Anatomía de hoja y tallo de Verbenaceae medicinales empleadas en México

Anatomy of leaf and stem of medicinal Verbenaceae used in Mexico

Erika Viridiana Calzada-Sánchez¹, Silvia Aguilar-Rodríguez^{1, 4}, Ma. Edith López-Villafranco² y Abigail Aguilar-Contreras³

¹ Unidad de Morfología y Función, Facultad de Estudios Superiores Iztacala, Universidad Nacional Autónoma de México, Tlalnepantla, Estado de México, México.

³ Herbario IMSSM, Centro Médico Nacional Siglo XXI, Instituto Mexicano del Seguro Social, México, D.F.

⁴ Autor para la correspondencia: siagro@campus.iztacala.unam.mx.

Recibido: 24 de marzo de 2014.
Aceptado: 27 de junio de 2014.

Resumen

Actualmente Aloysia triphylla, Lantana camara, Lippia dulcis, Verbena bipinnatifida, V. carolina y V. litoralis, se encuentran en lista de espera para su inclusión en la Farmacopea Herbolaria de los Estados Unidos Mexicanos. Con la finalidad de contribuir a dicha incorporación y a su identificación, en el presente estudio se compararon caracteres morfo-anatómicos de la hoja, tallo y ramas, de estas seis especies de Verbenaceae empleadas en la medicina tradicional mexicana. Se reconocen dos tipos de tricomas simples y nueve glandulares capitados, estos varían en el número y tamaño de células del pedúnculo y número de células de la cabeza. Caracteres anatómicos foliares distinguen notablemente a A. triphylla de las demás especies. La forma de la hoja, la combinación de tipos de tricomas glandulares y las características anatómicas de la vena media y el pecíolo son las de mayor valor diagnóstico.

Palabras clave: Aloysia, anatomía vegetal, Lantana, Lippia, plantas medicinales, Verbena.

Abstract

Currently, Aloysia triphylla, Lantana camara, Lippia dulcis, Verbena bipinnatifida, V. carolina, and V. litoralis, are in the waiting for list to be included in the Herbal Pharmacopoeia of the United Mexican States. In order to contribute for incorporation and identification of these species, in this study, anatomical vegetative characters, leaf and stem, of these six Verbenaceae used in Mexican traditional medicine, were compared. Two types of simple and nine capitate glandular trichomes are recognized. Glandular trichomes vary in number cells and size in the stalk, as well as in number cell in the head. Leaf anatomical characters of A. triphylla differ from the other species. The lamina shape, combination of types of glandular trichomes and anatomical features in midrib and petiole are the ones with higher diagnostic value in species recognition.

Key words: Aloysia, Lantana, Lippia, medicinal plants, plant anatomy, Verbena.

