Inmovilización en campo del lobo marino de California (Zalopus californianus) con un equipo portátil de anestesia inhalada usando isofluorano

Field inmobilization of California sealion (Zalophus californianus) with a portable anesthesia machine using isuofluorane

Alberto Parás¹, Marco A. Benítez¹, Dulce M. Brousset², David Aurioles³, Sebastián Luque³ y Carlos Godínez²

¹Africam Safari, 11 Oriente 2407 Puebla Puebla 72007 México.

²Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia UNAM, Ciudad Universitaria, D.F. 04510. México.

Recibido: 24 de julio de 2001
Aceptado: 20 de marzo de 2002

Resumen

El trabajo de campo se llevó a cabo en 11 loberas de reproducción del Golfo de California, México, en los meses de junio y julio durante la temporada de reproducción. Un total de 288 crías (137 machos; 151 hembras) y dos hembras adultas de lobo marino de California (Zalophus californianus) fueron anestesiadas con isofluorano con un equipo portátil de anestesia inhalada. La duración de la anestesia en las crías fue de seis a 25 minutos (media 12.51; DS ± 4.38). Se manejaron 24 crías en promedio por isla (con un rango de 16 a 29 animales) de una edad de dos a 42 días y de seis a 17.4 kg de peso (media 10.41 kg; DS ± 2.02). En las hembras adultas el tiempo de inducción fue de cuatro a 10 minutos y se manejaron por un periodo de una hora veinte minutos, encontrando apneas prolongadas. La anestesia inhalada usando isofluorano probó ser eficaz y segura para la inmovilización de crías y hembras adultas de lobo marino de California en condiciones de campo, permitiendo la obtención de datos de calidad en una situación de tiempo limitada, playas rocosas y clima desértico en verano.

Palabras clave: Lobo marino de California, Zalophus californianus, anestesia inhalada, isofluorano.

Abstract

Keywords: California sea lion, Zalophus californianus, field anesthesia, portable anesthesia machine, Isoflurane.

El lobo marino de California (Zalophus californianus) se encuentra distribuído ampliamente en el Golfo de California, México. Su población actual se estima en alrededor de 30,000 animales distribuidos en 40 loberas, de las cuales 13 son sitios de reproducción que contienen al 93% de la población en la época de reproducción, 18 son loberas de no reproducción y el resto son sólo lugares temporales de descanso (Aurioles-Gamboa y Zavala, 1994; Zavala, 1990).

Los estudios realizados con esta especie en México, se han intensificado en los últimos años, enfocándose principalmente a conocer la dinámica de la población, ecología y algunos aspectos relacionados con la interacción de esta especie con la industria pesquera. El manejo directo de las crías de lobos marinos por contención física se ha realizado en estas loberas desde los años ochentas lo que ha permitido marcarlas, obtener el peso y medidas correspondientes, así como realizar observaciones directas de la calidad de las loberas de reproducción, que han sugerido diferencias significativas entre éstas islas (Zavala, 1990). Sin embargo, la inmovilización química se ha hecho necesaria debido a que la verificación da esta información requiere de la manipulación de animales relajados, de manera que puedan obtenerse muestras biológicas y medidas morfométricas con mayor precisión.

Este artículo describe el trabajo realizado para adaptar la anestesia inhalada y las técnicas de evaluación del animal anestesiado para su uso móvil, continuo y rápido en las condiciones de campo de las diferentes loberas en el Golfo de California.

La anestesia de pinnípedos se ha realizado con agentes anestésicos inyectables, tales como la ketamina, detomidina (Heard y Beusse, 1993), zolazepam y tilatamina (Loughlin y Spraker, 1989), fentanil (Work et al., 1993), entre otros. Sin embargo, la desventaja de éstos es la imposibilidad de controlar la dosis y profundidad de la anestesia, lo cual es particularmente importante en mamíferos marinos que pueden dejar de respirar espontáneamente cuando se encuentran inconscientes, además del problema de los tiempos prolongados de recuperación para los trabajos de campo en donde los animales deben de regresar al agua recuperados (Work et al., 1993).

En los años recientes el uso de la anestesia inhalada para los mamíferos marinos ha ganado popularidad, ya que es de extrema importancia poder contar con un anestésico que proporcione una rápida inducción, un estado ideal de inmovilización, amplio margen de seguridad y una recuperación completa y rápida (Heard y Beusse, 1993; Heath et al., 1996, 1997; Ridgway y Simpson, 1969; Work et al., 1993).

