Martha Torres Rojas* Karen Bobadilla Lozoya*,
Eduardo Sada Díaz*
Papel de las células epiteliales en la respuesta inmune del pulmón
Immunological role of epithelial cells of the lung
Bruno Tonatiuh Rivas–Santiago*, Martha Torres Rojas* Karen Bobadilla Lozoya*,Eduardo Sada Díaz*
* Departamento de Investigación en Microbiología, INER. México, D.F.
]]> Departamento de Patología Experimental. Centro de Investigación y Estudios Avanzados del IPN. México D.F. Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM. México, D.F.
Correspondencia:
Dr. Eduardo Sada Díaz.
Departamento de Investigación en Microbiología.
Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias.
Calzada de Tlalpan Núm. 4502, colonia Sección XVI. México, DF., 14080.
Teléfono 5666–4539, extensión 117, fax 5666–6172.
e–mail:btrivas@iner.gob.mx eduardosadadiaz@yahoo.com
Trabajo recibido: 22–VI–2005
Aceptado: 03–X–2005
RESUMEN
El sistema respiratorio se encuentra en contacto con agentes patógenos; sin embargo, gracias a la respuesta inmune innata de éste, sólo en raras ocasiones se produce la enfermedad. Las células epiteliales del tracto respiratorio desempeñan un papel importante para evitar la colonización del pulmón por agentes infecciosos, identificando a los microorganismos a través de receptores especializados como los toll–like. Asimismo, son capaces de secretar citocinas, péptidos antimicrobianos y otras moléculas proinflamatorias, las cuales evitan el establecimiento de patógenos.
Palabras clave: Células epiteliales, péptidos antimicrobianos, defensinas, inmunidad innata.
ABSTRACT
The respiratory tract is one of the main systems which is in perennial contact with a wide variety of pathogenic microorganisms; however, infection is seldom produced due to its innate immune response. Respiratory tract epithelial cells play a very important role to avoid colonization of the lung by infectious agents, because they recognize microbial molecules through very specialized receptors, such as toll–like receptors; moreover, these cells posses a broad variety of molecules which are related to local immunity. Respiratory tract epithelial cells produce chemokines, antimicrobial peptides and other proinflammatory molecules that prevent the establishment of pathogenic microorganisms.
]]> Key words: Epithelial cells, antimicrobial peptides, defensins, innate immunity.
INTRODUCCIÓN
El pulmón es uno de los órganos que más contacto tiene con los microorganismos; inhala aproximadamente 10,000 litros de aire al día, por lo que está expuesto a una enorme cantidad de microorganismos que la mayoría de las veces son incapaces de colonizarlo debido a una respuesta inmune innata efectiva1, la cual, en el pulmón, está dada principalmente por barreras físicas, así como por células de defensa como los neutrófilos, macrófagos, células cebadas, basófilos, eosinófilos y células asesinas (NK).
Se pensaba que las células epiteliales sólo actuaban como barrera física y secretando moco y algunas enzimas. Recientemente se describió que las células epiteliales contribuyen activamente con el sistema inmune secretando varias moléculas relacionadas con la respuesta inmune, como las quimiocinas, citocinas y defensinas, entre otras2.
Objetivo. Resaltar el papel de las células epiteliales del tracto respiratorio en la inmunidad del pulmón.