Verbenaceae es una familia que incluye varias especies de valor medicinal (Aguilar et al., 1994, CPFEUM, 2013). Seis se encuentran incluidas en la relación de especies de uso terapéutico popular de la Extrafarmacopea de la Farmacopea Herbolaria los Estados Unidos Mexicanos (FHEUM): Aloysia triphylla Royle (Té cedrón), Lantana camara L. (Cinco negritos), Lippia dulcis Trev. (Hierba dulce), Verbena bipinnatifida Nutt. (Moradilla), Verbena carolina L. (Verbena) y Verbena litoralis Kunth (Verbena). Los caracteres empleados en su determinación se basan principalmente en la flor y tipo de inflorescencia, además de la forma de su hoja y forma de vida (Bailey, 1924; Gibson, 1970; Calderón de Rzedowski y Rzedowski et al., 2001; Rzedowski y Rzedowski, 2002). El valor de los caracteres anatómicos en la diferenciación de algunas Verbenaceae se ha reconocido en las obras de Metcalfe y Chalk (1950) y Munsif et al. (2007), quienes describen la anatomía foliar y caulinar de diversas especies. Otros trabajos han abordado el desarrollo epidérmico y de las células secretoras (Inamdar, 1969; Moura et al., 2005), tipos de cristales (Mathew y Shah, 1984) y morfología e histoquímica de tricomas (Combrinck, 2006). Estudios anatómicos en Verbenaceae también se han realizado con la finalidad de contribuir a tener control de calidad de las especies con uso medicinal y aportar datos a farmacopeas en Sudamérica (Bonzani et al., 1997, 2003; Albrecht et al., 2005, 2007; Andersen et al., 2006; Gattusso et al., 2008; Passos et al., 2009). Lantana camara es la especie más estudiada en este campo, mientras que para A. triphylla y V. bipinnatifida sólo se registra un trabajo (Munsif et al., 2007) y para L. dulcis, V. carolina y V. litoralis no se reconocen estudios anatómicos. Uno de los requisitos para que las seis especies de Verbenaceae referidas en la Extrafarmacopea sean incluidas en la FHEUM, es tener información confiable de su morfo-anatomía que contribuya a su identidad y control de calidad. En el presente trabajo se han planteado las siguientes preguntas: ¿existen caracteres morfo-anatómicos de la hoja que permitan distinguir entre las especies de Verbenaceae registradas en la Extrafarmacopea de la FHEUM?, ¿qué caracteres anatómicos del tallo y ramas aportan información para distinguirlas?, ¿qué caracteres son diacríticos y cuáles son comunes entre ellas? Con base en ello, se han planteado los objetivos de describir y comparar la morfo-anatomía de hoja, tallo y rama, de seis especies de Verbenaceae registradas en la Extrafarmacopea de la FHEUM y elaborar una clave para su identificación.

Materiales y métodos

Obtención de especímenes. Los tallos, ramas y hojas maduras de 23 individuos, se obtuvieron de ejemplares herborizados de la colección científica del herbario IZTA, de mercados y de jardines particulares (Cuadro 1). El material colectado se encuentra depositado en la colección etnobotánica del Herbario IZTA y del Herbario IMSSM.

Morfología foliar. Debido a que el tamaño, la forma y la textura son caracteres que apoyan significativamente en el reconocimiento de las especies, se examinaron algunos caracteres morfológicos de las hojas de los ejemplares estudiados. También se revisaron datos acerca del hábito y tamaño del individuo para cada especie. Para ello se tomaron como base las descripciones de Bailey (1924), Gibson (1970) y Calderón de Rzedowski y Rzedowski et al., (2001).

Resultados

En el cuadro 2 se muestra el hábito, tamaño de los individuos y algunas características morfológicas de las hojas por especie. Los 11 tipos de tricomas reconocidos en hoja, tallo y rama varían en número de células y tamaño entre los taxones (Cuadro 3), y sus características diacríticas se aprecian en los modelos de la figura 1A. Dos son simples uniseriados, estos pueden presentar una superficie verrucosa y en su base células epidérmicas abultadas que se ordenan radialmente (Figura 1C). El resto (9) corresponde a los glandulares capitados, sésiles, o con pedúnculo y cabeza que varían en el número de células (Figura 1B, D-F). En las descripciones se señalan sus abreviaturas.

Aloyisia triphylla. Lámina foliar: En vista superficial, células de ambas epidermis con paredes anticlinales ligeramente sinuosas a rectas; estomas anomocíticos, con células subsidiarias estriadas en la superficie abaxial (Figura 2A). Con tres tipos de apéndices epidérmicos: Su, Gc1 y Gp1c1. En sección transversal, cutícula delgada, lisa en la superficie adaxial y crenada en la abaxial; epidermis simple, las paredes tangenciales externas más gruesas que las internas, estomas hipostomáticos, algunos se elevan ligeramente sobre la epidermis (Figura 2B), con cámaras subestomáticas; mesofilo bifacial, el parénquima en empalizada formado por 2-3 estratos de células con paredes delgadas y rectas, el parénquima esponjoso de 3-5 estratos, con células de forma irregular, dispuestas de manera laxa. A veces con columnas de parénquima que se proyectan desde la superficie adaxial hacia el mesofilo, asociadas a venas secundarias (Figura 2B). Vena media (Figura 3A): Forma una cresta prominente hacia la superficie abaxial, contorno redondeado. Cutícula lisa en ambas superficies, o ligeramente crenada en la abaxial, con los tres tipos de tricomas reconocidos para la lámina. En sección trasversal ambas epidermis simples. Por debajo de la epidermis adaxial, colénquima angular, con 1-4 estratos de células. Tejido vascular formando un arco, rodeado total o parcialmente por una banda de esclerénquima (Figura 3A). Por debajo, 2-6 estratos de parénquima con drusas escasas, pequeñas (7 µm), enseguida 1-2 estratos de células de colénquima angular.

