Resumo

WEI, Lihua et al. Optimización de extracción de ADN de polen apícola para caracterización molecular. Ecosistemas y recur. agropecuarios [online]. 2023, vol.10, n.spe3, e3656.  Epub 26-Ago-2024. ISSN 2007-901X.  https://doi.org/10.19136/era.a10niii.3656.

La procedencia botánica del polen apícola es crucial para sus propiedades nutricionales. Aunque su identificación mediante análisis microscópico es precisa, resulta laboriosa. Los códigos de barras de ADN ofrecen una alternativa eficiente, utilizando secuencias estandarizadas para identificar la especie. No obstante, esta técnica demanda ADN de alta calidad para la amplificación y secuenciación. En este trabajo, se evaluó cómo distintas variaciones en tres etapas específicas (tiempo de incubación, número de lavados y el solvente empleado para la precipitación de proteínas) afectan la cantidad y calidad del ADN genómico extraído de polen apícola mediante un método basado en CTAB. El análisis de varianza reveló que el tiempo de incubación no afectó el rendimiento del ADN, mientras que el número de lavados tiene un efecto crítico negativo en el rendimiento del ADN. El solvente de precipitación de proteínas también tuvo un efecto significativo en el rendimiento del ADN, el cual alcanzó los mayores valores con cloroformo-alcohol isoamilico (24:1). Para saber si las variaciones en los pasos de extracción afectan los análisis moleculares subsecuentes, se realizó una PCR de verificación con todas las muestras extraídas, obteniendo amplificaciones exitosas del fragmento ITS2 en todos tratamientos y la identificación precisa de 11 especies de plantas. Este estudio provee información importante de la optimización de un método de extracción de ADN de alta calidad, y provee bases sólidas para realizar códigos de barras, detección de especies invasivas, transgénicas o tóxicas en muestras de polen apícola.

Palavras-chave : ADN genómico; CTAB; Identificación; ITS2; clonación.

        · resumo em Inglês     · texto em Espanhol     · Espanhol ( pdf )