RECONOCIMIENTO DE MOLÉCULAS PROPIAS DE PATÓGENOS POR LAS CÉLULAS EPITELIALES
Una vez que los microorganismos son inhalados establecen contacto, primeramente, con las células epiteliales; éstas, aparte de tener un papel estructural, tienen uno en la respuesta inmune primaria en contra de microorganismos, ya que pueden reconocer al microorganismo e iniciar una respuesta inmune. Se sabe que los microorganismos tienen moléculas propias, que pueden ser reconocidas por el sistema inmune, son llamadas moléculas asociadas a patógenos (PAM, por sus siglas en inglés), y reconocidos por receptores localizados sobre la membrana de las células huésped. Estos receptores son conocidos como receptores de reconocimiento de patógenos (PRR, por sus siglas en inglés), de los cuales podemos mencionar las lectinas de unión a mañosa (MBL), receptores tipo toll, CD14, entre otros3. No obstante que las células de defensa "clásicas", como los macrófagos, neutrófilos y células dendríticas tienen una gran cantidad y variabilidad de este tipo de receptores4, las células epiteliales del tracto respiratorio también poseen este tipo de receptores5,6. Los ligandos para este tipo de receptores son muy variados; pueden ser moléculas constituyentes de la membrana de bacterias u hongos o material genético de bacterias o virus7–13. A la fecha, se han reconocido varios PRR en la superficie de las células epiteliales de pulmón3–6. Los PRR se pueden presentar de manera soluble en secreciones o en la circulación; tal es el caso de MBL, o bien, este tipo de receptores pueden estar presentes en la superficie de la célula con una porción intracelular y una extracelular; dentro de esta clase, en las células epiteliales destacan los receptores parecidos a toll (toll–like receptors, [TLR]) que se han estudiado mucho a lo largo de los últimos diez años, habiendo identificado 13 TLR14. La unión de los TLR con su ligando (Figura 1) induce la activación de una gran variedad de genes en las células epiteliales que regulan la expresión de IL–6, TNF, receptores de quimiocinas y péptidos antimicrobianos4,6,7.
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Algunos componentes propios de la respuesta inmune pueden servir de ligandos para los TLR de las células epiteliales del tracto respiratorio, tal es el caso de la proteína surfactante tipo A (SP–A), la cual también es capaz de activar macrófagos alveolares vía TLR4 e inducir la producción de IL–8 en las células epiteliales15,16. Los péptidos antimicrobianos β–defensina–2 murina (mBD–2) y LL–37, son otro ejemplo claro de activación vía TLR. Este tipo de péptido antimicrobiano puede activar células dendríticas inmaduras vía TLR4, dando como resultado un aumento de moléculas coestimulatorias y la maduración de la célula dendrítica17,18.
RESPUESTA DE LAS CÉLULAS EPITELIALES DE TRACTO RESPIRATORIO A PATÓGENOS
Como se mencionó, las células epiteliales primero tienen que reconocer las moléculas propias del patógeno o moléculas mediadoras de inflamación y lo logran principalmente a través de receptores como los TLR y CD144,6,7. Existe una gran variedad de moléculas que pueden ser secretadas por las células epiteliales en respuesta a PAM (Tabla I), de las cuales podemos resaltar los péptidos antimicrobianos por su gran versatilidad. Los péptidos antimicrobianos tienen la capacidad de matar directamente al microorganismo, sirven como quimioatrayentes, opsonizan, son puente entre la inmunidad innata y la inmunidad adaptativa al inducir la maduración de células dendríticas inmaduras; además, participan en la reparación de tejido afectado, promoviendo la angiogénesis y proliferación celular19,20.
Las moléculas que tienen un efecto microbicida directo son principalmente los péptidos antimicrobianos, de bajo peso molecular (3–4.5 kD) y son principalmente catiónicos21–23; tienen un amplio espectro en contra de bacterias Gram positivas, Gram negativas, hongos y virus envueltos23,24. Los péptidos, por su carga positiva, son atraídos por la membrana del microorganismo que regularmente tiene carga negativa. La unión de los péptidos con la membrana ocasiona que se aglutinen formando poros en la membrana del microorganismo, llevando así a su lisis22–24 (Figura 2). Los péptidos antimicrobianos son sinérgicos con moléculas de defensa, tales como la lisosima y la lactoferrina24. De acuerdo con su estructura, existen varias clasificaciones de este tipo de péptidos antimicrobianos24; hay dos tipos muy importantes en el tracto respiratorio, las catelicidinas y las defensinas. Estos péptidos son producidos principalmente por las células epiteliales y por algunas células fagocíticas19,24,25; en su mayoría son inducibles, el estímulo puede ser por citocinas proinflamatorias como TNFα e IL–1, PAM u otro tipo de péptidos antimicrobianos como catelicidinas26,27, pero también existen aquellos que son sintetizados constitutivamente como es el caso de la β–defensina–1. Se ha observado que en algunas enfermedades de pulmón como fibrosis quística, neumonía infecciosa, bronquitis crónica, sarcoidosis y fibrosis pulmonar idiopática, los niveles de defensinas están claramente aumentados, lo que indica que son inducibles y están involucradas dentro de la inmunopatogénesis de varias enfermedades; tal es el caso de la neumonía causada por Pseudomonas aeruginosa donde se ha visto que se incrementa la cantidad de β–defensina–2 en el lavado bronquiolo alveolar; además, se observó que este tipo de bacteria es susceptible a la acción bactericida de este tipo de defensina26. En enfermos con fibrosis quística, la alta cantidad de NaCI en pulmón de estos pacientes inactiva las defensinas de éste debido a la carga del NaCI, misma que da lugar a una infección por Pseudomonas muy difícil de controlar; inclusive, cuando hay una gran cantidad de anticuerpos circulantes en contra de Pseudomonas aeruginosa, la neumonía progresa hasta sus últimas consecuencias al estar inactivas las defensinas28.