El uso de isofluorano en mamíferos marinos se ha reportado en cautiverio con buen éxito (Heard y Beusse, 1993). El isofluorano permite una inducción y recuperación corta, y ha mostrado muchas ventajas sobre el halotano. Se ha comprobado que el isofluorano tiene una estabilidad química mayor, es más soluble en la sangre, causa menos depresión al miocardio, menos arritmias, mejor relajación muscular y se mataboliza en menor cantidad. Asimismo, se ha observado que el isofluorano causa una depresión respiratoria similar al halotano (Steffey, 1983).

Como parte de un estudio a largo plazo sobre la ecología, comportamiento, fisiología y epidemiología del lobo marino de California, fue evaluado el uso de isofluorano como un agente anestésico para el manejo de un gran número de crías de cero a seis semanas de edad en varias colonias de reproducción del Golfo de California.

El estudio se realizó durante los meses de junio y julio de 1997 que corresponde a la época de reproducción de esta especie. En general la llegada a las islas fue alrededor de las 08:00 hrs y la salida al atardecer de manera que pudiera continuarse el viaje durante la noche a la siguiente isla.

El equipo de trabajo consistió de tres personas para realizar la anestesia y tomar muestras y medidas, además de dos personas para capturar y cuidar de las crías antes y después de la anestesia, así como para regresarlas al lugar de su captura conforme se requería. Cada animal se capturaba tomándolos de la base de las aletas caudales y se colocaba a la sombra, en una tina de plástico con agua, mientras esperaba su turno para ser manejada, manteniéndose un máximo de 10 crías en estas condiciones.

Para la aplicación de la anestesia se utilizó un vaporizador Isote 3 (Ohmeda, UK) adaptado a un equipo de anestesia para pequeñas especies (Anasco Laboratories) que constaba de una columna de oxígeno con capacidad para regular el flujo de 0.2 a 5 litros por minuto y una bolsa de ventilación de un litro. La máquina de anestesia se colocó en una caja de madera (40 x 40 cm), la cual se abre por la parte frontal y superior, permitiendo así fácil acceso durante su uso, y una vez que se cierra la caja, el transporte del aparato es cómodo y seguro, tanto en el terreno rocoso que caracteriza a la mayoría de las islas, como al abordar y desembarcar en cada lobera. Un tanque de oxígeno de aluminio se colocó también para su transporte, en otra caja de madera (80 x 20 cm). El equipo completo de anestesia pesa 15 kg. Para evitar derrames durante el transporte que pudieran dar concentraciones alteradas durante su uso, el isofluorano se colocaba en el vaporizador, sólo hasta que el equipo estaba instalado en el sitio en el que se iban a realizar las anestesias, previa nivelación.

Para la inducción de la anestesia, se colocó a los animales sobre una mesa de madera bajo sombra. Mientras una persona mantenía las aletas dorsales contra el animal y otra sostenía la cabeza, se colocaba en el hocico del animal un cono de plástico conectado a la máquina de anestesia portátil, usando un circuito abierto para administrar isofluorano (Forane Abbon Laboratories Limited. Queenborough. Kent, UK) al 5% en oxigeno (1-2 L/min.) hasta que el animal se relajaba lo suficiente para permitir la intubación endotraqueal y la toma de medidas y muestras.

Debido a las restricciones de tiempo en el trabajo en cada lobera, sólo fueron intubados algunos animales, mediante sondas endotraqueales de cuatro a seis mm (Kendall Gammatron LTD), dependiendo del peso del animal. La sonda endotraqueal se colocó por visualización directa con un laringoscopio con una hoja de 13 cm de largo, procurando introducirla solamente pasando la laringe para evitar la intubación endobronquial, que es un problema ya reportado en esta especie (McGrath et al., 1981). La concentración de isofluorano se ajustó de acuerdo con la respuesta a estímulo, así como a la presencia o ausencia de reflejo palpebral y al tono mandibular. Los animales se mantuvieron en recumbencia ventral y se movieron según fue necesario para facilitar la toma de muestras y medidas.

