Abstract

GUTIERREZ-CONTRERAS, Cecilia Nataly; BARRAZA-SALAS, Marcelo; MERCEDES PORTH, Ilga  and  WEHENKEL, Christian. Mejoras en un método comercial de extracción de ADN para obtener extractos de ácido nucleico de alta calidad a partir de yemas vegetativas de Populus tremuloides Michx. Polibotánica [online]. 2026, n.61, pp.205-220.  Epub May 18, 2026. ISSN 1405-2768.  https://doi.org/10.18387/polibotanica.61.12.

El álamo temblón (Populus tremuloides) es una especie arbórea de interés debido al potencial descubrimiento de una historia adaptativa en su genoma, por lo que el aislamiento correcto de su ADN resulta esencial. En este estudio se investigaron dos métodos de extracción basados en el kit NucleoSpin™ Plant II, utilizando yemas de crecimiento de ocho muestras apareadas. El método 1 empleó el tampón PL1, un homogeneizador y una incubación de 30 minutos con RNasa; el método 2 utilizó el tampón PL2, perlas de vidrio y una incubación de 45 minutos con RNasa. La calidad y cantidad del ADN se evaluaron mediante espectrofotometría, electroforesis en gel y amplificación por PCR. Una prueba t apareada reveló que el método 1 produjo una concentración de ADN significativamente mayor que el método 2 (diferencia media = 71.98 ng/µL; IC 95%: 17.3-126.7; p = 0.017; dz = 1.10). En contraste, no se observaron diferencias significativas en la relación 260/280, ya fuera mediante la prueba t apareada (diferencia media = 0.10; IC 95%: −0.08-0.28; p = 0.219) o la prueba de rangos con signo de Wilcoxon (diferencia mediana = +0.02; IC 95%: −0.01-0.295; p = 0.25). El método 1 produjo mayores rendimientos, pero con fragmentación del ADN visible en el gel, lo que puede interferir en algunos análisis. El método 2 mostró una menor concentración, pero bandas ligeramente más definidas en el gel, lo que indica mejor integridad del ADN. La PCR fue exitosa en ambos casos, aunque la mayor integridad del ADN en el método 2 sugiere que este método es más adecuado para estudios que requieren ADN intacto. Aunque el método 1 genera una mayor cantidad, el método 2 es preferible cuando la integridad del ADN es crítica para el análisis genómico.

Keywords : álamo temblón; aislamiento; amplificación por PCR; integridad del ADN; genética.

        · abstract in English     · text in English     · English ( pdf )