinción DAPI del núcleo (n) (e, h, l). Flecha blanca con margen = lípidos como productos de reserva o mancha ocular, flecha roja = plano de división. 

Con MEB se corroboró la morfología de las células móviles y los estados reproductivos anteriormente mencionados, así como el cingulum, el cual es descendente, desplazado aproximadamente un ancho del cingulum (Fig. 6). El arreglo de placas del anfiesma no se logró observar con esta técnica.

Figura 6 Células vegetativas de Symbiodinium natans-clado A en microscopio electrónico de barrido. Cepa SNCETMAR-1 (b, c, g, h). Cepa SNCETMAR-2 (a, d, e, f, i, j). Quistes vegetativos, fase dominante de Symbiodinium sp. (a). Vista ventral (b). Vista dorsal (c, e). Zoosporangio con detalle del cingulum donde se alberga el flagelo transversal (d). Proceso de fisión binaria (f, g). Meiosis I (h, i). Meiosis II (j). ci = cingulum, su = sulcus, ep = epicono, hi = hipocono. 

Identificación molecular

Se obtuvo una secuencia de 514 pb de la región 28S del ADNr de la cepa SNCETMAR-2 (PP563703). En los análisis BLAST realizados en este estudio, la secuencia mostró un 100% de identidad con la secuencia OQ449283, identificada como S. natans. Sin embargo, se procuró que las secuencias seleccionadas provinieran de estudios publicados o de investigaciones posteriores en las que su identificación molecular haya sido corroborada. Para la reconstrucción filogenética de este grupo taxonómico se incluyeron secuencias de los 9 clados que se aceptan para la familia Symbiodiniaceae (Tabla 1). La secuencia de este estudio se agrupó dentro del clado A con valores de soporte de bootstrap del 91 y 97 para MP y MV, y probabilidad posterior de 0.98 con IB (Fig. 7). La secuencia de la cepa SNCETMAR-2 formó un subclado con secuencias de S. natans con valores de soporte de bootstrap del 70 al 89 (Fig. 7). Se compararon 2 secuencias de S. natans (AB704055 y AB704058) con la secuencia SNCETMAR-2; se observó que en la secuencia AB704055 hay una transición (C por T) en la posición 416, mientras que en la secuencia AB704058 existe una transición (A por G) en la posición 461. El análisis de las divergencias genéticas por pares entre las secuencias identificadas como clado A reveló valores bajos, que oscilaron entre 0.025 y 0.032. En contraste, las divergencias con secuencias de otros clados fueron superiores a 0.141 (Tabla 2).

Tabla 1 Secuencias de la familia Symbiodiniaceae incluidas en el análisis filogenético de la región 28S del ADNr y de Gymnodinium catenatum que se usó como grupo externo. 

