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INTRODUCCIÓN
El cultivo del tomate (Solanum lycopersicum L), es una de las hortalizas más importantes en el mundo. Ocupa el segundo lugar en importancia en México en participación del valor de la producción nacional de hortalizas, con una producción de 2 875 164.08 t, destacando como principal productor el etado de Sinaloa con 867 832.04 t (SAGARPA-SIAP 2016).
Meloidogyne incógnita (Kofoid y White) Chitwood es uno de los patógenos más importantes en el tomate, el cual afecta la producción mundial, oca sionando pérdidas entre 28 y 68% al año (Nicol et al 2011, Jones et al. 2013). El cual es un endoparásito sedentario de penetración total, que presenta una amplia distribución geográfica (Castro et al. 2011), característica debida a su capacidad de soportar condiciones adversas; lo que incrementa de forma rápida sus poblaciones (Cepeda 2016). Este fitonematodo, penetra la raíz desde el suelo, succionando el contenido celular, donde inyecta hormonas que desequilibran el desarrollo y la reproducción celular, causando hipertrofia e hiperplasia que dan origen a los síntomas típicos, como la presencia de agallas o nodulos que indican el síntoma visible de la infección primaria (Cepeda 2016). La infección del nematodo, se manifiesta en la planta como síntoma de deficiencia de agua, debido al daño en la raíz; la cual se pudre debido a la acción de microorganismos saprofitos; lo que se traduce en un menor desarrollo de la planta y aparición de síntomas como enanismo, clorosis, marchitez, falta de vigor, caída de flor y bajo rendimiento (Abad et al. 2009).
Para el manejo de nematodos, se han utilizado métodos físicos, culturales, químicos y una combinación de ellos. No obstante, el control químico es el método más utilizado, por su eficacia (Lamovsek et al. 2013). Particularmente el control del nematodo agallador con nematicidas químicos, ha sido mediante la aplicación al suelo, de fumigantes y no fumigantes de amplio espectro y fitotoxicidad (Giannakou y Karpouzas 2003). El empleo de nematicidas convencionales, ha sido restringido por los efectos nocivos al ambiente y a la salud humana (Huang et al. 2014). Además el costo, la residualidad y la fitotoxicidad de los nematicidas para el cultivo, limitan su aplicación; por lo que es se requiere buscar alternativas ecológicas para com batir a los nematodos fitopatógenos (Collange et al. 2011, Hernández et al. 2015).
Las plantas son capaces de protegerse de las plagas por sí mismas, debido a que sintetizan una gran variedad de metabolitos secundarios relacionados con mecanismos de defensa, con propiedades insecticidas, acaricidas y nematicidas (Sosa y Tonn 2008). Estas substancias comprenden más de 30 000 compuestos diferentes, como los triterpenos, saponinas, fitoesteroles y/o sus precursores, que al ser liberados influyen en la presencia de los nematodos alrededor de la planta (Montes-Belmont y Flores-Moctezuma 2011). Por lo que se reconocen diversas plantas con actividad nematicida (Quevedo et al. 2010), como el nogal pecanero (Carya illinoinensis (Wangenh) K. Koch), para el control de M. incógnita (Garrido et al. 2014). En el nogal se encuentran sustancias fitoquímicas, en las hojas como las naftoquinonas, taninos, inositol, derivados flavonoides, ácidos fenol carboxílicos y ácido ascór-ico; en el pericarpio de los frutos se encuentran ácidos orgánicos, taninos y naftoquinonas; en los cotiledones ácidos grasos insaturados; en el tegumento, polifenoles y taninos, y en la nuez, vitaminas A, B, C y E, sales minerales y yodo (Caglarirmak 2003).
El control biorracional con extractos vegetales es una alternativa prometedora, que permite el desarrollo de una agricultura más rentable y no contaminante del ambiente (Molina 2001). Por lo anterior, el objetivo del estudio fue evaluar la actividad toxica de extractos de nogal pecanero (C. illinoinensis), sobre el nematodo agallador M. incógnita en plantas de tomate, en condiciones de invernadero.
