Materiales y métodos

Sitio de estudio y colecta de semillas. Las especies de Mimosa seleccionadas se distribuyen en el Valle de Tehuacán-Cuicatlán, Puebla-Oaxaca, México (17 ° 20 ′- 18 ° 53 ′ N y 96 ° 55 ′- 97 ° 44 ′ W), en donde predomina un clima semiárido con una temperatura promedio de 21 °C y una precipitación anual que varía de 400 a 600 mm con una estación seca que se extiende de noviembre a abril y, aproximadamente, el 74 % de la lluvia ocurre entre mayo y octubre (^{Valiente-Banuet 1991}). Los suelos predominantes en las áreas donde ocurren estas especies se clasifican como Leptosols y Calcisols (^{WRB 2014}).

Dentro del Valle se establecieron cinco sitios de muestreo en donde se localizaron las especies de Mimosa (Figura 1) y, en la temporada de máxima fructificación (octubre del 2013), se recolectaron sólo los frutos maduros de siete individuos por especie, abarcando el área total de la copa de la planta. Las semillas fueron extraídas inmediatamente y se seleccionaron únicamente las sanas. Todas las semillas de la misma especie fueron mezcladas para obtener una muestra compuesta que representara la variabilidad de cada especie. Las semillas se almacenaron en contenedores de plástico bajo condiciones ambientales de temperatura y humedad de la Ciudad de México (20 °C y 50-60 % de humedad relativa). Los ejemplares botánicos de respaldo están depositados en el Herbario Metropolitano (UAMIZ, el acrónimo del herbario de acuerdo con Thiers 2020), de la Universidad Autónoma Metropolitana, Unidad Iztapalapa.

Figura 1 Sitios de colecta de semillas y localización altitudinal de ocho especies de Mimosa en el Valle de Tehuacán-Cuicatlán, Puebla-Oaxaca, México. 

Caracterización de semillas y tratamientos previos a la siembra. Se seleccionaron 100 semillas por especie, con la finalidad de considerar el ámbito de variación morfológica. Se determinó el tamaño de la semilla registrando la longitud, ancho y grosor con un calibrador Vernier Digital (Absolute Digimatic, CD-6” CS) (Tabla 1). Una vez caracterizadas las semillas, éstas fueron desinfectadas, lavándolas con detergente comercial (3 g en 100 mL de agua) e hipoclorito de sodio al 5 % durante 3 minutos (^{Camargo-Ricalde & Grether 1998}).

Diseño experimental. En marzo del 2014, las semillas se germinaron en semilleros con Peat moss (Sphagnum) comercial estéril como sustrato. Cuando la protófila se expandió, se eligieron al azar, 18 plántulas por especie (144 plántulas en total). Cada plántula se trasplantó en un tubo constituido de policloruro de vinilo (PVC) con capacidad de 3.5 kg. De las 144 plántulas, 72 fueron trasplantadas en arena sílica pura y esterilizada en autoclave (120 °C; 1.4 kg cm^-2; 3 h^-1) como grupo control, y otras 72 plántulas en suelo que se usó como inóculo con raíces, esporas de HMA y propágulos bacterianos, ya que en estudios previos se ha demostrado la presencia de HMA y bacterias fijadoras de N₂ en los suelos de IR de Mimosa (^{Camargo-Ricalde & Dhillion 2003}, ^{Camargo-Ricalde & Esperón-Rodríguez 2005}, ^{Camargo-Ricalde et al. 2010a}).

El inóculo utilizado se recolectó de los primeros 15 cm del perfil del suelo en dos islas de recursos (IR) por especie de Mimosa. El inóculo se mezcló para formar un sustrato compuesto, con la finalidad de que las especies se enfrentaran a la misma condición de fertilidad edáfica, comunidad micorrízica y microbiana. Asimismo, para facilitar la aireación y el drenaje del sustrato, el inóculo se mezcló con arena sílica pura (10:1 v/v), la cual fue esterilizada en autoclave (120 °C; 1.4 kg cm⁻²; 3 h). Así, el diseño experimental fue factorial 8 × 2, y consistió en 8 especies de Mimosa y 2 tratamientos (con inóculo y sin inóculo -control-), con nueve réplicas por tratamiento/especie.

