Introducción

Cryptosporidium spp. son parásitos protozoarios causantes de infecciones gastrointestinales en una amplia variedad de huéspedes vertebrados, incluidos animales domésticos y silvestres así como los humanos (^{Ramírez et al., 2004}; ^{Cacciò y Pozio, 2006}; ^{Ng et al., 2012}). En el ganado bovino se han reconocido al menos cuatro especies, que incluyen a C. parvum, C. andersoni, C. bovis y C. ryanae. La primera de ellas es la más frecuente en animales lactantes, mientras que las otras son más comunes en animales destetados y adultos (^{Lindsay et al., 2000}; ^{Fayer et al., 2005}, ²⁰⁰⁷, ²⁰⁰⁸). La criptosporidiosis es especialmente importante en animales lactantes menores de 30 días de edad, en quienes se manifiesta, por lo general, con diarrea abundante, fiebre, anorexia, pérdida de peso, desequilibrio electrolítico y, en ocasiones, con la muerte (^{Ramírez et al., 2004}; ^{Cacciò y Pozio, 2006}). El grupo de mayor riesgo para contraer la infección es el de los becerros de 8 a 14 días de edad (^{Castro-Hermida et al., 2002a}; ^{Santín et al., 2004}; ^{Feitosa et al., 2004}; ^{Trotz-Williams et al., 2005}), ya que al aumentar la edad de los animales, la prevalencia y la intensidad de la parasitosis tienden a disminuir (^{Castro-Hermida et al., 2002b}; ^{Ortolani y Soares, 2003}; ^{Starkey et al., 2006}; ^{Castro-Hermida et al., 2006}; ^{Bhat et al., 2013}). Sin embargo, la infección es poco común en animales menores de cuatro días (^{Uga et al., 2000}).

Los animales infectados con Cryptosporidium spp. pueden excretar por las heces un elevado número de ooquistes, los cuales se diseminarían fácilmente en el medio, de tal forma que diferentes factores de manejo han sido asociados a la infección por Cryptosporidium spp. Sería importante que estos factores se consideraran en programas de prevención de esta parasitosis, pues no se conocen tratamientos farmacológicos efectivos (^{Cacciò y Pozio, 2006}). Sin embargo, algunos de estos factores varían según la región y los sistemas de producción, mientras que otros pueden estar presentes en cualquier establo. Entre los factores que se citan con mayor frecuencia se encuentran la edad, áreas de partos múltiples, la escasa frecuencia de aseo en las instalaciones, el material o tipo de cama, el uso de agua contaminada para consumo del ganado, el sistema de producción tecnificado, los corrales con piso de arena y la época de lluvias, entre otros (^{Maldonado et al., 1998}; ^{De la Fuente et al., 1999}; ^{Mohammed et al., 1999}; ^{Castro-Hermida et al., 2002b}; ^{Trotz-Williams et al., 2007}; ^{Brook et al., 2008}; ^{Almeida et al., 2010}; ^{Muhid et al., 2011}; ^{Silverlås y Blanco-Penedo, 2013}; ^{Bhat et al., 2013}).

En México, se ha reportado la criptosporidiosis bovina en diversas regiones ganaderas (^{Maldonado et al., 1998}; ^{Castillo et al., 2009}; ^{Castelan-Hernández et al., 2011}; ^{Cano-Romero et al., 2011}), y aún quedan numerosos tópicos por investigar acerca de su epidemiología en los diferentes sistemas de producción.

El objetivo fue identificar la prevalencia y algunos factores de riesgo asociados a la infección por Cryptosporidium spp. en becerras lactantes mantenidas en confinamiento en tres establos lecheros de Aguascalientes, México.

Materiales y métodos

Encuesta

Para determinar los factores de riesgo hipotéticos asociados a la infección por Cryptosporidium spp., se usaron los datos obtenidos de una encuesta aplicada a los responsables de las áreas de crianza en los establos bajo estudio. Esta encuesta incluyó preguntas acerca de las características de manejo e instalaciones. Con los factores de riesgo hipotéticos se formaron 5 grupos, cada uno integrado con diferentes variables y sus respectivas categorías, los cuales se utilizaron como base para el análisis de riesgos (Cuadro 1).

