El síndrome de nariz blanca (SNB) es una enfermedad emergente causada por Pseudogymnoascus (= Geomyces) destructans (Blehert & Gargas) Minnis & D.L. Lindner, que ha tenido un fuerte impacto en las poblaciones de murciélagos sobre todo miótidos de zonas frías en América del Norte. Este hongo se ha reportado como psicrófilo. Pseudogymnoascus es dispersado por aire, agua y se ha aislado de plumas, pelo, artrópodos, y diversos fómites como los equipos de excursionismo (Hayes 2012). En general, se conoce poco acerca de los hongos patógenos asociados a los murciélagos, con excepción de los de importancia médica como Histoplasma capsulatum Darling.
Se han estudiado los hongos superficiales en murciélagos en Estados Unidos de América (EUA) (Chaturvedi et al. 2010, Johnson et al. 2013, Carpenter et al. 2016), Canadá (Vanderwolf et al. 2013, 2015), Brasil (Shapiro et al. 2015), así como levaduras en murciélagos y colibríes en Costa Rica (Belisle et al. 2014). En México, los estudios aún son limitados. Se ha demostrado que los murciélagos son vectores fúngicos (Vanderwolf et al. 2013, 2015) y existen especies migratorias en el norte del país (Medellín et al. 2009), algunas de las cuales se distribuyen en zonas con brotes del SNB. Este escenario constituye un riesgo, ya que en México existen las condiciones ambientales como los espectros de temperaturas bajas para que se manifieste la infección. Debido a estas características ambientales y que los organismos comparten sitios de alimentación y descanso, podría esperarse que exista un contacto entre individuos infectados de EUA y no infectados de México, a través de las especies que comparten su distribución, 13 especies de Myotis y Eptesicus fuscus, aumentando así el rango de dispersión del síndrome.
Es importante conocer la micobiota superficial cultivable ya que, si bien en México no existe un reporte oficial de la presencia del SNB, es necesario caracterizar la microbiota fúngica de los murciélagos que comparten distribución con las zonas donde se ha observado el SNB, lo que sugiere que pueden ser susceptibles de ser parasitados por P. destructans. Por tanto, es relevante contar con información básica en caso de que llegase a producirse un brote de dicho agente infeccioso, ya que existen alertas en la zona sureste de EUA y en cuevas de Puerto Rico, de acuerdo con las condiciones adecuadas como la temperatura para el desarrollo de P. destructans en murciélagos (http://www.usda.gov/wps/portal/usda/usdahome).
El enfoque de este estudio es hacia hongos cultivables, ya que pueden observarse esporas de patógenos en diversos sustratos incluidos los animales, que dependen de encontrar las condiciones adecuadas de humedad y temperatura. En caso de corroborarse la presencia de P. destructans entre los aislados, debe ser definido en un contexto ambiental dependiente de un huésped potencial que reúna las condiciones para presentar la infección.
Se colectaron murciélagos en la Cueva del Salitre, Xilitla, San Luis Potosí y en cuatro sitios de Jalisco, tres en la localidad de La Huerta: Puente San Nicolás, Puente Purificación, Boca de Iguanas, así como en Cihuatlán (Tabla 1). Las muestras se tomaron de rostro y alas de los murciélagos con hisopos. El manejo de los animales se realizó siguiendo el protocolo de descontaminación para SNB, emitido por la North America’s Response to the Devastating Bat Disease (http://whitenosesyndrome.org/) y las directrices de la Sociedad Americana de Mastozoología para el uso de mamíferos silvestres en investigación (Sikes y Gannon 2011). Los hisopos se humedecieron con tween 80 al 0.05 % estéril y se sembraron por triplicado con tres réplicas en agar rosa de Bengala (Bioxón, México), adicionado con cloranfenicol (500 mg/L) (BD, México).