MATERIALES Y MÉTODOS
La investigación se realizó en el Laboratorio de Nematología y en el área de invernaderos del Departamento de Parasitología de la Universidad Autónoma Agraria Antonio Narro (UAAAN). Se ubica en Saltillo, Coahuila de Zaragoza, México a 25° 22" LN y 101° 02" LO, a una altitud de 1742 msnm.
Los extractos vegetales de cáscara acuosa y ruezno etanólico de nogal pecanero fueron propor cionados por la empresa Fitokimica Industrial de México. A partir de nodulos característicos de M. incógnita obtenidos de tubérculos de papas de la variedad Alpha, cosechadas en la región de Navi dad, Galeana, Nuevo León, México; se obtuvieron hembras y masas de huevos. Las masas de huevos se desinfectaron con hipoclorito de sodio al 1% por 1 min y se lavaron tres veces con agua destilada estéril, para luego pasar las masas de huevos a una cámara bioclimática a temperatura de 25 °C, hasta la eclosión del 95% de los huevos y emergencia de los juveniles de segundo estadio. De estos juveniles, se seleccionaron 2 800 individuos, que se separaron en grupos de 100 en una placa de 28 cavidades. En las hembras adultas se realizaron cortes perineales, siguiendo la técnica de Taylor y Netscher (1974) para corroborar la especie, utilizando las claves taxonómicas de Eisenback et al. (1981).
Se sembró semilla certificada de tomate variedad Pony Express Fl, en sustrato estéril de Peat moss-perlita, en proporción 3:1 e hidratado con agua destilada. A los 51 d después de la siembra, en plántulas con altura promedio de 10.6 cm, se realizó el trasplante a vasos de poliestireno con 100 g Peat moss-perlita (3:1) como sustrato; para luego con una micropipeta inocular 100 juveniles de M. incógnita (población inicial, Pi). En el invernadero, los vasos de poliestireno se distribuyeron al azar en una cama alta de cultivo de 3 x 1 m de largo y ancho x 0.80 m de altura, con distancia entre vasos de 10 cm. A los 10 d después del trasplante, con apoyo de una micropipeta se aplicó lmL del tratamiento al sustrato (Tabla 1), estableciéndose siete tratamientos con cuatro repeticiones, bajo un diseño en bloques completos al azar. La unidad experimental se formó por una planta de tomate. El experimento se realizó bajo condiciones controladas a temperatura de 24 ± 2 °C, humedad relativa de 60 ± 10% y ventilación automatizada para reducir el calor y renovar el suministro de bióxido de car bono. Los riegos se realizaron cada tercer día con base en los requerimientos de la planta. También se realizó una aplicación de fertilizante foliar Ferti-PLUS+, a dosis de 2 L ha-1, a los 15 d después del transplante con una bomba de mano de 2 L.
Tabla 1 Extractos de Carya illinoinensis para evaluar la toxicidad contra Meloidogyne incógnita en plántulas de tomate en invernadero
Concentración 1:50=1.0 ml_ de extracto en 50 ml_ de agua destilada, Concentración 1:75=1.0 ml_ de extracto en 75 ml_ de agua destilada.
La evaluación de la actividad nematicida de los extractos se llevó a cabo a los 30 d después de establecido el ensayo, que corresponde a un ciclo biológico normal de M. incógnita, mediante la valoración de la densidad de población de juveniles de segunda generación, se realizó el conteo de la población final (Pf). Para lo cual se recuperó el sustrato de las plantas infectadas con nematodos y se colocó en embudo de Baerman, a las 48 h después de colocar el sustrato en el embudo, se procedió a realizar el conteo de la población final de nematodos juveniles de segundo estadio (vivos) y se obtuvo la reducción poblacional mediante la diferencia entre la población inicial al inicio del experimento (100 juveniles) y población final con la fórmula de Sein-horst (1970): 1= Pf/Pi. Dónde: I, es el índice de incremento de la población, Pf es la población final y Pi es la población inicial.