Crecimiento en condiciones de invernadero. Las plántulas crecieron en un invernadero bajo las siguientes condiciones: temperatura fluctuante entre 22 y 39 ºC (22 / 39 ºC noche/día) y humedad relativa entre 40 y 60 %. Las plántulas se regaron cada tercer día con agua destilada y cada 20 días con solución Long-Ashton al 5 %, ya que tiene bajo contenido de fósforo, el cual no inhibe la micorrización arbuscular (^{Hewitt 1966}) y también para hacer comparable el experimento con otros estudios previos. Esta solución nutritiva sirvió también para enmendar los requerimientos nutricionales de las plántulas en particular en el tratamiento control.

El experimento inició en marzo y finalizó en octubre del 2014, tuvo una duración de siete meses con una sola cosecha final realizada a los 215 días de edad. Al término del experimento, se cosecharon los individuos de cada especie; fueron medidos en altura del tallo (parte aérea) y en longitud de la raíz con una cinta métrica graduada, y se registró el número de pinnas por hoja. Asimismo, se determinó el área foliar total de cada individuo con un medidor de área foliar Delta-T Image Analysis System (DIAS II Cambridge CB5 OEJ, England).

Finalmente, en cada individuo por especie, se separaron las hojas, el tallo y la raíz, y se secaron en un horno (Ríos Rocha, S.A., Model EC-33) a 60 ºC hasta alcanzar un peso seco constante. Cabe señalar que las raíces fueron previamente examinadas en fresco para obtención de los nódulos. Con el peso seco, se estimó la biomasa seca estos para cada especie; además, se calculó la proporción raíz:tallo, que expresa la relación entre la biomasa seca asignada a la raíz y la biomasa seca asignada a la parte aérea (tallo más hojas) y que se utiliza como un índice de la asignación de recursos en la planta. También, se calculó el área foliar específica (AFe) que expresa la relación área:peso seco de la hoja, como el área foliar dividida entre el peso seco foliar total por planta. Por otra parte, se estimó el contenido de agua del tallo, con base en el peso fresco y peso seco del tallo y dividiendo el contenido de agua entre la masa seca del tallo. Los parámetros seleccionados se han utilizado como rasgos suaves para evaluar la diferenciación morfológica y fisiológica a nivel de plántula en especies características de bosques secos, entre éstas, varias leguminosas (^{Pineda-García et al. 2011}, ^{Roscher et al. 2015}).

Evaluación de la colonización micorrízica arbuscular y nódulos. Las raíces de cada individuo fueron examinadas visualmente, localizando los nódulos formados para, posteriormente, desprenderlos y fijarlos en lactoglicerol. Se contó el número de nódulos totales por cada raíz sin diferenciarlos en activos o inactivos, y este parámetro se utilizó como un índice de nodulación.

Las raíces finas fueron rehidratadas y aclaradas con KOH al 10 % por 48 h a temperatura ambiente, se eliminó el KOH y se enjuagaron las raíces con agua; posteriormente, se cubrieron con una solución de peróxido de hidrógeno al 10 % durante 20 min, seguido de un lavado con agua destilada. Después, las raíces fueron lavadas con HCl al 10 % por 15 min para neutralizar el KOH y acidificar el medio para teñir las estructuras de los HMA con azul de tripano (0.05 %) en lactoglicerol (ácido láctico + glicerol + agua) en proporciones 1:1:1 v/v/v (^{Phillips & Hayman 1970}). Con las raíces teñidas, se elaboraron preparaciones permanentes con alcohol polivinílico en lactoglicerol (PVLG). Las preparaciones contenían 20 segmentos de raíces de aproximadamente dos centímetros de longitud, donde se evaluó el porcentaje de colonización de los hongos a través de la cuantificación de hifas cenocíticas, ovillos, arbúsculos y vesículas características de los HMA (^{Hernández-Cuevas & García-Sánchez 2008}), las cuales fueron observadas en un microscopio de luz Olympus BX41 (Tokyo, Japón) y reportadas como colonización micorrízica arbuscular total.