Pecíolo (Figura 3G): En sección transversal, de forma circular-ovalada, con dos alas prominentes. Tejido vascular en forma de arco continuo, con haces vasculares accesorios en sus extremos, dos centrales alargados tangencialmente; esclerénquima rodeando al tejido vascular. El extremo distal de cada ala con un haz vascular accesorio.

Ramas: En sección transversal, de forma circular a hexagonal (Figura 4A); cutícula delgada, lisa a ligeramente crenada; tres tipos de tricomas como los descritos para la hoja. Epidermis simple, con paredes tangenciales engrosadas. En el córtex, colénquima lagunar de una capa, mejor desarrollado en los ángulos del tallo, con 5-9 estratos, el clorénquima formado por células isodiamétricas. Por debajo, una banda continua de un sólo estrato de células parenquimáticas, seguida de paquetes de esclerénquima más evidentes en los ángulos del eje (Figura 4A, G). Floema secundario en ocasiones con cristales prismáticos en el parénquima axial. Xilema secundario con porosidad difusa, vasos solitarios o agrupados en cadenas radiales (Figura 4G). Médula parenquimatosa amplia o reducida, de forma circular o irregular y bordes ondulados, con un canal central (Figura 4A).

Lantana camara. Lámina foliar: En vista superficial, células de ambas epidermis con paredes anticlinales sinuosas; estomas anomocíticos, escasos diacíticos, anfiestomáticos. Con siete tipos de apéndices epidérmicos: Su, Sb, Gc1, Gp1c1, Gp1c2, Gp2c2 (Figura 1F) y Gp3cM (Figura 1A; Cuadro 3). En sección transversal, cutícula delgada y lisa; epidermis simple, las paredes tangenciales externas más gruesas que las internas, algunos estomas se elevan ligeramente sobre ambas superficies de la epidermis; mesofilo bifacial, el parénquima en empalizada formado por dos estratos de células con paredes delgadas y rectas, el parénquima esponjoso de tres estratos, con células de forma irregular, dispuestas de manera laxa. Venas secundarias rodeadas por células de parénquima. Vena media (Figura 3B): Forma una cresta prominente hacia la superficie abaxial, contorno semicircular. Cutícula lisa a ligeramente crenada en ambas superficies, con tricomas Su en ambas superficies. En sección transversal, epidermis simple. Por debajo de la epidermis adaxial, colénquima angular abundante formando una protuberancia estrecha o amplia. Tejido vascular en forma de arco continuo, hasta con cuatro haces vasculares accesorios. Por debajo, 1-5 estratos de parénquima, enseguida 2-3 estratos de colénquima angular. Drusas (8 µm) abundantes en el parénquima de toda la vena media.

Pecíolo (Figura 3H): En sección transversal, de forma circular, sin alas o con dos alas poco prominentes; tejido vascular en forma de arco continuo con haces vasculares accesorios colindantes en sus extremos y hasta diez centrales de forma circular. Con un haz vascular accesorio en el extremo distal y uno más pequeño en la base de cada ala. Drusas abundantes.

