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Scientia fungorum

 ISSN 2594-1321

Sci. fungorum vol.55  Xalapa  2024   08--2025

https://doi.org/10.33885/sf.2024.55.1381 

Notas Cortas

Hongos psicrófilos superficiales cultivables asociados a murciélagos en áreas de Jalisco y San Luis Potosí, México

Culturable superficial psychrophilic fungi associated with bats in areas of Jalisco and San Luis Potosí, México

Judith Castellanos-Moguel1  * 
http://orcid.org/0000-0003-1449-4139

Ángel Rodríguez-Moreno2 

Arturo García Ortiz1 

Arturo Miranda-Calixto1 

Omar Reyes Hernández1 

Gabriel Gutiérrez-Granados3 

Víctor Sánchez-Cordero2 

1Departamento el Hombre y su Ambiente, Universidad Autónoma Metropolitana, Unidad Xochimilco. Calzada del Hueso 1100, Villa Quietud, Coyoacán, C.P. 04960, Ciudad de México, México.

2Departamento de Zoología, Pabellón Nacional de la Biodiversidad-Instituto de Biología, Universidad Nacional Autónoma de México. Circuito Centro Cultural, Ciudad Universitaria, Coyoacán, C.P. 04510, Ciudad de México, México.

3Unidad Multidisciplinaria de Investigación Experimental Zaragoza, Facultad de Estudios Superiores Zaragoza, Universidad Nacional Autónoma de México. Batalla 5 de Mayo s/n esquina Fuerte de Loreto, Ejército de Oriente, Iztapalapa, C.P. 09320, Ciudad de México, México.


Resumen

Antecedentes:

el síndrome de nariz blanca causado por Pseudogymnoascus destructans ha disminuido drásticamente las poblaciones de murciélagos en Canadá y Estados Unidos de América; no se ha detectado en México.

Objetivo:

caracterizar la micobiota en los murciélagos que comparten la distribución con las especies susceptibles de ser parasitados por P. destructans.

Métodos:

se realizaron muestreos de murciélagos en San Luis Potosí y Jalisco. Se tomaron muestras de rostro y alas, que se sembraron en agar rosa Bengala cloranfenicol. Se purificaron en papa dextrosa agar e identificaron a nivel de género, cuando fue posible a especie con base en la morfología y micromorfología. Los murciélagos se identificaron hasta especie.

Resultados y conclusiones:

los resultados mostraron una alta diversidad fúngica identificándose 32 géneros, donde Acremonium, Aspergillus, Cladosporium, Penicillium y Scopulariopsis, se observaron en las 17 especies de murciélagos. Se documentó la presencia de Pseudogymnoascus pannorum, pero no de P. destructans.

Palabras clave: Aspergillus; carga fúngica; microhongos cultivables; murciélagos; Penicillium

Abstract

Background:

White-nose syndrome caused by Pseudogymnoascus destructans has dramatically decreased bat populations in Canada and the United States of America; it has not been detected in México.

Objective:

Characterize the mycobiota in bats that share distribution with organisms susceptible to being parasitized by P. destructans.

Methods:

Bat sampling was carried out in San Luis Potosí and Jalisco. Samples were taken from snout and wings, and cultivated on Rose-Bengal chloramphenicol agar. Samples were purified on potato dextrose agar and identified at the genus level and, when possible, at the species level based on morphology and micromorphology. Bats were identified at the species level.

Results and conclusions:

The results showed a high fungal diversity, where 32 fungi genera were identified. Acremonium, Aspergillus, Cladosporium, Penicillium, and Scopulariopsis were detected in the 17 bat species. Pseudogymnoascus pannorum was documented, but not P. destructans.