Análisis estadísticos. Los datos fueron analizados con varios ANOVA de dos vías. Un análisis por parámetro evaluado, en donde los factores fueron la especie y el tratamiento, con una n = 9. En todos los casos, los datos cumplieron con los supuestos de normalidad y homogeneidad de varianzas. Cuando alguno de los factores fue significativo, una prueba Tukey (HDS) se utilizó para comparar los promedios. La relación entre la micorrización arbuscular, la formación de nódulos bacterianos y los parámetros de crecimiento, se examinó mediante un análisis de correlación de Pearson (^{Sokal & Rohlf 1995}). Además, con el fin de examinar la variación de las respuestas de las especies y seleccionar grupos de especies de Mimosa con estrategias funcionales similares, se llevó a cabo un análisis de escalamiento multidimensional no métrico (NMDS por sus siglas en inglés), basado en todo el conjunto de datos para todas las especies, seguido de un ANOSIM para validar los grupos. Datos redundantes fueron eliminados y aquellos con magnitudes extremas fueron estandarizados para evitar su sobre representación. En datos con gradientes diferentes de varianza, como en este caso, el NMDS utiliza toda la varianza del conjunto de datos para construir el biplot (^{Legendre & Legendre 2012}). Los análisis se realizaron en el programa Statistica 6.1® y en todos los casos una p ≤ 0.05 fue considerada como significativa.

Resultados

Las ocho especies de Mimosa examinadas son epígeas, fanerocotilares y germinaron entre el primer y segundo día después de la siembra; asimismo, la protófila surgió entre los días 27 y 28 después de la germinación y la metáfila 10 días después de la protófila. El crecimiento difirió entre las ocho especies y los parámetros para evaluarlo fueron influenciados por el tratamiento (con inóculo vs. sin inóculo). Cabe señalar que sólo la proporción raíz:tallo, el área foliar y el número de nódulos presentaron interacción significativa entre los factores especie y tratamiento (Tabla 2).

Las plantas de las ocho especies que crecieron con inóculo incrementaron, en promedio, 3.2 veces más la altura de sus tallos y 2.6 veces la longitud de sus raíces, con respecto a las crecidas en suelo sin inóculo. Mimosa adenantheroides, M. purpusii y M. texana var. filipes tuvieron tallos más altos que las otras cinco especies. En contraste, la altura del tallo de las plantas crecidas sin inóculo fue mayor en M. texana var. filipes, intermedia en M. adenantheroides, M. biuncifera y M. purpusii, y menor en M. calcicola, M. lacerata, M. luisana y M. polyantha (Figura 2A y B).

Figura 2 Variación de la altura del tallo (A) y longitud de la raíz (B) de plantas de ocho especies de Mimosa creciendo con inóculo (gris) y sin inóculo (blanco) de suelo de islas de recursos en condiciones de invernadero. Letras distintas indican diferencias estadísticas significativas, las mayúsculas entre especies y las minúsculas entre las inoculadas y el control. 

Respecto a la longitud de la raíz, también se detectaron diferencias significativas entre las plantas crecidas con y sin inóculo. En el caso de las inoculadas se observó que M. adenantheroides y M. texana var. filipes registraron las mayores longitudes de raíz, M. lacerata las menores y las otras cinco especies desarrollaron raíces con longitudes intermedias; por el contrario, la longitud de la raíz fue similar entre las especies del tratamiento sin inóculo, excepto en M. lacerata que registró la menor longitud de raíz (Figura 2B).

