Introducción

En México se siembran anualmente más de un millón de hectáreas de frijol común (Phaseolus vulgaris) para consumo humano. La producción puede comprometerse por la incidencia de enfermedades como moho blanco, pudrición carbonosa y la rhizoctoniasis que ocasionan la muerte de la planta.

En noviembre de 2020, se observaron síntomas de pudrición de raíz en dos campos de frijol (cv. Azufrado Higuera) ubicados en Ahome, Sinaloa, México. Las plantas enfermas mostraron crecimiento reducido, cancro café oscuro en la base del tallo, pudrición de la raíz, además de ausencia de raíces secundarias (Figura 1 A). La incidencia de la enfermedad en campo se estimó hasta en 35 %. Para el aislamiento de hongos, las raíces sintomáticas se desinfestaron superficialmente con hipoclorito de sodio al 1 % durante 2 min, se enjuagaron dos veces con agua destilada esteril y se secaron en papel filtro estéril. Se colocaron pequeños fragmentos de raíces enfermas en medio agar dextrosa y papa (PDA) y se incubaron a 25 °C por 48 h. Se obtuvieron 10 colonias similares a Rhizoctonia, las cuales se purificaron mediante el método de punta de hifa. Las colonias en PDA fueron inicialmente blancas y posteriormente se tornaron a color marrón (Figura 1 C y D). Las hifas fueron septadas, de 4.6 a 5.3 μm y se ramificaron en ángulo recto con un septo cerca del punto de ramificación. La examinación microscópica por tinción con safranina-O mostró un rango de 2 a 10 núcleos por célula (Figura 1 E).

Las características morfológicas de los aislados obtenidos coincidieron con las de Rhizoctonia solani. Dos aislados representativos se usaron para las pruebas moleculares y de patogenicidad. Los aislados fueron depositados en la Colección de Cultivos de Hongos Fitopatógenos de la Facultad de Agricultura del Valle del Fuerte de la Universidad Autónoma de Sinaloa (No. de Acceso FAVF397 y FAVF398). Para la identificación molecular, se extrajo el ADN genómico de cada aislado, se amplificó la región del espaciador transcrito interno (ITS) y los fragmentos parciales de la segunda subunidad más grande del gen de la ARN polimerasa II (RPB2), y se secuenciaron con los pares de iniciadores ITS5 / ITS4 (^{White et al., 1990}) y RBP2-980F/RPB2-7cR (^{Liu et al., 1999}), respectivamente. Las secuencias se depositaron en el GenBank (números de acceso OR590793 y OR590801 para ITS y SUB14697714.1 y SUB14697714.2 para RPB2). Se generó un árbol filogenético basado en máxima verosimilitud que incluyó datos combinados de secuencias ITS y RPB2 publicados para diversos grupos de anastomosis (AG) de Rhizoctonia solani. El árbol filogenético agrupó a los aislados FAVF397 y FAVF398 dentro del clado AG 7 (Figura 2). Las pruebas de patogenicidad para cada aislado se realizaron mediante la inoculación de 10 plántulas sanas de frijol común (15 días de edad) cultivadas en macetas. Un total de 50 mL de una suspensión de micelio ajustada a una concentración de 1 × 105 fragmentos miceliales mL-1 se colocaron directamente sobre la base del tallo de cada planta. Como control se utilizaron cinco plántulas de frijol común sin inocular. Todas las plantas se mantuvieron en un invernadero durante 15 días a temperaturas que oscilaron entre 22 y 32 °C. Los síntomas de pudrición de la raíz y cancro del tallo se observaron en las plántulas inoculadas después de 30 días (Figura 1 B); mientras que, las plántulas de control permanecieron asintomáticas. La prueba de patogenicidad se realizó dos veces con resultados similares. Los hongos se reaislaron a partir de las raíces infectadas y se encontró que fueron morfológicamente idénticos a los aislados utilizados para la inoculación, cumpliendo así los postulados de Koch (^{Volci, 2008}).

En consecuencia, la identificación mediante morfología y análisis de secuencias confirmó que el organismo causal es R. solani AG-7. Este patógeno fue reportado por primera vez en algodón en Georgia, EE. UU. y Egipto (^{Baird et al., 1997}; 2000; ^{Abd-Elsalam et al., 2009}), en soya en Taiwán (^{Yu-Cheng et al., 2021}) y en papa en México (^{Carling et al., 1998}. Este es el primer reporte de Rhizoctonia solani AG-7 causando pudrición de raíz en frijol en México. Este reporte ayudará a generar nuevas estrategias de manejo para la enfermedad en el cultivo de frijol.

Figura 1 Rhizoctonia solani AG-7 causante de pudrición de la raíz del frijol común. A. Síntomas en tallos y raíces infectados naturalmente. B. Síntomas en plantas inoculadas artificialmente, 30 días después de la inoculación. C. Colonia en PDA después de 7 días a 25 °C en oscuridad. D. Colonia en PDA después de 20 días. E. Hifas teñidas con Safranina-O que muestran células multinucleadas y ramificación en angulo recto y constreñida ligeramente en su base. 

Figura 2 Filogenia por MV de las secuencias concatenadas de los genes ITS y RPB2 de dos aislados de Rhizoctonia spp. obtenidos de plantas de frijol con síntomas de secadera y pudrición de raíz. Bootstrap de 1000 réplicas; grupo externo: Botryobasidium simile. AG=Grupo anastomósico.