Introducción

Las plantas de la familia Malpighiaceae son originarias de México y Centro América (^{Mezadri et al., 2008}; ^{Mondin et al., 2010}). Los frutos tienen importancia agronómica y comercial por su calidad morfológica (^{Maldonado-Peralta et al., 2016}); alto contenido de ácido ascórbico, considerandolos un antioxidante o nutrimento nutracéutico (^{Mezadri et al., 2006}; ^{Mondin et al., 2010}). El método de propagación de estas especies es principalmente por semilla (^{Junqueira et al., 2002}), implicando segregación hereditaria o heterogeneidad en las poblaciones de plantas y en la producción y calidad de frutos (^{Martins et al., 2000}); además, a pesar de que la semilla presenta alta viabilidad (^{Maldonado-Peralta et al., 2016}), la germinación es baja (^{Azerêdo et al., 2006}). Por otro lado, la propagación vegetativa permite que la especie conserve íntegramente las características distintivas del genotipo, observadas en los progenitores a través de generaciones (^{Paiva et al., 2003}).

El uso de estacas es un método clásico de propagación, que promueve la multiplicación de plantas seleccionadas y mantiene las características deseables (^{Meletti, 2000}), resultando en plantas más uniformes, con mayor estabilidad genética y producción homogénea (^{Oliveira et al., 2003}). Diversos autores reportan propagación vegetativa con éxito en especies frutales consideradas de difícil enraizamiento, por ejemplo en Citrus (^{De Andrade y Martins, 2003}), anonas (^{De Figueirêdo et al., 2013}; ^{Junior y Martins, 2014}), Pouteria campechiana (^{Chiamolera et al., 2014}), Prunus salicina (^{Tonietto et al., 2001}) e indican que la presencia de hojas en las estacas promueve la formación de raíces (Costa Junior, 2000).

Existen especies que son difíciles para emitir raíces, por lo que en estos casos es necesario utilizar diferentes técnicas y estimulantes del enraizamiento, como es el ácido indolbutírico, que ha mostrado resultados positivos en diferentes especies leñosas (^{Vernier y Cardoso, 2013}). La propagación vegetativa presenta complicaciones, desde ambientales hasta aquellas propias de la especie, por ello es necesario buscar formas y materiales apropiados, que mejoren los resultados de esta forma de propagación; el uso de auxinas mejora el enraizamiento de estacas (^{Gontijo et al., 2003}), de esta manera se indica que el uso de reguladores del crecimiento es uno de los aspectos más estudiados, debido a que hacen eficiente el proceso, obteniéndo plantas con mayor calidad aérea y de raíz (Bastos et al., 2009; ^{Takata et al., 2012}).

En trabajos de enraizamiento de estacas leñosas de acerola (Malpighia emarginata Sessé y Moc. Ex DC y M. glabra L.) en invernadero, con diferentes sustratos y promotores del crecimiento, se encontró desde 45 hasta 92% de estacas enraizadas (^{Alves et al., 1991}; ^{Musser, 2001}) y en estacas sub-apicales se obtuvo 96% de enraizamiento (^{Gomes et al., 2000}). ^{Ribero-Maldonado et al. (2005)}, evaluaron el enraizamiento de estacas apicales con hojas de M. emarginata, en diversos sustratos y concentraciones de AIB; con cachaza de caña y abono de río, obtuvieron 97.5% de sobrevivencia y 47.5% de estacas enraizadas, por la viabilidad que se alcanzó es necesario considerarlo para futuras investigaciones, y en estacas sub-apicales de M. emarginata y M. glabra con hojas encontraron 45.05 y 52.27% de enraizamiento, respectivamente.

^{Bastos et al. (2004)}), indican que el método clásico de propagación comercial es el injerto, pero ello conlleva altos costos de mano de obra; siendo la propagación por estaca una alternativa, que permite la obtención de plantas de mejor calidad a menor costo y con las características deseables (^{Nacata et al., 2014}). El objetivo de la presente investigación fue evaluar el enraizamiento de estacas leñosas de dos especies de nanche (Malpighia mexicana A. Juss. y Byrsonima crassifolia (L.) H. B. K.), colectadas en Santa María Zoquitlán, Oaxaca, México, usando sombra y ácido indolbutírico como promotor del crecimiento.

Materiales y métodos

Esta investigación se realizó en los invernaderos del Colegio de Postgraduados, Campus Montecillo, Texcoco, Estado de México, en 2014. Malpighia mexicana A. Juss. se encontraba en reposo y Byrsonima crassifolia (L.) H. B. K. en plena producción. Se seleccionaron arbustos madre silvestres, procedentes de semilla y sin síntomas visuales de problemas fitosanitarios, ubicados en el cerro el Guilache de Santa María Zoquitlán, Oaxaca, localizado a 16° 35’ 33.34” latitud norte, 96° 18’ 50.36” longitud oeste a una altitud de 1 333 m, temperatura promedio anual de 31 °C, zona de selva baja caducifolia y clima tropical seco (^{INEGI, 2012}).