Cuadro 1 Prevalencia de la infección por Cryptosporidium spp. para las diferentes categorías en cada variable y grupo de características bajo estudio. 

Resultados y discusión

La prevalencia general a la infección por Cryptosporidium spp. en la población bajo estudio fue de 40% (669/1658). El Cuadro 1 muestra la prevalencia para cada categoría con las diferentes variables.

El análisis de riesgos permitió identificar 5 variables como factores de riesgo a la infección por Cryptosporidium spp. La variable "edad de las becerras" fue la más importante, en especial en el grupo de 8 a 14 días de nacidas (OR = 15.2; 95% CI 11.2 - 20.6; p < 0.000), seguido por el grupo de becerras de 15 a 21 días de edad (OR = 2.5; 95% CI 1.9 - 3.2, p < 0.000). Las otras variables identificadas como factores de riesgo fueron: la persona que atiende el nacimiento de la cría, el nivel de inmunoglobulinas, el tipo e higiene de la cama o piso del alojamiento y el tipo de recipiente para tomar leche o sustituto de leche. En el Cuadro 2 se observan las categorías identificadas como factores de riesgo. Ninguna de las variables relacionadas con la operación y administración de los establos mostró ser factor de riesgo. En la variable "persona que atiende el nacimiento de la cría", al técnico de guardia se le reconoció como un factor de protección (OR = 0.73; 95% CI 0.5828 - 9237, p < 0.008).

Cuadro 2 Factores de riesgo a la infección por Cryptosporidium spp. identificados en tres establos lecheros de Aguascalientes, México. 

En este estudio, la prevalencia general de la infección por Cryptosporidium spp. en becerras lactantes (< 28 días de edad) fue de 40%, mientras que en una investigación desarrollada en el mismo Estado, que incluyó animales de 8 a 14 días de edad, se encontró 75% de prevalencia (^{Castillo et al., 2009}). La amplia presencia del parásito en los establos lecheros de Aguascalientes es evidente. Una situación parecida se ha observado en la región central de México (Hidalgo, Jalisco y Estado de México), así como en el estado de Veracruz, en donde otros autores han reportado prevalencias generales de 25, 35.7 y 73.6%, respectivamente, y encontraron animales positivos en al menos 90% de las unidades de producción estudiadas (^{Maldonado et al., 1998}; ^{Castelan-Hernández et al., 2011}; ^{Cano-Romero et al., 2011}). Sin embargo, en México las implicaciones en (^{Valenzuela et al., 2014}).

Diversas investigaciones sobre la prevalencia de la criptosporidiosis en becerras lactantes se han desarrollado en regiones ganaderas de otros países, donde se han utilizado diferentes técnicas de diagnóstico, con resultados muy variados, cuyo rango de prevalencia varía entre el 17% y el 47.9% (^{Lefay et al., 2000}; ^{Castro-Hermida et al., 2002a Joachim et al., 2003}; ^{Ortolani y Soares, 2003}; ^{Santín et al., 2004}; ^{Kváč et al., 2006}; ^{Brook et al., 2008}; ^{Bhat et al., 2013}), lo cual denota la amplia distribución geográfica y elevada frecuencia de este parásito.

La infección por Cryptosporidium spp. en el ganado lechero es más frecuente y de mayor importancia en las becerras lactantes; además, la magnitud de la enfermedad se ve influida por diversos factores como la edad y el estado inmunológico de las becerras, así como por el clima y otros factores relacionados con el manejo durante la crianza. Por consiguiente, la epidemiología de esta parasitosis muestra características particulares en cada unidad y sistema de producción (^{Fayer et al., 2000}).