Tabla 1 Localidades de muestreo en Jalisco y San Luis Potosí, México
| Localidad | Municipio | Estado | LN | LO |
|---|---|---|---|---|
| 1. Boca de Iguanas | La Huerta | Jalisco | 19°18´29.94” | 104°49’11.39” |
| 2. Puente Purificación | La Huerta | Jalisco | 19°21´07.69” | 104°53’20.11” |
| 3. San Nicolás | La Huerta | Jalisco | 19°39´16.09” | 05°10´44.10” |
| 4. Cihuatlán | Cihuatlán | Jalisco | 19°13´38.52” | 104°32´06.24 |
| 5. Cueva de Salitre | Xilitla | San Luis Potosí | 21°23´14” | 098°58´53” |
Se incubaron a 16 ± 2 ºC, en oscuridad, durante 60 días para permitir el desarrollo de los propágulos fúngicos, ya que se buscaba el aislamiento de hongos psicrófilos con énfasis en Pseudogymnoascus. Este tiempo de incubación se decidió porque se trabajó previamente en ensayos con la cepa de referencia de ATCC MYA4855 y fue el tiempo que tardó en desarrollarse a 16 °C. Desde el día 11 de incubación, se revisó la aparicion de crecimiento. Las colonias obtenidas se purificaron en agar papa-dextrosa (Condolab, México) y se identificaron con base en la morfología colonial y microscópica, comparándolas con claves taxonómicas (Barron 1968, Barnett y Hunter 1972, Von Arx 1981, Watanabe 2002). También se prepararon microcultivos de Ridell para la observación al microscopio de las estructuras reproductivas de los hongos. Los cultivos axénicos se pasaron a tubos de polipropileno con agar papa dextrosa inclinado para su conservación en aceite mineral, los cuales están depositados en el Cepario del Laboratorio de Micología de la UAM-X (Tabla 2).
Tabla 2 Géneros y especies fúngicas asociados con especies de murciélagos en localidades de Jalisco y San Luis Potosí, México
| Especie de murciélago | Localidad* | Estado |
|---|---|---|
| Artibeus jamaicensis | 1 | Aspergillus ochraceus (PSNB-8)** |
| 4 | Fusarium sp. (PSNB-25) | |
| 5 | Absidia sp. (PSNB-1), Acremonium sp. (PSNB-3), Alternaria sp. (PSNB-7), Aspergillus sp. (PSNB-15), Aspergillus flavus (PSNB-14), A. niger (PSNB-18), A. terreus (PSNB-17), Aureobasidium sp. (PSNB-19), Cordyceps sp. (PSNB-29), Cunninghamella sp. (PSNB-24), Fusarium sp. (PSNB-26), Geotrichum sp. (PSNB-28), Monilia sp. (PSNB-30), Mortierella sp. (PSNB-31), Mucor sp. (PSNB-34), Penicillium sp. (PSNB-40), Phialophora sp. (PSNB-43), Trichoderma sp. (PSNB-50), Trichothecium sp. (PSNB-51), Ulocladium sp. (PSNB-52) | |
| Artibeus lituratus | 1 | Aspergillus sp. (PSNB-9), Penicillium sp. (PSNB-38) |
| Choeroniscus godmani | 2 | Penicillium sp. (PSNB-41) |
| Dermanura phaeotis | 2 | Alternaria sp. (PSNB-5) |
| Eptesicus fuscus | 5 | Basipetospora sp. (PSNB-20), |
| Pseudogymnoascus pannorum (PSNB-27) | ||
| Glossophaga soricina | 2 | Aspergillus versicolor (PSNB-13) |
| 4 | Penicillium sp. (PSNB-42), Scopulariopsis sp. (PSNB-47) | |
| Hylonycteris underwoodi | 3 | Acremonium sp. (PSNB-2) |
| Molossus sinaloae | 2 | Aspergillus parasiticus (PSNB-11) |
| Myotis californicus | 4 | Alternaria sp. (PSNB-6), Aspergillus sp. (PSNB-16), Mucor sp. (PSNB-32) |
| Myotis fortidens | 2 | Cladosporium sp. (PSNB-23), Scopulariopsis sp. (PSNB-48) |
| 3 | Penicillium sp. (PSNB-39), Scopulariopsis sp. (PSNB-46) | |
| Myotis nigricansz | 1 | Cladosporium sp. (PSNB-21) |
| Noctilio leporinus | 2 | Scopulariopsis sp. (PSNB-49) |
| Pteronotus davyi | 3 | Alternaria sp. (PSNB-4) |
| Pteronotus personatus | 3 | Simplicillium sp. (PSNB-45) |
| Saccopteryx bilineata | 2 | Paecilomyces sp. (PSNB-36) |
| Sturnira parvidens | 2 | Aspergillus sp. (PSNB-12), Aspergillus sclerotium (PSNB-10) |
| 4 | Mucor circinelloides (PSNB-33), M. racemosus (PSNB-35) | |
| 5 | Cladosporium sp. (PSNB-22), Papulaspora sp. (PSNB-37), | |
| Phoma sp. (PSNB-44) |
* Localidad con base en Tabla 1.** Cepa depositada en el Laboratorio de Micología UAM-X.