Ramas (Figura 4B): En sección transversal, de forma subcuadrangular a circular; cutícula delgada, lisa, tricomas como los descritos para la hoja, pero Sb ausentes y Su abundantes. Epidermis simple, con paredes engrosadas. En el córtex, colénquima angular, de 2-4 estratos, mejor desarrollado en los ángulos del tallo, con siete estratos (Figura 4H), el parénquima con 1-2 estratos de células isodiamétricas o ausente. Por debajo, una banda más o menos continua de esclerénquima más evidente en los ángulos, ramas más desarrolladas con peridermis y córtex ausente (Figura 4I). Xilema secundario con porosidad difusa, vasos principalmente solitarios, escasos en hileras radiales (Figura 4I). Médula parenquimatosa amplia con forma subcuadrangular en ramas jóvenes con xilema secundario poco desarrollado, reducida y circular en ramas más desarrolladas (Figura 4B).

Pecíolo (Figura 3I): En sección transversal, de forma circular, con dos alas prominentes o poco prominentes; tejido vascular en forma de arco continuo. Con un haz vascular accesorio en el extremo distal y uno más pequeño en la base de cada ala.

Tallo (Figura 4C): En sección transversal, de forma circular; cutícula delgada, lisa, en algunas zonas granulosa; dos tipos de tricomas como los descritos para la hoja, ausente el Gc1. Epidermis simple con paredes tangenciales engrosadas, con estomas, a veces elevados. En el córtex, colénquima lagunar, con 3-4 estratos, el parénquima con tres estratos de células, en seguida una peridermis y córtex ausente en la base del tallo. Xilema secundario con porosidad difusa, vasos principalmente solitarios, escasos en hileras radiales (Figura 4J). Médula parenquimatosa con forma circular y bordes ondulados.

Verbena spp. Lámina foliar: En vista superficial, células epidérmicas con paredes anticlinales sinuosas, más evidentes en la superficie abaxial, en V. carolina las paredes de ambas superficies igualmente sinuosas; estomas anomocíticos en ambas superficies (Figura 2C), V. bipinnatifida con cámaras subestomáticas. Con cinco tipos de apéndices epidérmicos: Su, Gc4, Gp1c4, Gp2c4, y GpL2c4; el GpL2c4 ausente en V. carolina (Figura 1A; Cuadro 3). En sección transversal de ambas superficies, cutícula lisa y delgada, en algunas zonas de V. bipinnatifida y V. litoralis con gránulos; epidermis simple en ambas superficies, las paredes tangenciales externas más gruesas que las internas, estomas en la epidermis abaxial, algo elevados en V. bipinnatifida; mesofilo bifacial, el parénquima en empalizada formado por 2-3 estratos de células con paredes delgadas, las radiales sinuosas o rectas, el parénquima esponjoso de 3-4 estratos con células de forma irregular, dispuestas de manera laxa (Figura 2D). Venas secundarias rodeadas por células de parénquima. Vena media (Figura 3D-F): Forma una cresta prominente hacia la superficie abaxial, forma circular a semicircular. Cutícula crenada en ambas superficies, en V. bipinnatifida puede ser ligeramente granulosa en la superficie adaxial; con los cinco tipos de tricomas reconocidos para la lámina, el GpL2c4 ausente en V. carolina. En sección transversal, epidermis simple. Por debajo de la epidermis adaxial, colénquima angular y parénquima, colénquima escaso en V. bipinnatifida (1-2 estratos de células; Figura 3D), más abundante en las otras dos especies, en V. carolina con protuberancia, en ocasiones bien desarrollada, constituida además por células de parénquima (Figura 3E), en V. litoralis puede o no estar presente (Figura 3F). En el tejido vascular, xilema con diferentes grados de desarrollo; en forma de arco continuo en V. bipinnatifida y V. litoralis, en V. carolina reniforme. Por debajo, de 3-7 estratos de parénquima seguidos de 1-2 de colénquima angular, ausente en V. bipinnatifida.