Por otro lado, los resultados muestran que el número de pinnas por hoja, así como el área foliar total y la específica, también, variaron dependiendo de la especie y del tratamiento. En el caso de las plantas que provenían del inóculo, se observó que Mimosa biuncifera, M. lacerata, M. luisana, M. purpusii y M. texana var. filipes generaron mayor número de pinnas por hoja, que M. adenantheroides y M. polyantha; mientras que M. calcicola tuvo un número de pinas intermedio. En contraste, las plantas sin inóculo de M. lacerata y M. texana var. filipes fueron las que presentaron el mayor número de pinnas por hoja, y M. purpusii registró valores intermedios en el número de pinas (Figura 3A).

Figura 3 Variación del número de pinnas/hoja (A), área foliar total (B) y específica (C) de plantas de ocho especies de Mimosa creciendo con inóculo (gris) y sin inóculo (blanco) de suelo de islas de recursos en condiciones de invernadero. Letras distintas indican diferencias estadísticas significativas, las mayúsculas entre especies y las minúsculas entre inoculadas y sin inóculo. 

Los valores de área foliar total y específica presentaron un patrón similar al de formación de pinnas, siendo M. texana var. filipes la que mostró los valores más altos de área foliar total y M. lacerata los más bajos; mientras que, en las plantas sin inóculo, M. adenantheroides, M. polyantha y M. texana var. filipes tuvieron las mayores áreas foliares totales y específicas en comparación con el resto de las especies examinadas (Figura 3B y C).

Las ocho especies de Mimosa que crecieron con inóculo incrementaron entre 2 y 2.5 veces la proporción raíz:tallo, la biomasa seca y el contenido de agua, en comparación con las plantas sin inóculo (Figura 4A-C). En el tratamiento con inóculo, M. texana var. filipes tuvo mayor proporción raíz:tallo y más biomasa seca que las otras siete especies, destacando una menor biomasa seca en M. calcicola y M. polyantha. Además, las plantas de M. adenantheroides, M. biuncifera, M. luisana, M. purpusii y M. texana var. filipes tuvieron mayor contenido de agua que M. calcicola, M. lacerata y M. polyantha (Figura 4C). En contraste, las plantas sin inóculo no mostraron diferencias significativas en la proporción raíz:tallo. Sin embargo, la biomasa seca y el contenido de agua sí difirieron entre las especies, siendo M. biuncifera, M. lacerata y M. texana var. filipes las que presentaron mayor biomasa seca y contenido de agua.

Figura 4 Variación de la proporción raíz:tallo (A), biomasa seca total (B) y contenido de agua (C) de plantas de ocho especies de Mimosa creciendo con inóculo (gris) y sin inóculo (blanco) de suelo de islas de recursos en condiciones de invernadero. Letras distintas indican diferencias estadísticas significativas, las mayúsculas entre especies y las minúsculas entre inoculadas y sin inóculo. 

El número de nódulos de bacterias fijadoras de N₂ observado en las raíces de las especies estudiadas, dependió de la especie y del tratamiento. Las plantas sin inóculo no presentaron ningún nódulo; en contraste, las plantas de M. texana var. filipes crecidas con inóculo, presentaron la mayor cantidad promedio de nódulos bacterianos; mientras que M. calcicola, M. polyantha y M. purpusii mostraron la menor nodulación (< 10 nódulos por planta) (Figura 5A).

Figura 5 Variación en el número de nódulos en la raíz (A) y el porcentaje de colonización micorrízica arbuscular (B) en plantas de ocho especies de Mimosa creciendo con inóculo (gris) y sin inóculo (blanco) de suelo de islas de recursos en condiciones de invernadero. Letras distintas indican diferencias estadísticas significativas, las mayúsculas entre especies y las minúsculas entre inoculadas y sin inóculo. 