Las becerras del grupo de 8 a 14 días de edad tuvieron una prevalencia de 81%, la más alta de los cuatro grupos aquí tratados. Este resultado es similar al reportado previamente en Aguascalientes, en el que el mismo grupo de edad tuvo 75% de tasa de infección (^{Castillo et al., 2009}). En los otros 3 grupos, la prevalencia del parásito estuvo en un rango de 21 a 40%. En México, se ha encontrado una mayor prevalencia en becerras menores de 4 meses de edad (^{Cano-Romero et al, 2011}; ^{Castelan-Hernández et al., 2011}). Y se observa una mayor excreción de ooquistes entre los días 15 y 19 después del nacimiento (^{Maldonado et al., 1998}). Así, la prevalencia en becerras lactantes de acuerdo a la edad es variable; sin embargo, el grupo más afectado es el de los 8 a 15 días de edad (^{De la Fuente et al., 1999}; ^{Ortolani y Soares 2003}; ^{Santín et al., 2004}, ²⁰⁰⁸; ^{Feitosa et al., 2004}; ^{Avendaño et al., 2010}). Esto coincide con el hecho de que en este estudio, el grupo de 8 a 14 días de edad se identificó como el mayor importancia respecto al factor de riesgo por infección de Cryptosporidium spp. (OR = 15.2), seguido por el de 15 a 21 días de edad (OR = 2.5). Otros autores han encontrado resultados similares (^{Maldonado et al., 1998}; ^{De la Fuente et al., 1999}; ^{Santín et al., 2004}; ^{Trotz-Williams et al., 2007}; ^{Brook et al., 2008}), lo que indica que el rango de edad de 8 a 21 días es el de mayor riesgo a la infección y a la excreción de ooquistes del parásito; al incrementarse la edad disminuye el riesgo (^{Maldonado et al, 1998}; ^{Santín et al., 2004}, ²⁰⁰⁸), como también se observa en este análisis.

Entonces, se infiere que la contaminación por Cryptosporidium spp. se realiza después de que las becerras entran en contacto con otros animales, con el alimento iniciador y con el agua para beber. Como señalan ^{Maldonado et al. (1998)}, el alimento iniciador, que roedores o aves contaminan, actúa como fómite y lo convierte en factor de riesgo; asimismo, el agua para beber se ha identificado como un riesgo debido a la contaminación de los ductos del líquido (^{Sischo et al., 2000}) o del recipiente de bebida (^{Almeida et al., 2010}). La edad debe considerarse como un indicador de riesgo por tratarse de un rasgo individual (^{Silva Ayçaguer, 2005}).

La variable "persona que atiende los nacimientos de las crías" se registra como factor de riesgo cuando el velador o el trabajador del área de recría atiende los nacimientos. En los casos donde el técnico de guardia (OR = 0.73) se encarga de los partos, esta variable no es un factor de riesgo y contribuye con la protección, porque el trabajo principal del técnico de guardia es precisamente la atención de los nacimientos por las noches y días festivos. De igual forma, cuando en las mismas condiciones, el trabajador del área o el personal de vigilancia se ocupa de los partos, se deduce que la atención no es la adecuada, ya que, además de atender un nacimiento, se les asignan otras actividades. En la literatura no se encontró información sobre este tópico.

En cuanto al tipo e higiene de la cama y del piso del alojamiento: la cama de aserrín, que se cambia cada 5 días, se determinó como factor de riesgo (OR = 1.80), debido a las características físicas del material, pues en él se acumula humedad y excremento, lo que constituye un medio ideal para que los ooquistes del parásito sobrevivan y contaminen el material. En contraste, ^{Maldonado et al. (1998)} y ^{Mohammed et al. (1999)} no encontraron relación significativa entre la parasitosis y la cama de desechos de madera. En este contexto, parece ser que independientemente del tipo de cama, influye más la frecuencia de aseo, puesto que dejar por grandes espacios de tiempo las heces, favorece el desarrollo del parásito y las posibilidades de que la becerra o sus alimentos tengan contacto con el material contaminado. De igual forma, los alojamientos con suelo de rejilla y corrales con cama de arena también se han mostrado como factores de riesgo (^{Muhid et al., 2011}). En ambos casos, la presencia de desechos de materia fecal, como ocurrió en esta exploración, representan una fuente de contaminación de ooquistes.

Con referencia al tipo de recipiente utilizado para suministrar a las becerras leche o sustituto de leche, se encontró que el material plástico es un factor de riesgo (OR = 1.4), lo que más bien podría estar relacionado con su lavado deficiente, porque el material plástico se puede salpicar con heces diarreicas probablemente contaminadas con el parásito y entonces las becerras se infectarán al lamer los recipientes. Esto es factible, pues aunque los alojamientos para becerras en los establos de estudio son individuales, no ofrecen un total aislamiento, por lo que las becerras pueden lamer los recipientes de los alojamientos vecinos en cualquier momento. A este respecto, ^{Almeida et al. (2010)} reportan una asociación significativa entre la bandeja de suministro de agua y el riesgo a la infección por C. parvum; los investigadores mencionan que, cuando el líquido se contamina con materia fecal se convierte en un importante reservorio de los ooquistes del protozoario. Sin embargo, ^{Maldonado et al. (1998)} argumentaron que ningún tipo de recipiente o biberón son riesgo de infección por Cryptosporidium.