La eficiencia de los tratamientos se determinó con la fórmula de Henderson-Tilton (1955): E= (1-Pfa/Pia x Pib/Pfb) x 100. Dónde: E es la eficiencia de los tratamientos, Pia es la población inicial del tratamiento, Pfa es la población final del tratamiento, Pib es la población inicial del tratamiento testigo y Pfb es la población final del tratamiento testigo. La reducción de la población se analizó con análisis de varianza y la comparación de medias se realizó con la prueba de Tukey (p < 0.05), los análisis se realizaron con el software estadístico SAS 9.0.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Reducción de la población del nematodo agallador
La aplicación de extractos de nogal pecanero tuvo efecto significativo (p < 0.05) en el control del nematodo agallador M. incógnita, presentando mayor disminución de la población de nematodos el extracto de ruezno acuoso con 99 y 97% de control en las concentraciones 1:50 y 1:75, respectivamente; no permitiendo este extracto que la densidad de población se incrementará, de 0.01 a 0.03 veces la población inicial. En efectividad de control le siguió el extracto de ruezno etanólico, con un índice de incremento de la población de 0.127 y 0.290 veces la población inicial en las concentraciones 1:50 y 1:75, respectivamente (Tabla 2). Lo que indica que el tratamiento redujo la población de nematodos en 87.25 y 71.00%, mientras que el extracto de cáscara acuosa presentó menor control de nematodos, con incremento de la población inicial de 0.420 veces en la concentración 1:50 y reducción de la población del 58%, mientras que la concentración 1:75 tuvo un incremento de la población inicial de 0.705 veces, lo que indica una reducción de 29.5% de la población de M. incógnita. Para el tratamiento testigo, sin control nematicida, se observó un incremento de la población de nematodos de 2.652 veces, permitiendo a la población aumentar 165.25 nematodos más que la población inicial (gl=6, 27; F=69.44, p < 0.0001). Estos resultados son similares a los reportados por Dama (2002), quien tuvo un 100% de mortalidad de la población de Meloidogyne javanica in vitro con el compuesto orgánico naftalina, que se extrae del nogal. También concuerdan con lo encontrado por Garrido et al. (2014), quienes evaluaron bajo condiciones de laboratorio el control de M. incógnita con extractos de nogal pecanero, reportando mayor actividad nematicida con el 89% de mortalidad el extracto de ruezno acuoso.
Eficiencia de los tratamientos
La eficiencia de los tratamientos (Tabla 2), muestra que los extractos de nogal pecanero tienen una alta eficiencia en el control de M. incógnita, fluctuando entre el 73.42% en el extracto de cás cara acuosa en concentración 1:75, del 84.16% en el extracto con cáscara acuosa en concentración 1:50, 89.07% en el extracto de ruezno etanólico en concentración de 1:75. En tanto que en el ruezno etanólico en concentración 1:50 se tuvo una eficien cia del 95.19%, los extractos de ruezno acuoso con la mayor eficiencia de control con el 99.62 y 98.87% se tuvo en las concentraciones 1:50 y 1:75 respec tivamente. Los resultados indican que los extrac tos a base de nogal pecanero, presentan caracterís ticas nematicidas sobre M. incógnita, con eficien cia variable en el control del nematodo, mostrando mayor efectividad el extracto acuoso de ruezno, lo que es consistente con lo reportado por Vinueza et al. (2006) quienes reportan efectividad de extrac tos acuosos de distintas plantas sobre juveniles de Meloidogyne spp.
El extracto de nogal pecanero tuvo una respuesta favorable en el control del nematodo agallador M. incógnita en las concentraciones evaluadas, reduciendo la densidad de población en las raíces de tomate. Este control con extractos vegetales puede ser utilizado en cualquier sistema de producción agrícola, por sus características orgánicas e inocuidad con el ambiente. El extracto de ruezno acuoso y ruezno etanólico presentan alta efectividad de control sobre M. incógnita, los cuales reúnen condiciones para ser utilizados en su control.