Keywords: Aspergillus; bats; culturable microfungi; fungal load; Penicillium

El síndrome de nariz blanca (SNB) es una enfermedad emergente causada por Pseudogymnoascus (= Geomyces) destructans (Blehert & Gargas) Minnis & D.L. Lindner, que ha tenido un fuerte impacto en las poblaciones de murciélagos sobre todo miótidos de zonas frías en América del Norte. Este hongo se ha reportado como psicrófilo. Pseudogymnoascus es dispersado por aire, agua y se ha aislado de plumas, pelo, artrópodos, y diversos fómites como los equipos de excursionismo (Hayes 2012). En general, se conoce poco acerca de los hongos patógenos asociados a los murciélagos, con excepción de los de importancia médica como Histoplasma capsulatum Darling.

Se han estudiado los hongos superficiales en murciélagos en Estados Unidos de América (EUA) (Chaturvedi et al. 2010, Johnson et al. 2013, Carpenter et al. 2016), Canadá (Vanderwolf et al. 2013, 2015), Brasil (Shapiro et al. 2015), así como levaduras en murciélagos y colibríes en Costa Rica (Belisle et al. 2014). En México, los estudios aún son limitados. Se ha demostrado que los murciélagos son vectores fúngicos (Vanderwolf et al. 2013, 2015) y existen especies migratorias en el norte del país (Medellín et al. 2009), algunas de las cuales se distribuyen en zonas con brotes del SNB. Este escenario constituye un riesgo, ya que en México existen las condiciones ambientales como los espectros de temperaturas bajas para que se manifieste la infección. Debido a estas características ambientales y que los organismos comparten sitios de alimentación y descanso, podría esperarse que exista un contacto entre individuos infectados de EUA y no infectados de México, a través de las especies que comparten su distribución, 13 especies de Myotis y Eptesicus fuscus, aumentando así el rango de dispersión del síndrome.

Es importante conocer la micobiota superficial cultivable ya que, si bien en México no existe un reporte oficial de la presencia del SNB, es necesario caracterizar la microbiota fúngica de los murciélagos que comparten distribución con las zonas donde se ha observado el SNB, lo que sugiere que pueden ser susceptibles de ser parasitados por P. destructans. Por tanto, es relevante contar con información básica en caso de que llegase a producirse un brote de dicho agente infeccioso, ya que existen alertas en la zona sureste de EUA y en cuevas de Puerto Rico, de acuerdo con las condiciones adecuadas como la temperatura para el desarrollo de P. destructans en murciélagos (http://www.usda.gov/wps/portal/usda/usdahome).

El enfoque de este estudio es hacia hongos cultivables, ya que pueden observarse esporas de patógenos en diversos sustratos incluidos los animales, que dependen de encontrar las condiciones adecuadas de humedad y temperatura. En caso de corroborarse la presencia de P. destructans entre los aislados, debe ser definido en un contexto ambiental dependiente de un huésped potencial que reúna las condiciones para presentar la infección.

Se colectaron murciélagos en la Cueva del Salitre, Xilitla, San Luis Potosí y en cuatro sitios de Jalisco, tres en la localidad de La Huerta: Puente San Nicolás, Puente Purificación, Boca de Iguanas, así como en Cihuatlán (Tabla 1). Las muestras se tomaron de rostro y alas de los murciélagos con hisopos. El manejo de los animales se realizó siguiendo el protocolo de descontaminación para SNB, emitido por la North America’s Response to the Devastating Bat Disease (http://whitenosesyndrome.org/) y las directrices de la Sociedad Americana de Mastozoología para el uso de mamíferos silvestres en investigación (Sikes y Gannon 2011). Los hisopos se humedecieron con tween 80 al 0.05 % estéril y se sembraron por triplicado con tres réplicas en agar rosa de Bengala (Bioxón, México), adicionado con cloranfenicol (500 mg/L) (BD, México).