GenBank ID	Taxón	Cepa	Origen de aislamiento	Localidad	Referencia
PP563703	Symbiodinium natans	SNCETMAR-2	Actinostella sp.	Bahía de La Paz, México	Este estudio
AB704058	Symbiodinium natans	FGS-D6-Sy	Arena	Isla Gahi, Okinawa, Japón	Yamashita y Koike (2013)
AB704055	Symbiodinium natans	GTP-A6-Sy	Poza de marea	Isla Gahi, Okinawa, Japón	Yamashita y Koike (2013)
EU315917	Symbiodinium natans	CAT2393	SD	Tenerife, España	Hansen y Daugbjerg (2009)
KT634312	Symbiodinium sp.	zs12xd	Zoanthus sp.	Tavernier, Cayos de Florida, EE. UU.	Graham et al. (2015)
LK934674	Symbiodinium sp.	CCMP2456	Alveopora japonica Eguchi, 1965	Jeju, Corea	Sin publicar
AB778578	Symbiodinium sp.	KMG004-a-02	Pteraeolidia ianthina (Angas, 1864)	Chiba, Japón	Yorifuji et al. (2015)
KF740671	Symbiodinium pilosum	rt-185	Zoanthus sociatus (Ellis, 1768)	Jamaica	Jeong et al. (2014)
ON263282	Symbiodinium necroappetens	A13	SD	SD	Sin publicar
MK692538	Symbiodinium linucheae	SSA01	SD	SD	Sin publicar
KM972549	Symbiodinium microadriaticum	rt-061	Cassiopea xamachana Bigelow, 1892	Florida, EE. UU.	Lee et al. (2015)
LK934669	Symbiodinium microadriaticum	CCMP2467	Alveopora japonica	Jeju, Corea	Sin publicar
KT149349	Symbiodinium minutum	Mf1.05b	SD	Caribe	Parkinson et al. (2015)
LK934670	Symbiodinium minutum	CCMP830	Alveopora japonica	Jeju, Corea	Sin publicar
KT149351	Symbiodinium psygmophilum	PurPFlex	SD	Caribe	Parkinson et al. (2015)
KF364606	Symbiodinium sp.	RCC 1521	Arrastre de red superficial	Blanes, Mar Mediterráneo	Jeong et al. (2014)
AF060899	Gymnodinium varians	CCMP 421	SD	SD	Wilcox (1998)
AJ291539	Symbiodinium sp.	1584	Amphisorus sp.	Guam	Pawlowski et al. (2001)
AJ291536	Symbiodinium sp.	1643	Marginopora	Luminao, Guam	Pawlowski et al. (2001)
KF740689	Symbiodinium sp.	MTB4	Orbicella faveolata (Ellis & Solander, 1786)	EE. UU.	Jeong et al. (2014)
KF740686	Symbiodinium sp.	Tha09-57	Oulastrea crispata (Lamarck, 1816)	Tailandia	Jeong et al. (2014)
FN561562	Symbiodinium sp.	nr-i4	Foraminífero subfamilia Soritinae Ehrenberg	Oahu, Hawái, EE. UU.	Pochon y Gates (2010)
AJ291513	Symbiodinium sp.	751	Sorites sp.	Florida, EE. UU.	Pawlowski et al. (2001)
KF740682	Symbiodinium sp.	Zam03-3m-83	Millepora Linnaeus, 1758	Japón	Jeong et al. (2014)
FJ529530	Symbiodinium sp.	C3nt	Seriatopora hystrix Dana, 1846	Australia	Sampayo et al. (2009)
AJ830916	Symbiodinium sp.	MS26_5244x	Amphisorus hemprichii Ehrenberg, 1965	Guam	Sin publicar
AJ291525	Symbiodinium sp.	1635	Marginopora sp.	Piti, Guam	Pawlowski et al. (2001)
KU359161	Symbiodinium kawagutii	symka	SD	SD	Sin publicar
AF360577	Symbiodinium kawagutii	Clado C	Montipora verrucosa (Lamarck, 1816)	Hawái, EE. UU.	Santos et al. (2001)
SD	Gymnodinium catenatum	BAPAZ 16	SD	Bahía de La Paz, BCS, México	Sin publicar
+SD: Sin dato.

Tabla 2 Distancias genéticas por pares basadas en 13 secuencias de la familia Symbiodiniaceae seleccionadas de la región 28S del ADNr. Las divergencias genéticas observadas entre la secuencia de este estudio (*) perteneciente al clado A y los otros clados se muestran en negritas. Las letras A-I indican los clados de la familia Symbiodiniaceae. 

		A				B	C	D	E	F	G	H	I	Symbiodinium kawagutii
		KF740671	PP563703*	KT634312	AB778578	KT149349	FJ529530	KF740689	AF060899	AJ830916	AJ291539	AJ291513	FN561562	AF360577
A	KF740671
	PP563703*	0.025
	KT634312	0.028	0.014
	AB778578	0.032	0.018	0.004
B	KT149349	0.237	0.240	0.240	0.244
C	FJ529530	0.208	0.208	0.212	0.216	0.134
D	KF740689	0.198	0.219	0.219	0.216	0.208	0.170
E	AF060899	0.155	0.141	0.155	0.159	0.216	0.187	0.194
F	AJ830916	0.212	0.212	0.216	0.219	0.120	0.092	0.198	0.201
G	AJ291539	0.265	0.265	0.265	0.261	0.226	0.184	0.177	0.233	0.216
H	AJ291513	0.187	0.191	0.194	0.198	0.124	0.049	0.159	0.180	0.085	0.184
I	FN561562	0.205	0.212	0.219	0.219	0.159	0.134	0.177	0.205	0.141	0.201	0.127
Symbiodinium kawagutii	AF360577	0.449	0.452	0.449	0.452	0.484	0.470	0.473	0.466	0.491	0.516	0.459	0.456

Figura 7 Árbol filogenético de Symbiodinium de la región 28S del ADNr. En negritas se indica la secuencia de la cepa SNCETMAR-2 (PP563703) de este estudio. El análisis se dedujo utilizando el método de máxima parsimonia (MP), máxima verosimilitud (MV) e inferencia bayesiana (IB). En los nodos se muestra el porcentaje de soporte de bootstrap y probabilidad posterior de los clados y subclados. El análisis incluyó 30 secuencias, analizando secuencias parciales de 558 pb. Las secuencias seleccionadas para el análisis de divergencia genética de la Tabla 2 se indican con asteriscos. SD = sin dato. 