Pecíolo (Figura 3J-L): En sección transversal de forma circular a elíptica, con dos alas, prominentes en Verbena carolina y V. litoralis (Figura 3K, L); tejido vascular en forma de arco continuo o elíptico en V. carolina, reniforme en V. litoralis y medio círculo en V. bipinnatifida (Figura 3J). Con haces vasculares accesorios en cada ala, 2-4 en V. bipinnatifida, 3 en V. litoralis y 4(5) en V. carolina.

Tallo (Figura 4D-F, K-N): En sección transversal, de forma cuadrangular, ocasionalmente con más de cuatro ángulos en Verbena bipinnatifida, a veces tres en V. carolina (Figura 4E); cutícula estriada (Figura 4K), en V. carolina lisa a ligeramente estriada; tres tipos de tricomas en V. bipinnatifida (Su, Gc4, Gp1c4), cuatro en V. carolina (Su, Gc4, Gp1c4, Gp2c4), los Su y los Gc4 escasos, cinco en V. litoralis (Su, Gc4, Gp1c4, Gp2c4 y GpL2c4). Epidermis simple, con paredes tangenciales engrosadas, con estomas, algunos elevados en V. bipinnatifida y V. carolina (Figura 4M). En el córtex, colénquima angular de un estrato celular, mejor desarrollado en los ángulos del tallo, con 4-6 estratos, hasta 7 en V. carolina (Figura 4L); clorénquima con 3-7 estratos de células de paredes delgadas que aumentan de tamaño en dirección hacia la médula, estas últimas se alargan horizontalmente. Por debajo, una banda de 1-3 estratos de células parenquimáticas, en seguida paquetes de esclerénquima alrededor del tallo, formados por 1-2, hasta varias hileras a nivel de los ángulos; en ocasiones canales esquizógenos entre los paquetes de esclerénquima en V. carolina (Figura 4N). Xilema secundario más desarrollado, en general, a nivel de los ángulos con porosidad difusa; vasos solitarios o agrupados en cadenas radiales de 2 o más. Médula parenquimatosa, forma circular, triangular o cuadrangular, con bordes ondulados en V. bipinnatifida y canal central presente o ausente (Figura 4D-F).

Clave para la identificación de las especies con base en caracteres morfo-anatómicos de la hoja

Plantas con o sin crecimiento secundario, tallos de contorno angulosos, algunas veces circular en sección transversal; con colénquima en los ángulos de tipo angular y lagunar, hoja con tricomas simples uni-bicelulares, tricomas glandulares sésiles y con pedúnculo de longitud variable, con cabeza uni-bi o multicelular.

1. Tejido vascular de la vena media y pecíolo rodeados total o parcialmente por una banda de esclerénquima, paredes de las células epidérmicas ligeramente sinuosas a rectas, estomas hipoestomáticos ..................................Aloysia triphylla

2. Pecíolo sin alas o si las presenta son poco prominentes, su tejido vascular hasta con 10 haces vasculares accesorios centrales, drusas abundantes en vena media y pecíolo .................................................................Lantana camara

2. Pecíolo con alas prominentes, o si poco prominentes, el tejido vascular no en forma de arco abierto; sin haces vas- culares accesorios centrales, o si presentes, entonces menos de 10; drusas ausentes, escasas o con abundancia regular.

3. Lámina foliar con dos tipos de tricomas glandulares (Gc1, Gp1c2); drusas pequeñas en la cresta de la vena media, abundancia regular .........................Lippia dulcis

3. En la hoja tricomas glandulares de tipo Gc4, Gp1c4, Gp2c4.

4. Hojas tripartidas a pinnatífidas o bipinnatífidas; pecíolo evidente (ocasionalmente ausente), con alas poco prominentes, tejido vascular en forma de medio círculo; en vena media colénquima abaxial ausente o poco evidente ......................................Verbena bipinnatifida

4. Hojas oblongas, oblongo-lanceoladas, o elípticas; pecíolo muy corto o ausente, con alas prominentes, tejido vascular en forma de arco continuo o reniforme; en vena media colénquima abaxial evidente.