]]> El Mycobacterium tuberculosis (Mtb) puede invadir las células epiteliales de pulmón y quedar ahí de forma latente35,36; por otra parte, estudios recientes han demostrado que las células epiteliales son capaces de producir óxido nítrico en respuesta a esta invasión y eliminar la micobacteria37.
Nuestro grupo demostró que Mtb induce la expresión de β–defensina–2 en células epiteliales de pulmón y que este péptido mata a Mtb; también, ha demostrado que ratones que producen una mayor cantidad de β–defensina–3 murina, son menos susceptibles a desarrollar tuberculosis pulmonar progresiva, que los producidos en menor escala (datos no publicados). Los datos revelan que los péptidos antimicrobianos generados por las células epiteliales de pulmón colaboran en la respuesta inmune innata y tienen una actividad antimicrobiana directa hacia Mtb. En otros estudios se ha visto que ratones knock out para el gen β–defensina–1, sucumben a la infección de Haemophilus influenzae29. La sobreexpresión causada por transfección viral de la proteína antimicrobiana–18 relacionada con cetelina, la cual es el homólogo de LL–37, dio como resultado el aumento de la respuesta inmune innata mediada por péptidos antimicrobianos en neumonía y choque séptico, habiendo una gran diferencia significativa entre los animales no transfectados y los transfectados30,31. Otro experimento contundente para demostrar la importancia de los péptidos antimicrobianos secretados por las células epiteliales, fue donde se demostró que los portadores de Staphylococcus aureus en nariz tenían una pobre actividad antimicrobiana en los fluidos nasales32.
Las células epiteliales, además de producir defensinas y LL–37 que tienen actividad antimicrobiana directa, efecto quimiotáctico, sirven como puente entre la inmunidad innata y la adaptativa ya que tienen efecto quimiotáctico sobre células dendríticas inmaduras, promueven angiogénesisy proliferación para la cicatrización de tejido dañado; las células epiteliales también secretan citocinas, quimiocinas, proteínas surfactantes y algunos factores del complemento como C333,34.
CONCLUSIONES
En los últimos diez años se ha puesto mucho énfasis a la respuesta inmune innata en pulmón y, se ha llegado a la conclusión de que las células epiteliales del tracto respiratorio desempeñan un papel muy importante en este tipo de inmunidad, en algunos casos cruciales para la evolución o control de algunas enfermedades. Las células epiteliales cuentan con una amplia variedad de moléculas que colaboran en la respuesta inmune del hospedero; estas moléculas cuentan con actividad muy variada, desde ser antibióticos endógenos hasta un puente con la inmunidad adquirida. Se ha visto también que el sistema de reconocimiento de las células epiteliales es muy amplio y pueden reconocer una amplia gama de moléculas potencialmente dañinas para el hospedero. Asimismo, se ha empezado a estudiar más acerca del papel de las células epiteliales en las diferentes inmunopatogénesis de las enfermedades infecciosas; sin embargo, hace falta todavía mucho por explorar, por ejemplo, posibles polimorfismos existentes en genes de la repuesta inmune en las células epiteliales de pulmón y cómo estos polimorfismos pueden o no, hacer más susceptible a individuos hacia cierto tipo de enfermedades.
Actualmente, el estudio de la respuesta inmune innata en pulmón se basa en usar inmunomoduladores que actúan sobre el comportamiento inmunológico de este tipo de células con el fin de controlar cierto tipo de enfermedades; de la misma manera, se está usando el conocimiento sobre péptidos antimicrobianos para crear nuevos antibióticos y de esta forma hacer frente a la nueva generación de microorganismos resistentes a fármacos.
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