Se colectaron un total de 43 murciélagos pertenecientes a 17 especies, identificadas con guías de campo (Medellín et al. 2008). Se obtuvieron un total de 10,236 colonias de hongos, las cuales se cuantificaron e identificaron en base a su morfología colonial disímil por cada caja de Petri, que correspondieron a 32 géneros y 10 especies (Tabla 2). La especie de murciélago mencionada en la Tabla 2, corresponde al organismo en el cual se obtuvo el primer aislamiento para el registro. Sin embargo, existen géneros que crecieron en todas las muestras de murciélagos, los cuales fueron Acremonium, Aspergillus, Cladosporium, Penicillium y Scopulariopsis.
La especie de murciélago que presentó un mayor número de géneros fúngicos fue Artibeus jamaicensis con 26, mientras que con los menores aislamientos Choeroniscus godmani y Saccopteryx bilineata con cinco cada uno. Esta última presentó hongos identificados en otros murciélagos de la misma localidad. Se lograron determinar siete especies de Aspergillus (Samson et al. 2014, Houbraken et al. 2020). Los géneros Aspergillus y Penicillium desarrollaron el mayor número de unidades formadoras de colonias, así como los más frecuentemente aislados de piel de murciélagos (Chaturvedi et al. 2010). Esto debido, probablemente, a sus hábitos alimenticios y lugares donde se distribuyen. Se consideran asociados a otros ambientes e incluso se ha sugerido que llegan a los sitios con murciélagos por aerotransporte de los conidios (Zhang et al. 2020). Se aislaron también géneros asociados a la vegetación como Alternaria, Epicoccum, Fusarium y Phoma, lo que coincide con los géneros aislados por Lorch et al. (2013), en sitios del este de EUA. Además, se aisló Cordyceps (= Isaria) fumosorosea (Wise) Kepler, B. Shrestha & Spatafora, hongo entomopatógeno que podría estar asociado a los hábitos de alimentación de los murciélagos. Pseudogymnoascus pannorum (Link) Minnis & D.L. Lindner sensu lato se aisló a partir de Eptesicus fuscus, especie migratoria presente en sitios donde se ha reportado P. destructans. Sin embargo, P. pannorum está reportado como guanofílico y psicrófilo, común en cuevas (Kravchenko et al. 2015, Misra et al. 2020). Otros géneros observados en este estudio, aislados de guano son Alternaria, Cladosporium y Mucor (Hayes 2012, Misra et al. 2020). Mortierella y Mucor son Mucoromycetes, aislados comúnmente de suelo en cuevas (Zhang et al. 2020). La gran mayoría de los géneros aislados son organismos que están asociados a suelo y vegetación. Sin embargo, pueden permanecer viables largo tiempo y es importante considerar que al ser transportados por los animales, algunos patógenos oportunistas como Aspergillus (Karunarathna et al. 2023) pueden encontrarse en condiciones favorables para invadir a los individuos susceptibles. Esto sería consistente con el modo de dispersión de un patógeno introducido. Los resultados del presente estudio mostraron que existe un ensable diverso de hongos en la nariz y alas de los murciélagos, la mayoría de ellos asociados a la vegetación y suelo. Este estudio no detectó la presencia de P. destructans en las especies de murcielagos colectados. Sin embargo, es necesario realizar análisis moleculares para confirmar todos los géneros aislados.










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