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5. Tejido vascular formando un arco continuo en vena media y reniforme en pecíolo; con tres haces vasculares accesorios en cada ala del pecíolo ....V. litoralis.

5. Tejido vascular reniforme en vena media y de forma elíptica o de arco continuo en pecíolo; con 4(5) haces vasculares accesorios en cada ala ........................................................................................V. carolina

Discusión

La hoja y tallo de las seis especies de Verbenaceae muestran caracteres anatómicos comunes en la familia (Metcalfe y Chalk, 1950); sin embargo, algunas diferencias se observaron entre las especies. Estas se basan principalmente en la abundancia y conjuntos únicos de tipos de tricomas, así como en las características del pecíolo y la vena media de la hoja.

Lamina foliar. Las paredes gruesas de las células epidérmicas se observan en todas las especies. Al respecto, Munsif et al. (2007) hacen referencia a que variaciones en este carácter pueden ayudar a la identificación entre especies de Verbena, Lantana y Vitex. Estomas anfiestomáticos se observan en cinco especies, excepto en Aloysia triphylla, que los presenta sólo en la superficie abaxial, carácter que la distingue de los otros taxa. Estomas hipoestomáticos también son descritos por Gattuso et al. (2008) para la misma especie y ha sido uno de los atributos tomados en cuenta para distinguir a A. triphylla entre mezclas de plantas medicinales (Turano y Cambi, 2009). Por otro lado, la presencia de estomas en ambas superficies de la hoja se menciona para la mayoría de las especies de Lantana y Verbena (Metcalfe y Chalk, 1950). Los estomas anomocíticos son característicos en todas las especies estudiadas. Albrecht et al. (2007) los reconocen para L. camara, mientras que Passos et al. (2009) y Munsif et al. (2007) describen además, para esta misma especie, el tipo diacítico, como lo observado en este trabajo. El tipo estaurocítico registrado por Munsif et al. (2007) para V. bipinnatifida, no se apreció en los individuos estudiados. Los registros de Mathew y Shah (1984) arrojan ocho tipos diferentes para diversas especies de Verbenaceae; esto sugiere que la morfología estomática es una herramienta con significado taxonómico a nivel de familia. En la lámina foliar de A. triphylla, L. camara, Lippia dulcis y V. bipinnatifida, algunos estomas se encuentran elevados sobre columnas de células, como lo mencionan Bonzani et al. (1997) y Gattuso et al. (2008) para las dos primeras especies. A este tipo de estomas, Bonzani et al. (1997) los nombran micromameliformes, pero además describen otros en columna cónico-cilíndrica para las dos especies mencionadas; característica que no se observó. De acuerdo a estos autores, la variabilidad observada en la forma de la columna estomática puede deberse a distintos estadios de desarrollo. Al parecer, su número y posición en la hoja puede variar, pues a diferencia de lo reportado, en los casos analizados aquí se presentaron escasos en la lámina foliar. Estudios ontogenéticos de estomas realizados en diversas especies de Verbenaceae no los describen (Inamdar, 1969; Mathew y Shah, 1984). A este tipo de estomas se les atribuye una posible función secretora (Bonzani et al., 1997). El mesofilo bifacial es una característica general para la familia y al parecer no aporta datos que contribuyan a la separación de las seis especies. El parénquima en empalizada conformado de varios estratos celulares se reconoce a nivel de género para Verbena, Lantana y Lippia (Metcalfe y Chalk, 1950), y a nivel específico de 2-3 para L. camara y A. triphylla (Albrecht et al., 2007; Gattuso et al., 2008; Passos et al., 2009). En este estudio, el número de estratos en empalizada varió de 2-3 en todas las especies estudiadas. De acuerdo a Andersen et al. (2006), el número de capas y la disposición del parénquima en empalizada se modifican en función del ambiente en plantas de L. turbinata crecidas en invernadero y en su ambiente natural.

