Diseño de un medio de cultivo para células de mamífero utilizando fuentes alternativas de nitrógeno y vitaminas
Cell culture media desing for mammalian cells by using alternative sources of nitrogen and vitamins
G.E. Espinosa–Ayala1,2,3, C. Rivas–Morales2, K. Arévalo–Niño1, A. Oranday–Cárdenas2, D.E. Cruz–Vega3, J. Castro–Garza3 y P. Carranza–Rosales3*
1 Laboratorio de Biotecnología. Facultad de Ciencias Biológicas. Universidad Autónoma de Nuevo León. Pedro de Alba s/n Ciudad Universitaria, CP 66451. San Nicolás de los Garza, Nuevo León, México.
2 Laboratorio de Química Analítica. Facultad de Ciencias Biológicas. Universidad Autónoma de Nuevo León. Pedro de Alba s/n Ciudad Universitaria, CP 66451. San Nicolás de los Garza, Nuevo León, México.
]]> 3 Centro de Investigación Biomédica del Noreste, IMSS. 2 de Abril y San Luis Potosí. Col. Independencia. CP 64720. Monterrey, Nuevo León, México. * Autor para la correspondencia: E–mail: pilarcarranza@cibinmty.net Tel. (81) 8190–4035
Recibido 12 de Mayo 2006
Aceptado 26 de Septiembre 2007
Resumen
La composición de los medios de cultivo celular influye en la proliferación, morfología y fisiología de las células que se propagan en ellos. En el presente trabajo se diseñó un medio de cultivo a base de peptona y extracto de levadura grado industrial para adaptar las líneas celulares OK, CHANG y LLCPK–1. Las tres líneas celulares se cultivaron exitosamente en una mezcla 25:75 de MEM:MD (MEM = medio testigo; MD = medio diseñado) determinado por la comparación de los parámetros de crecimiento, morfología celular y susceptibilidad a HgCl2 con el medio testigo MEM. Una proporción mayor de MD en la mezcla 5:95 produjo alteraciones morfológicas del núcleo, en la relación núcleo–citoplasma y una disminución en el crecimiento que no permitió la evaluación de los otros parámetros. La falta de crecimiento de las células cultivadas en la mezcla 5:95 y las alteraciones morfológicas observadas posiblemente se debieron a la concentración de metales en niveles tóxicos en el extracto de levadura y la peptona, así como a una baja concentración de zinc en el extracto de levadura.
Palabras clave: medios de cultivo, adaptación celular, peptona, extracto de levadura.
Abstract
]]> Culture media formulation has a direct influence on growth, morphology and physiology of cells. In this work, a mammalian cell culture medium was formulated based on peptone and yeast extract with an industrial reagent level. Three different mammalian cell lines, OK, CHANG y LLCPK–1 were successfully grown in a 25:75 mix of MEM:MD (MEM = control medium; MD = house medium) as determined by comparing cell growth parameters, cellular morphology and susceptibility to HgCl2 with those obtained from cells grown in MEM medium. A greater amount of MD in the mix 5:95 produced nuclear morphological changes, altered nucleus–cytoplasm relationship and did not support cell growth, which was possibly due to a toxic concentration of metals in the peptone and yeast extract and also to the low concentration of zinc in the yeast extract.Keywords: cell culture medium, cell adaptation, peptone, yeas extract.
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Agradecimientos
Este trabajo se efectuó con el apoyo financiero del CONACYT (beca de doctorado No. 170412 de G.E. Espinosa–Ayala), del CONACYT–SECTORIAL– SALUD 33B y de la UANL (PAYCIT–CA–83–04).
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