Tabla 1 Localidades de muestreo en Jalisco y San Luis Potosí, México 

Localidad Municipio Estado LN LO
1. Boca de Iguanas La Huerta Jalisco 19°18´29.94” 104°49’11.39”
2. Puente Purificación La Huerta Jalisco 19°21´07.69” 104°53’20.11”
3. San Nicolás La Huerta Jalisco 19°39´16.09” 05°10´44.10”
4. Cihuatlán Cihuatlán Jalisco 19°13´38.52” 104°32´06.24
5. Cueva de Salitre Xilitla San Luis Potosí 21°23´14” 098°58´53”

Se incubaron a 16 ± 2 ºC, en oscuridad, durante 60 días para permitir el desarrollo de los propágulos fúngicos, ya que se buscaba el aislamiento de hongos psicrófilos con énfasis en Pseudogymnoascus. Este tiempo de incubación se decidió porque se trabajó previamente en ensayos con la cepa de referencia de ATCC MYA4855 y fue el tiempo que tardó en desarrollarse a 16 °C. Desde el día 11 de incubación, se revisó la aparicion de crecimiento. Las colonias obtenidas se purificaron en agar papa-dextrosa (Condolab, México) y se identificaron con base en la morfología colonial y microscópica, comparándolas con claves taxonómicas (Barron 1968, Barnett y Hunter 1972, Von Arx 1981, Watanabe 2002). También se prepararon microcultivos de Ridell para la observación al microscopio de las estructuras reproductivas de los hongos. Los cultivos axénicos se pasaron a tubos de polipropileno con agar papa dextrosa inclinado para su conservación en aceite mineral, los cuales están depositados en el Cepario del Laboratorio de Micología de la UAM-X (Tabla 2).

Tabla 2 Géneros y especies fúngicas asociados con especies de murciélagos en localidades de Jalisco y San Luis Potosí, México  

Especie de murciélago Localidad* Estado
Artibeus jamaicensis 1 Aspergillus ochraceus (PSNB-8)**
4 Fusarium sp. (PSNB-25)
5 Absidia sp. (PSNB-1), Acremonium sp. (PSNB-3), Alternaria sp. (PSNB-7), Aspergillus sp. (PSNB-15), Aspergillus flavus (PSNB-14), A. niger (PSNB-18), A. terreus (PSNB-17), Aureobasidium sp. (PSNB-19), Cordyceps sp. (PSNB-29), Cunninghamella sp. (PSNB-24), Fusarium sp. (PSNB-26), Geotrichum sp. (PSNB-28), Monilia sp. (PSNB-30), Mortierella sp. (PSNB-31), Mucor sp. (PSNB-34), Penicillium sp. (PSNB-40), Phialophora sp. (PSNB-43), Trichoderma sp. (PSNB-50), Trichothecium sp. (PSNB-51), Ulocladium sp. (PSNB-52)
Artibeus lituratus 1 Aspergillus sp. (PSNB-9), Penicillium sp. (PSNB-38)
Choeroniscus godmani 2 Penicillium sp. (PSNB-41)
Dermanura phaeotis 2 Alternaria sp. (PSNB-5)
Eptesicus fuscus 5 Basipetospora sp. (PSNB-20),
Pseudogymnoascus pannorum (PSNB-27)
Glossophaga soricina 2 Aspergillus versicolor (PSNB-13)
4 Penicillium sp. (PSNB-42), Scopulariopsis sp. (PSNB-47)
Hylonycteris underwoodi 3 Acremonium sp. (PSNB-2)
Molossus sinaloae 2 Aspergillus parasiticus (PSNB-11)
Myotis californicus 4 Alternaria sp. (PSNB-6), Aspergillus sp. (PSNB-16), Mucor sp. (PSNB-32)
Myotis fortidens 2 Cladosporium sp. (PSNB-23), Scopulariopsis sp. (PSNB-48)
3 Penicillium sp. (PSNB-39), Scopulariopsis sp. (PSNB-46)
Myotis nigricansz 1 Cladosporium sp. (PSNB-21)
Noctilio leporinus 2 Scopulariopsis sp. (PSNB-49)
Pteronotus davyi 3 Alternaria sp. (PSNB-4)
Pteronotus personatus 3 Simplicillium sp. (PSNB-45)
Saccopteryx bilineata 2 Paecilomyces sp. (PSNB-36)
Sturnira parvidens 2 Aspergillus sp. (PSNB-12), Aspergillus sclerotium (PSNB-10)
4 Mucor circinelloides (PSNB-33), M. racemosus (PSNB-35)
5 Cladosporium sp. (PSNB-22), Papulaspora sp. (PSNB-37),
Phoma sp. (PSNB-44)

* Localidad con base en Tabla 1.** Cepa depositada en el Laboratorio de Micología UAM-X.