Por otra parte, solo las raíces de las plantas de M. adenantheroides y M. polyantha que crecieron sin inóculo registraron colonización micorrízica arbuscular menor al 3 %; mientras que las crecidas con inóculo presentaron porcentajes de colonización micorrízica en un intervalo de 28 a 73 %, los cuales variaron entre las especies. Los valores más altos de colonización micorrízica arbuscular se registraron en M. adenantheroides, M. lacerata, M. luisana y M. polyantha; mientras que los más bajos se presentaron en M. biuncifera y los intermedios en M. calcicola, M. purpusii y M. texana var. filipes (Figura 5B).

Los coeficientes de correlación entre los parámetros de crecimiento evaluados, respecto al número de nódulos bacterianos y el porcentaje de colonización micorrízica arbuscular, indican que la altura del tallo y la longitud de raíz alcanzadas están relacionadas con la colonización micorrízica; mientras que los demás parámetros se relacionan tanto con la colonización micorrízica como con la cantidad de nódulos, aunque, en general, los coeficientes de correlación fueron mayores con la colonización micorrízica que con la nodulación, excepto en el caso del área foliar y la proporción raíz:tallo, que estuvieron mejor correlacionados con el número de nódulos (Tabla 3).

El NMDS mostró que, con base en los atributos morfológicos de crecimiento evaluados, se conforman cuatro grupos, tres de estos incluyen a todas las especies creciendo sin inóculo y cada uno de estos tres grupos está conformado por especies que tuvieron similitudes en algunos de sus rasgos de desarrollo morfológico; mientras que el cuarto grupo está conformado por todas las especies de Mimosa estudiadas creciendo con inóculo; es decir, con presencia de simbiontes fúngicos y bacterianos en sus raíces (Figura 6).

Figura 6 Análisis de escalamiento multidimensional no métrico (NMDS por sus siglas en inglés) basado en el total de parámetros de crecimiento de plantas de ocho especies del género Mimosa creciendo con y sin inóculo de suelo de islas de recursos en condiciones de invernadero. Nivel de Stress = 0.22; ANOSIM: N = 9999, R = -0.46, p = 0.05. Las líneas punteadas indican los polígonos de convergencia entre grupos de especies creciendo con inóculo (+Inc) y sin inóculo. 

Discusión

Las plantas presentan diferentes combinaciones de rasgos morfológicos y fisiológicos que influyen en la estructura de las comunidades y en el funcionamiento del ecosistema (^{Escudero & Valladares 2016}), por lo que es importante considerar estos rasgos, además de los taxonómicos y filogenéticos, en la estimación de la diversidad funcional de las comunidades (^{Violle et al. 2007}).

Los patrones de crecimiento de las ocho especies de Mimosa, crecidas con y sin inóculo, se muestran relativamente diferentes, a pesar de las similitudes inherentes a su historia de vida y filogenia (^{Simon et al. 2011}). No obstante, algunas especies tuvieron mayor similitud en algunos de sus rasgos morfológicos de crecimiento que, a su vez, difirieron de las otras especies de Mimosa. Tales diferencias sugieren que cuando las plantas crecen sin inóculo y no tienen posibilidad de establecer asociaciones micorrízicas y bacterianas, podrían conformar tres grupos de especies con diferentes tipos de respuestas morfo-fisiológicas al ambiente. De acuerdo con ^{Rincón et al. (2000)}, estos grupos son llamados diseños y fueron propuestos por primera vez en leguminosas del género Caesalpinia. Estos diseños involucran el registro cualitativo de los rasgos morfológicos de las plantas como un primer paso para categorizar a las especies en grupos funcionales tradicionales mediante rasgos suaves (^{Violle et al. 2007}, ^{Funk et al. 2017}).