Vena media. El tejido vascular en forma de arco se ha descrito para varias Verbenaceae (Metcalfe y Chalk, 1950); sin embargo, en sección transversal se distinguen ciertos contrastes en la forma y desarrollo de los tejidos. Por ejemplo, en Verbena carolina existe un gran desarrollo del xilema, mostrándose reniforme, por lo que la amplitud de dicho arco representa un elemento que contribuye en su diferenciación. En el caso de Aloysia triphylla, presenta una vaina irregular de células de esclerénquima que rodea al cordón vascular, que no comparte con el resto de las especies. Sin embargo, parece que esta define en parte al género Aloysia (Metcalfe y Chalk, 1950).Con respecto a la presencia de drusas, se hallan en la vena media de A. triphylla, Lantana camara y Lippia dulcis, lo cual ha sido reportado sólo para las dos primeras especies (Mathew y Shah, 1984; Potocnjak-Rivas, 2003). Se menciona que la distribución, tipo y tamaño de los cristales sirven como caracteres diagnósticos en Verbenaceae (Munsif et al., 2007). Es notable destacar que estos tres géneros, clasificados en la tribu Lantaneae (Marx et al., 2010), presenten drusas en la hoja. Mientras que el género Verbena (Verbeneae) carece de este tipo de cristales.

Tricomas. Los tipos de tricomas reconocidos corresponden a dos grupos: simples (Su y Sb) y glandulares (Gc1, Gp1c1, Gp1c2, Gp2c2, Gc4, Gp1c4, Gp2c4, GpL2c4, Gp3cM). A pesar de que Metcalfe y Chalk (1950) registran tricomas para las Verbenaceae, haciendo mención de los géneros Lantana, Lippia y Verbena, no refieren detalles de los tricomas glandulares para los taxones descritos en este trabajo. El tricoma Su es el único que se presenta en todas las especies. Al parecer es un tipo universal en la familia, pues se ha reportado como común en otros trabajos para Verbenaceae (Bonzani et al., 1997; Albrecht et al., 2005, 2007; Gattuso et al., 2008; Passos et al., 2009). El tricoma Sb, observado solo en hojas de L. camara, también es referido por Passos et al. (2009) para esta especie. Los tricomas simples muestran en su base células epidérmicas abultadas que se ordenan radialmente. Esta característica también es descrita para Aloysia triphylla y L. camara por Albrecht et al. (2005) y Passos et al. (2009). En ciertos trabajos nombran a dichas células basales como emergencias unibiestratificadas (Bonzani et al., 1997; Albrecht et al., 2007). La abundancia y tamaño de los tricomas simples varía entre especies, siendo más abundantes en L. camara. A pesar de que es bien sabido que estas características varían en función del ambiente, O'Leary et al. (2010) usan la abundancia y posición de los tricomas glandulares/simples como caracteres taxonómicos. Las Verbena comparten tres tipos de tricomas glandulares (Gc4, Gp1c4 y Gp2c4). Verbena bipinnatifida y V. litoralis tienen además, tricomas GpL2c4, pero su longitud muestra diferencias entre ambas especies (Cuadro 3). Lantana camara, con cinco tipos de tricomas glandulares, además de los simples, hace que sea la especie con mayor diversidad de tricomas. Otros trabajos describen cuatro de los cinco tipos de tricomas descritos aquí para L. camara, aunque sus resultados muestran diferencias en el número de células del pie y/o de la cabeza. Es recomendable realizar estudios en torno a la ontogenia de los tricomas que ayuden a esclarecer dichos contrastes; por ejemplo, el tricoma Gp1c1 en L. camara, se registra por primera vez en este trabajo (Bonzani et al., 2003; Albrecht et al., 2007; Passos et al., 2009). Por su parte, A. triphylla muestra dos tipos de tricomas glandulares (Gp1c1 y Gc1), también descritos por Albrecht et al. (2005), Bonzani et al. (2003) y Gattuso et al. (2008). Además, Bonzani et al. (2003) detallan tricomas glandulares no observados por nosotros para esta especie, como son los pedunculados 1,2-celular con cabeza 2-celular y los pedunculados 2-celular con cabeza 1-celular. Aloysia triphylla y L. dulcis son las que presentan menor diversidad de tricomas glandulares y la combinación única de éstos contribuye a la diferencia entre ellas; L. dulcis presenta tricomas Gp1c2, ausentes en A. triphylla. No obstante que los tricomas Gp1c2 se comparten con L. camara, se diferencia porque es la especie que muestra mayor diversidad de tricomas glandulares. Los tricomas glandulares encontrados en este estudio, se describen de manera general por Metcalfe y Chalk (1950) como pedunculados con cabeza uni-multicelular, reconociéndolos como característicos de las Verbenaceae. En nuestro caso, las variantes de estos tricomas contribuyen a distinguir entre las seis especies estudiadas. Sin embargo, es importante considerar factores ambientales que puedan influir en dicha variación, pues algunos autores consideran a los tricomas como un criterio restringido taxonómicamente para la familia (Andersen et al., 2006). Por ejemplo, se ha demostrado que los tricomas de especímenes de L. turbinata, provenientes de zonas xerófitas de Sudamérica, se presentan en mayor densidad y tamaño que los que habitan en ambientes mesófitos (Andersen et al., 2006). Estudios en este campo deben promoverse para esclarecer el uso del carácter "tricoma" en la identidad de las especies o grupos de ellas en las Verbenaceae.