La prevalencia a la infección fue más alta en animales que se vacunaron contra enfermedades diarreicas. ^{Trotz-Williams et al. (2008)} encontraron un resultado similar tanto en vacas como en becerras que habían recibido tal profilaxis. De esta forma, la vacunación se percibe como un factor de riesgo para la infección por Cryptosporidum. Sin embargo, ^{Trotz-Williams et al. (2008)} argumentan que la vacunación no es un factor de riesgo porque las vacunas comercializadas para prevenir la diarrea en las becerras, y que no son efectivas contra la infección por Cryptosporidium, no tienen un efecto conocido en el riesgo de criptosporidiosis. La vacunación es, más bien, una medida adoptada en respuesta a una alta frecuencia de diarreas en las becerras.

El análisis del nivel de inmunoglobulinas como factor de riesgo se realizó fuera del modelo general, debido a que la prueba se desarrolló sólo en becerras de 1 a 7 días de edad. De esas becerras, 61.7% presentó un nivel insuficiente de inmunoglobulinas, por lo que esto se consideró un factor de riesgo (OR = 1.85). No fue posible establecer la relación entre el nivel de inmunoglobulinas de las becerras y el número de parto de la madre, a pesar de que existen evidencias de que el número de partos influye en la concentración de inmunoglobulina G en el calostro (^{Kehoe et al., 2011}). ^{Trotz et al. (2007)} evaluaron el nivel de inmunoglobulinas en becerras lactantes y encontraron valores de proteínas en el suero menores de 5.2 g/dL, los cuales se relacionaron significativamente con la infección por Cryptosporidium spp. Es bien sabido que los recién nacidos necesitan ingerir calostro antes de transcurridas seis horas para garantizar la absorción intestinal de las inmunoglobulinas; además, cantidades séricas de anticuerpos menores a 10 mg/mL pueden causar hasta 60% de mortalidad por infecciones gastrointestinales (^{Weaver et al., 2000}).

Aparentemente, los resultados de este estudio sugieren que en las becerras examinadas, el proceso de alimentación con calostro careció de efectividad para protegerlas contra la infección por Cryptosporidium spp. La información obtenida de los establos indicaba que las crías consumían 4 L o más de calostro, pero ninguno de ellos mostró datos que probaran que la primera toma de calostro ocurría dentro de las primeras seis horas después del nacimiento. Por lo tanto, se infirieron deficiencias en el proceso de alimentación posnatal, lo que explicaría la inefectividad de la alimentación con calostro para proteger a las becerras de la infección por Cryptosporidium spp.

Finalmente, es preciso señalar que, a pesar de estos hallazgos, este estudio se llevó a cabo únicamente en 3 establos; por lo tanto, estos resultados no pueden generalizarse a otros establos de México.

Conclusiones

En este estudio la edad de las becerras se identificó como un factor de riesgo para adquirir la infección por Cryptosporidium spp.: la infección se asoció al grupo de edad de entre 8 y 14 días.

Debe haber personal exclusivamente dedicado a la atención de los nacimientos y el cuidado de las becerras durante el parto y la crianza, de manera que se tenga un mejor control sobre la óptima alimentación con calostro. Esto podría asegurar un adecuado nivel de inmunoglobulinas, que protegería a las becerras de la infección por el parásito y otras enfermedades.

Los resultados obtenidos sugieren extremar la limpieza de los alojamientos individuales, en especial cuando se utilice cama de aserrín; se deberá retirar cualquier resto de excremento y humedad constantemente para evitar la proliferación del parásito. También los recipientes para beber leche o sustituto de leche se habrán de lavar muy bien para prevenir el riesgo a la infección, pues parece más importante la forma y frecuencia del aseo en las instalaciones y equipo que los materiales utilizados.