Un diseño corresponde a un grupo de especies, en este caso de Mimosa, que reúnen un conjunto de características morfológicas, fisiológicas e, incluso, anatómicas, moldeadas por las características ecológicas relevantes para su crecimiento y reproducción (^{Rincón et al. 2000}) y, probablemente, heredadas a estas plantas a través de sus semillas como se ha demostrado en otras leguminosas como P. laevigata (^{Hernández-Madrigal et al. 2022}). La biomasa de las especies estudiadas de Mimosa está en el intervalo reportado en 34 especies de leguminosas leñosas, entre ellas, M. tenuiflora (Willd.) Poir.; en donde se observó que cuando las especies están limitadas de nutrientes, presentan los valores más bajos de biomasa (^{Huante et al. 1995}), esto coincide con los registrados en las plantas sin inóculo y los más altos en las plantas con inóculo, lo que sugiere que tanto la disponibilidad de nutrientes, como la interacción planta-simbionte, podrían moldear la existencia de estos diseños morfo-fisiológicos en leguminosas.

Con base en lo anterior y en el crecimiento y asignación de biomasa de las especies de Mimosa examinadas sin inóculo, se registraron tres diseños. El primero corresponde a M. calcicola y M. lacerata, el segundo a M. adenantheroides, M. luisana y M. polyantha y, el tercer diseño a M. biuncifera, M. purpusii y M. texana var. filipes. Los resultados indican que estas especies de Mimosa presentan similitudes conformando diseños morfo-fisiológicos particulares y, a su vez, difieren de otros diseños, lo que les confiere la capacidad de explorar, explotar o incorporar de forma diferencial los recursos del suelo, lo que favorece su coexistencia.

Se considera que el desfasamiento en la altura del tallo principal, el número de pinnas por hoja, la biomasa que alcanzan durante el período de crecimiento y el contenido de agua en sus tejidos, son factores importantes para la conformación de estos diseños morfo-fisiológicos. No obstante, otros parámetros no evaluados en este estudio como la edad en la que los individuos de cada especie alcanzan su máxima tasa de crecimiento, la morfología de la raíz (^{Huante et al. 1988}, ^{Rincón et al. 2000}) y los rasgos fisiológicos (^{Funk et al. 2017}), así como el utilizar un sustrato estéril con nutrientes como control (e.g., suelo de un área abierta o de otras IR) podrían ser, incluso, más informativos. Asimismo, el tamaño y la masa de las semillas podrían tener relevancia en germinación, desarrollo y sobrevivencia de las plantas (^{Matilla 2004}). Este estudio consideró el tamaño de las semillas e indica que los diseños podrían no modificarse al incorporar la masa, ya que, en general, los intervalos de tamaño se sobreponen entre las especies. No obstante, todos estos aspectos deberán documentarse en futuras investigaciones con estas especies de Mimosa.

El diseño conformado por M. calcicola y M. lacerata indica que las plantas evaluadas alcanzan similares alturas, longitud de raíces, área foliar específica, biomasa seca y contenido de agua, pero difieren en el número de pinnas por hoja y en el área foliar. Respecto a la asignación de recursos, M. calcicola asigna más recursos al tallo y M. lacerata más a la raíz, lo que podría explicar su coexistencia dentro del Valle de Tehuacán-Cuicatlán, en donde se han registrado como elementos florísticos de una misma comunidad vegetal (^{Conde 2016}) o bien reflejar el hecho de que no comparten intervalos de distribución altitudinal dentro del Valle (^{Camargo-Ricalde et al. 2002}).

El diseño en el que se agruparon M. adenantheroides, M. luisana y M. polyantha está explicado porque las plantas evaluadas tienen similitud en la altura de sus tallos, longitud de raíces, cantidad de pinnas por hoja, biomasa seca y contenido de agua. No obstante, estos rasgos, en conjunto con una mayor asignación de biomasa al tallo, área foliar total y específica, en el caso de M. adenantheroides y M. polyantha, podrían explicar por qué estas especies no coexisten en las comunidades y ocupan distintos intervalos altitudinales. En contraste, las diferencias entre M. luisana y M. polyantha enfatizan el hecho de que esta última asigna mayor biomasa a la raíz que al tallo; esto podría explicar la coexistencia de ambas especies en algunas comunidades dentro del Valle de Tehuacán-Cuicatlán (^{Camargo-Ricalde et al. 2002}), ya que tienen estrategias distintas de explotación de los recursos del suelo.