De las plantas madre, el 12 de abril se cortaron 240 estacas leñosas, de 20 cm cada una, se envolvieron en papel periódico humedecido con agua y fungicida Captan 1 gL^-1, y se trasladaron en sacos de plástico de 10 kg. Como promotor del enraizamiento se usó Ácido Indobútirico (AIB) en concentraciones de 1 000, 3 000 y 10 000 ppm, y un testigo sin enraizador, se sembraron en turba con arena 1:1 (volumen/volumen). El 13 de abril se estableció el experimento, los sustratos se mezclaron, humedecieron a capacidad de campo y se llenaron charolas de 5 L; las estacas se lavaron, podaron y se les cortó la base para eliminar el área oxidada, luego se trataron con AIB impregnándolas 5 cm de la base con la concentración correspondiente; inmediatamente se sembraron a 10 cm de profundidad en el sustrato, cada charola se etiquetó y se introdujo en una bolsa de plástico transparente, la cual se cerró y ató a la parte alta del invernadero para evitar que el plástico interfiriera con las estacas. Las charolas se colocaron bajo los tratamientos de sombra al 70 y 90% mediante malla sombra negra, se revisaron constantemente para detectar la presencia de hongos o sequía. ^{Gontijo et al. (2003)}; ^{Vargas et al. (1999)}, indican que estacas de especies leñosas enraizadas durante mayor tiempo, presentan mejores resultados; las estacas establecidas no se movieron hasta el momento de la evaluación, que fue a los 7 meses (13 de noviembre).

Se utilizó un diseño en bloques completos al azar (BCA), los factores estudiados fueron: 2 especies de nanche, 4 tratamientos de AIB y 2 niveles de sombra, con arreglo factorial de tratamientos (2*4*2), de estas combinaciones resultaron 16 tratamientos, cada uno con 3 repeticiones de 10 estacas (unidades experimentales). Las variables respuesta evaluadas fueron: porcentaje de sobrevivencia, brotación, estacas con callo y enraizamiento, y número y longitud de raíces, obtenidos a partir del número total de estacas establecidas. Los datos obtenidos en porcentajes, se transformaron utilizando la función ARCSIN, x100 se realizó un análisis de varianza (Anova) y prueba de comparación de medias Duncan (p≤ 0.05), con el paquete estadístico SAS^® 9.2, (SAS Institute, 2009).

Resultados y discusión

Las dos especies sobrevivieron a siete meses de establecido el experimento (Cuadro 1); en esta variable, B. crassifolia y M. mexicana, no presentaron diferencias significativas. Las estacas que sobrevivieron presentaron brotes, pero el porcentaje de estacas con callo disminuyó, y las estacas con raíces también. B. crassifolia no presentó enraizamiento. El proceso normal de propagación en las dos especies de nanche fue por semilla, aunque con largos periodos de germinación, y con resultados para B. crassifolia de 64.44% (^{Jaimes et al., 2014}) y para especies del género Malpighia de 30% (^{Azerêdo et al., 2005}).

Cuadro 1 Variables evaluadas en estacas de dos especies de nanche. 

Medias con letras diferentes en la misma hilera difieren significativamente (Duncan p≤ 0.05).

Es posible con mayor investigación se incremente el éxito en la propagación de nanche; sin embargo, los resultados encontrados en este trabajo muestran que estas especies leñosas al propagarlas por estaca es difícil su enraizamiento, alcanzando un poco más de 10% de sobrevivencia y enraizamiento solo en M. mexicana. Investigaciones realizadas en nuez de macadamia, usando estacas semi leñosas se alcanzó 10% de enraizamiento (^{Bastos et al., 2006}). Al ser especies que presentan dificultad al propagarse de esta forma, otra alternativa factible de estudiar en nanche, es la realización de acodos (^{Daneluz et al., 2009}), que ha resultado ser eficaz en nuez de macadamia, con 25.3% de enraizamiento, utilizando 6 000 ppm de AIB y 53.8% cuando los acodos se realizaron en diciembre (^{Entelmann et al., 2014}), considerando en nanche diferentes épocas, y que permita obtener diferentes resultados.

Las especies que crecen en climas tropicales y sub tropicales responden al sombreado, y se obtuvieron mejores resultados de enraizamiento cuando se usó sombra de 70%, siendo igual la sobrevivencia y brotación de estacas (Cuadro 2), además de que la mayoría de las estacas presentaron callosidad cuando se establecieron bajo este mismo nivel de sombra; sin embargo, con sombra al 90%, hubo poca sobrevivencia y bajo esta condición no se presentó enraizamiento. Estudios en B. crassifolia muestran que el enraizamiento con sombra al 70% es mejor que la sombra de 90% (^{Duarte et al., 2003}), lo que coincide con lo encontradoen esta investigación.