DISCUSIÓN

El tamaño de las células móviles de S. natans-clado A pueden ir de 9.5 a 11.5 µm de largo y de 7.4 a 9 µm de ancho (^{Hansen y Daugbjerg 2009}, ^{LaJeunesse et al. 2015}, ^{Lee et al. 2015}, ^{Guiry y Guiry 2024}), lo que concuerda con lo reportado en este estudio. Los subclados que presentan una morfología similar son S. necroappetens y S. microadriaticum; sin embargo, estos presentan tamaño celular que va de 9 a 12 µm (mayor que S. natans) y de 7 a 10 µm (menor a S. natans), respectivamente (^{LaJeunesse et al. 2015}).

La identificación morfológica y molecular actual dentro de la familia Symbiodiniaceae es compleja. Las características morfológicas descriptivas para el grupo son el número, forma y posición de las placas anfiesmales; sin embargo, estas no son suficientes para una identificación específica, ya que pueden ser similares o diferentes dentro y entre los grupos que componen los clados (^{Lee et al. 2015}, ^{LaJeunesse et al. 2018}). Por otra parte, la información morfológica de las placas anfiesmales en la fase móvil (mastigote) de clados poco emparentados, puede arrojar información morfológica distinta, como en los clados A y E (^{Lee et al. 2015}). Otros caracteres morfológicos anteriormente empleados fueron la forma y tamaño del pirenoide, cloroplastos y núcleo; sin embargo, en la familia Symbiodiniaceae estos caracteres son compartidos y tampoco funcionan para diferenciar entre clados o subclados (^{Lee et al. 2015}). Solo existe un carácter de autopomorfía, que es la reducción de una vesícula apical alargada pronunciada (acrobase o surco apical), característica presente en el clado C (^{LaJeunesse et al. 2018}). No obstante, los miembros pertenecientes al clado A carecen de dicho carácter, por lo que dicha estructura no es relevante en las cepas analizadas en este estudio.

La morfología del grupo puede variar dependiendo de la fase en la que se encuentre, pudiendo observar su fase cocoide típica de la reproducción asexual, formas elipsoidales a formas de hongo (fase móvil). Las células cocoides pueden medir de 8 a 10 µm de diámetro (^{LaJeunesse et al. 2018}), mientras que las células móviles pueden tener un tamaño promedio de 6 a 12 µm de largo (^{Hansen y Daugbjerg 2009}, ^{LaJeunesse et al. 2018}). En cultivo se observaron células formando agrupaciones en tríadas y tétradas, lo que corresponde a la meiosis I y meiosis II tardía de la reproducción sexual, respectivamente. Estos estados reproductivos han sido reportados por ^{Figueroa et al. (2021)} en una cepa de Symbiodinium del clado C (Cladocopium latusorum Turnham, Sampayo & LaJeunesse) proveniente de Moorea de la Polinesia Francesa, Océano Pacífico Sur.

Las reconstrucciones filogenéticas con genes ribosomales (28S y 23S) y de cloroplastos (psbA) revelan 9 clados (A al I) evolutivamente divergentes (véase Tabla 2, ^{Pochon y Gates 2010}, ^{LaJeunesse et al. 2018}). Los valores de divergencia genética por pares altos y bajos en este estudio fueron muy similares a los de ^{Pochon y Gates (2010)}, debido a que se incluyeron algunas secuencias de la subunidad larga identificadas por estos autores como clado E (AF060899), clado F3 (AJ830916, AJ291525), clado G (AJ291539), clado H (AJ291513) y clado I (FN561562). Los diferentes clados de la familia Symbiodiniaceae presentan diferentes atributos genéticos, fisiológicos y ecológicos; por lo que estos clados se pueden subdividir por un número desconocido de filoespecies (^{Hirose et al. 2008}, ^{De Palmas et al. 2015}, ^{LaJeunesse et al. 2018}). En estudio con el análisis de la región 28S se obtuvieron los 9 clados aceptados para el grupo. La secuencia de este estudio tuvo mayor afinidad genética con secuencias del clado A, y específicamente con secuencias de la especie de vida libre S. natans de Japón y España (^{Yamashita y Koike 2013}, ^{LaJeunesse et al. 2015}). A pesar de que este clado presenta una gran diversidad genética (alrededor de 15 subclados), el marcador 28S nos ayudó a identificar el clado A y la presencia de 4 subclados dentro de este; sin embargo, se ha visto que un marcador altamente variable como el conjunto ITS ayudarían a identificar especificidades con respecto a los ambientes donde se desarrollan estos microrganismos (pelágico y bentónico) y sus asociaciones simbióticas para comprender esta divergencia dentro de un mismo clado o grupo (^{Mordret et al. 2016}).