El tercer diseño integrado por M. biuncifera, M. purpusii y M. texana var. filipes, incluye a las especies con diferente forma de vida (arbustiva erecta, arbustiva decumbente y arbórea, respectivamente) y patrones de crecimiento, en donde las plantas de M. texana var. filipes alcanzaron mayor altura del tallo, longitud de raíz, número de pinnas por hoja y biomasa seca que las de M. biuncifera y M. purpusii, siendo estas dos últimas similares en su crecimiento, pero con mayor área foliar y biomasa que las otras especies. Además, las plantas de las tres especies difieren en cantidad y asignación de biomasa (M. texana var. filipes > M. biuncifera > M. purpusii), mientras que el contenido de agua fue similar entre las dos primeras especies y menor en M. purpusii. Esto sugiere que las tres especies de este diseño tienen estrategias particulares de explotación de recursos dentro del Valle de Tehuacán-Cuicatlán, que las podrían situar en sitios ambientalmente distintos que no implican, necesariamente, su coexistencia.

Las ocho especies de Mimosa crecidas en suelo con inóculo y con registro significativo de colonización micorrízica arbuscular y presencia de nódulos fijadores de N₂ en sus raíces, respecto al control, conformaron el cuarto diseño morfo-fisiológico, lo que indica que el establecimiento de asociaciones simbióticas modifica los patrones de crecimiento y asignación de biomasa en las especies de Mimosa. Así, el crecimiento de las ocho especies de Mimosa fue favorecido cuando las plantas crecieron con inóculo, ya que en este tratamiento incrementaron entre 2 y 3.5 veces su altura del tallo, longitud de raíces, biomasa seca y asignación de biomasa; así como de 3 a 4 veces su número de pinnas por hoja, área foliar total y específica, y contenido de agua. Esto coincidió con los porcentajes de micorrización arbuscular en las raíces de las ocho especies, los cuales variaron entre el 30 y 72 % y con la presencia de nódulos en las raíces; aunque, en cantidades bajas, con un promedio menor a 10 nódulos por raíz, excepto para M. texana var. filipes, que registró, en promedio, hasta 68 nódulos. En las ocho especies examinadas, la colonización micorrízica y nodulación influenciaron el crecimiento, lo que podría promover sus posibilidades de establecimiento, como se ha reportado en otras especies de Mimosa (^{Gavito et al. 2008}, ^{Camargo-Ricalde et al. 2010a}, ^{Souza et al. 2016}), así como la conservación de los reservorios de HMA dentro del Valle al formar IR micorrízicos (^{Camargo-Ricalde & Dhillion 2003}, ^{Camargo-Ricalde & Esperón-Rodríguez 2005}, ^{Chimal-Sánchez et al. 2016}, ^{Chimal-Sánchez et al. 2020}, ²⁰²²).

El mejoramiento del crecimiento en las plantas de Mimosa, en simbiosis, podría estar relacionado con sus cambios fisiológicos, ya que los hongos micorrizógenos arbusculares incrementan la absorción de nutrientes esenciales como el fósforo y el nitrógeno al explorar un mayor volumen de suelo (^{Smith & Read 2008}, ^{Veresoglou et al. 2012}) y esto promueve la nutrición, acumulación de clorofila y azúcares, favoreciendo el estado fisiológico de las plantas, como se ha reportado en diferentes especies del clado mimosoide (^{Monroy-Ata et al. 2007}, ^{Gavito et al. 2008}, ^{Peña-Becerril et al. 2016}). Además, es aceptado que el efecto de la micorriza arbuscular sobre el crecimiento, en leguminosas, puede potenciarse a través de la simbiosis tripartita que se establece con bacterias fijadoras de N₂ (^{Varennesa & Goss 2007}, ^{Camargo-Ricalde et al. 2010a}, ^{Sprent et al. 2017}).