Se colectaron un total de 43 murciélagos pertenecientes a 17 especies, identificadas con guías de campo (Medellín et al. 2008). Se obtuvieron un total de 10,236 colonias de hongos, las cuales se cuantificaron e identificaron en base a su morfología colonial disímil por cada caja de Petri, que correspondieron a 32 géneros y 10 especies (Tabla 2). La especie de murciélago mencionada en la Tabla 2, corresponde al organismo en el cual se obtuvo el primer aislamiento para el registro. Sin embargo, existen géneros que crecieron en todas las muestras de murciélagos, los cuales fueron Acremonium, Aspergillus, Cladosporium, Penicillium y Scopulariopsis.

La especie de murciélago que presentó un mayor número de géneros fúngicos fue Artibeus jamaicensis con 26, mientras que con los menores aislamientos Choeroniscus godmani y Saccopteryx bilineata con cinco cada uno. Esta última presentó hongos identificados en otros murciélagos de la misma localidad. Se lograron determinar siete especies de Aspergillus (Samson et al. 2014, Houbraken et al. 2020). Los géneros Aspergillus y Penicillium desarrollaron el mayor número de unidades formadoras de colonias, así como los más frecuentemente aislados de piel de murciélagos (Chaturvedi et al. 2010). Esto debido, probablemente, a sus hábitos alimenticios y lugares donde se distribuyen. Se consideran asociados a otros ambientes e incluso se ha sugerido que llegan a los sitios con murciélagos por aerotransporte de los conidios (Zhang et al. 2020). Se aislaron también géneros asociados a la vegetación como Alternaria, Epicoccum, Fusarium y Phoma, lo que coincide con los géneros aislados por Lorch et al. (2013), en sitios del este de EUA. Además, se aisló Cordyceps (= Isaria) fumosorosea (Wise) Kepler, B. Shrestha & Spatafora, hongo entomopatógeno que podría estar asociado a los hábitos de alimentación de los murciélagos. Pseudogymnoascus pannorum (Link) Minnis & D.L. Lindner sensu lato se aisló a partir de Eptesicus fuscus, especie migratoria presente en sitios donde se ha reportado P. destructans. Sin embargo, P. pannorum está reportado como guanofílico y psicrófilo, común en cuevas (Kravchenko et al. 2015, Misra et al. 2020). Otros géneros observados en este estudio, aislados de guano son Alternaria, Cladosporium y Mucor (Hayes 2012, Misra et al. 2020). Mortierella y Mucor son Mucoromycetes, aislados comúnmente de suelo en cuevas (Zhang et al. 2020). La gran mayoría de los géneros aislados son organismos que están asociados a suelo y vegetación. Sin embargo, pueden permanecer viables largo tiempo y es importante considerar que al ser transportados por los animales, algunos patógenos oportunistas como Aspergillus (Karunarathna et al. 2023) pueden encontrarse en condiciones favorables para invadir a los individuos susceptibles. Esto sería consistente con el modo de dispersión de un patógeno introducido. Los resultados del presente estudio mostraron que existe un ensable diverso de hongos en la nariz y alas de los murciélagos, la mayoría de ellos asociados a la vegetación y suelo. Este estudio no detectó la presencia de P. destructans en las especies de murcielagos colectados. Sin embargo, es necesario realizar análisis moleculares para confirmar todos los géneros aislados.

Agradecimientos

Este proyecto fue financiado por la Comisión Nacional para el Conocimiento y Uso de la Biodiversidad (CONABIO, Proyecto ME008).

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Recibido: 30 de Octubre de 2023; Aprobado: 27 de Agosto de 2024; Publicado: 09 de Septiembre de 2024

*Judith Castellanos-Moguel, e-mail: mjmoguel@correo.xoc.uam.mx

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