El clado A presenta una amplia distribución en los océanos Atlántico, Pacífico, Índico y Mar Rojo; sin embargo, algunos subclados pueden estar limitados a ciertas cuencas oceánicas, por ejemplo, el Mar Caribe, de donde se tienen el mayor número de reportes (^{LaJeunesse et al. 2015}). El clado se ha reportado en Callao Salvaje, Tenerife, Islas Canarias (^{Hansen y Daugbjerg 2009}, ^{Guiry y Guiry 2024}); en Japón y Hawái (^{Carlos et al. 1999}, ^{Hirose et al. 2008}, ^{Yamashita y Koike 2013}); en los Cayos de Florida, EE. UU. (^{Lee et al. 2015}); y Puerto Morelos, en el Caribe mexicano (^{Kemp et al. 2014}).

En el sur del Golfo de California se han reportado el clado C (abundante y ampliamente distribuido) como huésped de Pavona gigantea (Verrill), y el clado D (extremófilos, su distribución se centra en el Indo-Occidente del Pacífico) asociado con el coral Pocillopora verrucosa (Ellis & Solander) (^{Iglesias-Prieto et al. 2004}, ^{LaJeunesse et al. 2018}, ^{Méndez-Méndez 2020}). Este estudio amplía el listado de clados de Symbiodinium presentes en el Golfo de California, al describir la presencia del clado A asociado con la anémona Actinostella sp.

El clado A de Symbiodinium suele estar asociado a corales de aguas poco profundas en el Caribe y pozas de mareas, lo que ha generado la hipótesis de que este clado está adaptado a zonas someras (menores a 1 m), ya que presentan vías de fotoaclimatación y fotoprotección que les permite contrarrestar altas irradiancias y temperaturas elevadas que pueden darse en estos ambientes (^{Iglesias-Prieto y Trench 1997}, ^{Hirose et al. 2008}, ^{Takahashi et al. 2009}, ^{Yamashita y Koike 2013}, ^{Kemp et al. 2014}). Los resultados del presente estudio concuerdan con dicha hipótesis, ya que el dinoflagelado fue aislado en la Bahía de La Paz, a una profundidad menor de 1 m (hábitat bentónico), en una zona con alta irradiancia y temperaturas elevadas que en verano pueden alcanzar de 27 a 32 °C (^{Sea temperature 2024}).

Se ha demostrado que el clado A es uno de los más sencillos de cultivar debido a sus características fisiológicas y ecológicas, pudiendo ser no simbióticos de vida libre. Este estudio aporta información para el cultivo en laboratorio de dinoflagelados simbiontes del clado A de la Bahía de La Paz, cultivos que se han mantenido desde el 2018 hasta la actualidad, pudiéndose emplear medios especializados (e.g., ASP-8A), además de los convencionales utilizados para dinoflagelados planctónicos y bentónicos, como IMK, L1, GSe modificado y K modificado (este estudio, ^{Hirose et al. 2008}, ^{LaJeunesse et al. 2015}, ^{Lee et al. 2015}).

CONCLUSIONES

Los resultados de los análisis morfométricos combinados con el análisis filogenético son concluyentes para el taxón Symbiodinium-clado A. El análisis filogenético de la región 28S mostró 9 clados actualmente aceptados para la familia Symbiodiniaceae. El clado A se dividió en diferentes subclados de filoespecies, mostrando que la secuencia PP563703 de la cepa SNCETMAR-2, tiene afinidad filogenética con secuencias de S. natans (taxón actualmente aceptado). Este estudio reportó para la Bahía de La Paz, Golfo de California, la primera descripción detallada de S. natans-clado A, siendo un dinoflagelado que alterna entre 2 fases de vida, una fase de vida libre (planctónica) y otra simbiótica no obligada (bentónica) que presentó asociación con la anémona de mar Actinostella sp.