Bajo el escenario de conformación del cuarto diseño, resultante de las dos asociaciones microbianas evaluadas, puede darse una reducción en la fuerza de la competencia interespecífica por recursos, lo que promovería la coexistencia de las especies e incrementaría la biomasa de la comunidad. Así, las diferencias interespecíficas de los rasgos morfo-fisiológicos tendrían influencia, no sólo en el ensamblaje, sino también en la estructura funcional de la comunidad (^{Escudero & Valladares 2016}). En una región semiárida como el Valle de Tehuacán-Cuicatlán, las múltiples formas de vida presentes permiten a las especies utilizar, de manera diferenciada, los recursos, lo que implica que las diversas respuestas de las ocho especies de Mimosa con y sin simbiontes micorrízicos y/o bacterianos fijadores de N₂ podrían jugar un papel crucial para adaptarse a los cambios ambientales que ocurren en este ecosistema. Esto se debe a que la variación en la distribución de los diseños en el espacio, estaría ligada a cambios en la importancia relativa de los rasgos funcionales de las especies de Mimosa estudiadas (e.g., estrategias adaptativas basadas en la morfología, fisiología, variación en la forma de vida), lo que llevaría a una diferenciación en la explotación de los recursos del suelo, que podría reflejarse a largo plazo en el ensamblaje y funcionamiento de las comunidades vegetales (^{Datry et al. 2016}).

En el contexto de la restauración ambiental, los resultados sugieren que, dadas las respuestas favorables de las ocho especies de Mimosa a sus simbiontes, el cuarto diseño morfo-fisiológico, tendría mayor potencial de favorecer el establecimiento de estas especies ante las condiciones de estrés ambiental y limitación de recursos impuestas por un disturbio. Los resultados sugieren que M. texana var. filipes y M. adenantheroides son las más apropiadas para la restauración. No obstante, es también necesario elegirlas en función de otros rasgos como su distribución, las propiedades de su madera (^{Montaño-Arias et al. 2017}, ²⁰¹⁸) y otros aspectos fisiológicos ligados al tiempo en el que establecen las simbiosis, esto brindaría mayor certeza en el uso de una u otra especie de Mimosa con fines de tener mayor éxito en la restauración ambiental de sitios degradados dentro del Valle.

Este estudio es el primero en documentar el crecimiento y asignación de biomasa de ocho especies de Mimosa que se distribuyen en el Valle de Tehuacán-Cuicatlán, Puebla-Oaxaca, México, con el propósito de detectar posibles grupos funcionales dentro del género. Las ocho especies de Mimosa estudiadas varían en crecimiento y asignación de biomasa, conformando tres diseños morfo-fisiológicos cuando crecen sin el efecto de HMA y bacterias fijadoras de N₂: i) M. calcicola y M. lacerata; ii) M. adenantheroides, M. luisana y M. polyantha; y, iii) M. biuncifera, M. purpusii y M. texana var. filipes, pero cuando sus raíces están colonizadas por HMA y bacterias fijadoras de N₂ que favorecen significativamente su desarrollo y modifican sus patrones de crecimiento, las ocho especies conforman un cuarto diseño. Los cuatro diseños representan una síntesis de algunos rasgos funcionales suaves que contribuyen a delinear posibles grupos funcionales dentro de este género. Aún es necesario evaluar aquellos rasgos funcionales duros (e.g., procesos fisiológicos) que permitan conocer cómo estas especies responden a recursos limitantes del suelo y a sus simbiontes para su coexistencia, con el propósito de seleccionar a las especies de Mimosa con mayor potencial para la restauración ambiental y el ensamblaje de las comunidades en este ecosistema semiárido de México.