Desde el inicio de la anestesia se evaluaron los siguientes parámetros: reflejo palpebral, tono mandibular, tiempo de llenado capilar, respiración por medio de movimientos toráxicos y, por medio de un oxímetro de pulso de batería modelo 340 (Box Laboratories) con un lector rectal se evaluó la frecuencia cardiaca, saturación de oxígeno y temperatura corporal. Los animales mantuvieron un patrón de respiración espontánea con ventilaciones manuales periódicas para disminuir la posibilidad de atelectasia. El flujo de isofluorano se cerró una vez terminada la manipulación y a los animales se les retiró la mascarilla o la sonda endotraqueal cuando mostraron signos de recuperación. Posteriormente los animales permanecieron en un lugar sombreado antes de ser regresados a su sitio original dentro de la lobera.

Se realizaron dos anestesias en hembras adultas de 120 kg de peso, utilizando el mismo aparato de anestesia, lo cual permitió la obtención de medidas morfométricas, muestras biológicas y la colocación de un TDR (por sus siglas en inglés, Time Depth Recorder, o equipo de registro de profundidad y tiempo de buceo), la captura se realizó con una red tipo mariposera, induciendo inmediatamente la anestesia a través de la red, se necesitaron cuatro personas para mantener al animal sujeto. A los animales se les colocó una mascarilla consistente en un cono de plástico de 20 cm de largo y 10 cm de diámetro en su abertura mayor, conectado a la máquina de anestesia portátil, por medio de un circuito cerrado, con un contenedor de cal sodada de un litro de capacidad. Se administró isofluorano al 5% en oxígeno (4-5 L/min) hasta que el animal se relajó lo suficiente para permitir la intubación endotraqueal que se realizó usando tubos de 14 mm (Aire cuf, Bivona Inc.), mediante visualización directa con un laringoscopio tipo Wisconsin de 35 cm. Terminado el procedimiento, se les permitió recuperarse solas en el mismo lugar, retirándose todo el equipo y el personal para observarlas a distancia y evitar que entraran al agua hasta que la recuperación fuera completa.

Un total de 288 crías (137 machos; 151 hembras), y dos hembras adultas se anestesiaron en un periodo de 20 días. La edad estimada para las crías fue de entre dos a 42 días de edad, pesando entre seis a 17.4 kg (media: 10.41 kg, DS ± 2.02, n = 288).

En la Tabla 1 se muestran la frecuencia cardiaca, frecuencia respiratoria, saturación de oxígeno, temperatura corporal y tiempo de anestesia, durante la anestesia de las crías.

En el caso de las crías, el uso de la anestesia permitió trabajar de 16 a 29 animales en cada una de las islas (24 crías en promedio). La duración de la anestesia varió de seis a 25 minutos (media 12.51 ; DS ± 4.38; n = 288), lo que dió un tiempo promedio de seis horas de trabajo por día.

El tiempo de inducción varió de 30 segundos a tres minutos, de acuerdo al peso y excitación de los animales, siendo el promedio de un minuto. Durante la inducción algunos animales presentaron apneas por períodos variados, lo cual retardó la inducción y ocasionó bradicardia marcada así como una disminución en la saturación de oxígeno en la sangre (Heard y Beusse, 1993). Sin embargo, los animales retomaron su ritmo respiratorio sin mayor asistencia. Este comportamiento se observó en animales con un temperamento más activo.

Cuatro crías regurgitaron leche durante la anestesia y una de ellas murió después del manejo (0.34%). Otro animal murió de hipertermia antes de la anestesia (0.34%), teniendo un porcentaje de éxito del 99.30 %.

En el caso de las hembras adultas se anestesiaron dos animales por periodos de una hora veinte minutos cada una, registrándoseles temperaturas de 36.5°C a 38.6°C (media 37.8°C; DS ± 1.15), frecuencias cardiacas de 60 a 98 por minuto (media 85.4; DS ± 10.04), frecuencia respiratoria de cuatro a 36 por minuto (media 16.30, DS ± 11.49) y saturación de oxígeno de 63 a 97% (media 87.7% DS ± 10.36). En estos animales la inducción tardó de cuatro a 10 minutos, con la presencia de apneas prolongadas (1 a 2 min), que se presentaron tan pronto como se colocó la mascarilla para la inducción. En estos casos la saturación de oxígeno disminuía en cada apnea, pero regresaba a valores por arriba del 80% en cuanto el animal respiraba voluntariamente. Después de una hora de tiempo de anestesia, fue necesaria la aplicación de Doxaoram (Dopram V; Fort Dodge Animal Health) vía intramuscular en la lengua de una de las hembras adultas para asistir la respiración.