Cuadro 2 Enraizamiento de estacas de dos especies de nanche con diferente nivel de sombra. 

Medias con letras diferentes en la misma hilera difieren significativamente (Duncan p≤ 0.05).

La sobrevivencia y brotación en las dos especies de nanche, fueron mejor en el testigo que en las diferentes concentraciones de AIB (Figura 1), que indica que todas las estacas vivas, presentaron brotes; sin embargo, entres concentraciones de AIB estadísticamente no se encontraron diferencias. ^{Gontijo et al. (2003)}, usaron 2 800 mg L^-1 de AIB en estacas de acerola (M. glabra L.) con hojas y lograron hasta 50% de enraizamiento, mientras que cuando se usó AIB en concentraciones de 1 500 y 2 000 mg L^-1 y evaluadas a los 60 días, se produjo más de 80% de estacas enraizadas, situación contraria a la de esta investigación, en la que los porcentajes de enraizamiento fueron bajos (^{Lopes et al., 2003}). Esto a la vez demuestra que el uso de AIB en tiene efecto en el enraizamiento, porque aunque los resultados se mostraron bajos, donde no se usó se presentó ausencia de raíces.

Figura 1 Porcentaje en las variables evaluadas en las dos especies de nanche, usando diferentes concentraciones de AIB y un testigo sin promotor del enraizamiento.  

Las dos especies estadísticamente se presentaron iguales en estacas con callo, donde el testigo mostró mayor porcentaje, seguido por el uso de 10 000, 6 000 y 3 000 ppm de AIB, respectivamente. Situación contraria a la variable anterior sucedió en el porcentaje de estacas con raíces, debido a que el testigo no alcanzó a enraizar, y en M. mexicana con las tres concentraciones de AIB, aunque bajo, pero hubo enraizamiento. Las estacas enraizadas con 10 000 ppm de AIB, presentaron raíces de 2.78 cm en promedio, aquellas donde se usó 6 000 y 3 000 ppm de AIB fueron de 1.13 y 0.78 cm, respectivamente. Investigaciones realizadas en acerola (M. glabra L.), utilizando estacas tratadas con 2 800 mg L^-1 de AIB, establecidas en diferentes sustratos, han mostrado mayor enraizamiento (^{Silva et al., 2010}), por lo que en nanche es necesario realizar mayor investigación para determinar el sustrato, tipo de estacas y condiciones ambientales adecuadas para aumentar el enraizamiento.

En la interacción cada especie presentó diferente conducta, con variaciones de acuerdo a la sombra y promotores del enraizamiento (Cuadro 3). Las dos especies establecidas usando sombra al 70%, superaron en la mayoría de las variables a la sombra de 90%; además, B. crassifolia al 70% de sombra las estacas que sobrevivieron también brotaron, mientras que a mayor sombra solo el testigo sobrevivió.

Cuadro 3 Variables evaluadas en la interacción de todos los factores estudiados. 

Medias con letras diferentes de las variables respuesta en la misma hilera difieren significativamente (Duncan p≤ 0.05). CV= coeficiente de variación.

M. mexicana también presentó el mejor comportamiento cuando las estacas se sembraron bajo sombra de 70%. En esta especie el testigo presentó sobrevivencia, brotación y estacas con callo pero con ninguna estaca enraizada, situación contraria se encontró en las estacas con aplicación de promotor del enraizamiento, donde a pesar de los bajos porcentajes, con las cuatro concentraciones de AIB algunas estacas alcanzaron a enraizar, indicando que hubo efecto de las auxinas en el enraizamiento, y con 10 000 ppm de AIB las raíces fueron de mayor tamaño. La sombra de 90% en el testigo y con 3 000 ppm de AIB en M. mexicana, dio iguales resultados para sobrevivencia, brotación y estacas con callo pero sin presencia de raíces.

Conclusiones

Las dos especies de nanche presentaron baja sobrevivencia y brotación; sin embargo, en Méxio es la primera investigación que abarca este tema, lo que permite ser una base para futuros trabajos, además estas especies son consideradas de difícil propagación, y enraizamiento sólo se encontró en M. mexicana. En nanche, el uso de promotores del enraizamiento es necesario para la obtención de raíces, además de que la propagación debe realizarse bajo sombra. De acuerdo a lo obtenido es necesario continuar investigando, con diferentes técnicas de propagación, en diversas épocas del año y con distintos materiales, hasta encontrar mejores resultados.