Pecíolo. Entre los caracteres que apoyan a la separación de las seis especies estudiadas, se encuentran los relacionados con el pecíolo. La forma en vista transversal es redondeada, con dos alas de diferentes tamaños, debido a la forma cuneada de la base de la lámina foliar. En Lantana camara son poco prominentes o no se presentan debido a que la atenuación de su lámina hacia la base varía, quedando en ocasiones por arriba de la porción media del pecíolo. La longitud de las alas en el pecíolo ha contribuido a la separación de grupos de especies en el género Solanum (Benítez y Ferrarotto, 2012). Para las Verbenaceae estudiadas se reconocen como poco prominentes en L. camara (cuando se presentan), Lippia dulcis y Verbena bipinnatifida. El sistema vascular muestra las características que se describen para dos de los tres géneros estudiados aquí, Lantana y Lippia, referidos por Metcalfe y Chalk (1950). Sin embargo, el arco continuo y las alas presentan haces vasculares accesorios, que varían en número entre las especies. Las tres Verbena se distinguen por la diversidad de formas en el tejido vascular y no siempre concuerdan con las descripciones mencionadas por Metcalfe y Chalk (1950). Por ejemplo, la forma "arriñonada" y de "medio circulo", describen mejor a V. litoralis y V. bippinatifida respectivamente. El esclerénquima que rodea al tejido vascular en Aloysia triphylla la distingue del resto de las especies y es un carácter constante en los ejemplares estudiados, que se presenta también en la vena media de su lámina.

Algunas características foliares muestran valor diagnóstico a nivel de especie. Los tallos no se discuten en este sentido; debido a que los diferentes estadios de desarrollo estudiados no son comparables; sin embargo, este análisis permite proporcionar información acerca de las características anatómicas de las porciones que se emplean medicinalmente. Los tricomas simples y glandulares se reconocen como comunes; sin embargo, sus formas y combinaciones en las hojas maduras, contribuyen significativamente en la separación de las especies. De la misma manera, la vena media y el pecíolo son otros elementos potencialmente útiles para tal diferenciación. Este estudio contribuye a la inclusión de estas especies a la Farmacopea Herbolaria de los Estados Unidos Mexicanos.

Agradecimientos

Las autoras agraden a dos revisores, Dorismilda Martínez-Cabrera y a uno anónimo, por las valiosas sugerencias realizadas al manuscrito original.

Literatura citada

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