La utilización de un equipo portátil de anestesia inhalada usando Isofluorano probó ser eficaz y segura para la inmovilización de crías de lobo marino en libertad, permitiendo una mejor obtención de datos de buena calidad en una situación de tiempo limitado de trabajo. Asimismo, probó ser eficaz y segura para realizar la anestesia prolongada de hembras adultas en libertad y la colocación de equipos de registro de profundidad y tiempo de buceo (TDR).

El uso de isofluorano comparado con el de halotano, usado en otros trabajos de campo con crías de mamíferos marinos (Ridgway y Simpson, 1969; Work et al., 1993), probó tener un tiempo menor de inducción y recuperación, así como un buen control de la profundidad de la anestesia como se había reportado ya en adultos (Heard y Beusse, 1993; Heath et al., 1996). Las apneas se obsevaron más frecuentemente que con el uso de halotano (Work et al., 1993). El tiempo de recuperación fue de menos de un minuto en todos los animales.

Cuando se realizó la intubación endotraqueal en las crías el plano de anestesia se mantuvo con una menor concentración de isofluorano (1.5-2%) y se observaron constantes fisiológicas mas estables. Debido a las limitaciones de tiempo para el trabajo en cada lobera, en muchas ocasiones fue más práctico mantener la anestesia de los animales sólo con la mascarilla; sin embargo, con el comportamiento estable que se observó durante la anestesia de los animales intubados y las complicaciones de regurgitación y apnea que se presentaron, es recomendable realizar este manejo en todos los casos.

En los animales adultos se realizó la intubación endotraqueal una vez que se obtenía un tono mandibular relajado (de 10 a 20 minutos de iniciada la anestesia). Una vez intubado el animal se anulaban las apneas y se podía mantener los planos anestésicos más estables, en especial la saturación de oxígeno que disminuía en cada apnea. Sin embargo en uno de los animales fue necesaria la aplicación de Doxapram vía intramuscular en la lengua para asistir la respiración después de la priniera hora de anestesia, utilizando una dosis de 25 mg totales (Phelan y Green, 1992).

Se determinó que de las dos muertes registradas, una fue relacionada a bronco-aspiración (0.34%) y la otra a hipertermia (0.34%), ya que este último animal no se anestesió, pero sí se mantuvo durante un tiempo relativamente largo en espera. Dada la localización geográfica y la época del año, la hipertermia es el principal factor de riesgo a considerar antes, durante y después del manejo de los animales. En algunos individuos se registraron temperaturas de hasta 41.5°C. Para controlar esto, los animales se mantuvieron húmedos y en la sombra durante todo el tiempo (Heath et al.,1997). Otros trabajos similares con halotano han reportado hasta 3% de mortalidad durante la anestesia (Work et al., 1993).

El costo del equipo de anestesia es justificado, dado el gran número de animales que se pudieron manejar y la calidad de las muestras y mediciones que se obtuvieron en crías inmóviles, pudiendo sangrar al 80% de los individuos comparado con el 40% en años anteriores en los que no se había utilizado anestesia. La mayor limitante para este protocolo es que los animales deben ser sujetados por contención física antes y durante la inducción, lo que no es factible en pinnípedos de mayor tamaño, como los machos de esta especie que sobrepasan los 300 kg de peso sin embargo, la anestesia inhalada con Isofluorano probó ser un método seguro y eficaz para la inmovilización de crías y hembras adultas de esta especie en las extremas condiciones de campo de las loberas de reproducción del Golfo de California en México.

Los autores agradecen al CONACYT el apoyo financiero otorgado a través del proyecto con clave 26430-N. A la SEMARNAP (Instituto Nacional de Ecología), por los permisos de investigación otorgados (DOO 750.-4172/97 y DOO 750.-4443/98). De igual forma, agradecemos a la Armada de México por asistir en el arribo a las isla con la ayuda de un barco cañonero que patrulla el área apoyando la investigación.

Literatura citada

AURIOLES-GAMBOA, D. y G. A. ZAVALA, 1994. Ecological factors that determine the distribution and abundance of the California sea lion (Zalophus californianus) in the Gulf of California. Ciencias Marinas 20 (4): 535-553.         [ Links ]

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