Introducción

El nuevo coronavirus humano, llamado Coronavirus del Síndrome Respiratorio Agudo Severo (SARS-CoV-2), surgió en Wuhan, China, en diciembre de 2019 y es causante de la enfermedad COVID-19 (^{OPS, 2020}). Desde la aparición del primer caso en México, el 27 de febrero de 2020 (^{Suárez et al., 2020}) y en Guanajuato el 15 de marzo de 2020 (^{Secretaría de Salud de Guanajuato, 2020}) la pandemia continúa activa, reportando al 31 de diciembre del 2020 un total de 81´159, 096 casos confirmados, a nivel mundial, incluyendo 1´179,246 muertes y, a su vez, México registra un total de 1´389,430 casos confirmados, que incluyen un total de 122,855 pacientes fallecidos (^{Organización Mundial de la Salud, 2021}). El personal que desempeña alguna ocupación relacionada a la salud resulta uno de los grupos más expuestos al contagio (^{Bielicki et al., 2020}). Se reporta al 28 de diciembre de 2020 que un 9.2% de los casos activos a nivel nacional corresponden a personal de salud y en Guanajuato un total de 461 de 3,877 casos activos de personal de salud, lo cual representa el 11.9% (^{Gobierno de México, 2020}).

Dada la gran variabilidad de sintomatología del COVID-19, que va desde asintomático hasta enfermedad severa con posibilidad de muerte (^{Van Caeseele et al., 2020}), surge la necesidad estudiar el comportamiento de los anticuerpos desarrollados por el personal de salud, con el fin de establecer si existe prevalencia de los mismos y durabilidad de la inmunidad a COVID-19. Los anticuerpos IgG aparecen y permanecen en la sangre después de haber cursado una infección. La presencia de estos anticuerpos anti-SARS-CoV-2 indican que se tuvo contacto con el virus y que el organismo generó anticuerpos que pudieran brindar cierta protección contra COVID-19. Actualmente se desconoce la duración de la protección que ofrecen dichos anticuerpos (^{National Jewish Health, 2020}).

Se han realizado múltiples estudios de seroprevalencia, en diferentes contextos, alrededor del mundo. El objetivo de la mayoría de estos estudios es detectar pacientes asintomáticos que generaron anticuerpos IgG contra SARS-CoV-2, sin haber tenido un diagnóstico confirmatorio por rRT-PCR (^{Stadlbauer et al., 2020}). Otros estudios analizan el tiempo promedio de seroconversión de los pacientes con rRT-PCR positiva (^{Wajnberg et al., 2020}) y cuáles son los pacientes que no desarrollan anticuerpos IgG detectables a pesar de tener una rRT-PCR positiva (^{Marklund et al., 2020}). Mulki-Rashid y col., realizaron un estudio en Suecia que incluyó 131 trabajadores de salud y obtuvieron al primer corte del estudio un 15% de prevalencia de anticuerpos IgG contra SARS CoV-2 por quimioluminiscencia (^{Rashid-Abdi et al., 2020}). Venugopal y col. realizaron un estudio en un hospital en Nueva York donde se encontró una seroprevalencia del 27% en los trabajadores de salud (^{Venugopal et al., 2020}). Asimismo, en México Martinez-Acuña y col. realizaron un estudio de seroprevalencia de anticuerpos anti SARS-CoV-2 en muestras de donadores de sangre que acudieron al servicio de enero a agosto de 2020 encontrando una seroprevalencia del 3.99% (^{Martínez-Acuña et al., 2020}).

En relación a la dinámica y permanencia de los anticuerpos contra el SARS-CoV-2, Yu-Lin Lee y colaboradores realizaron un estudio en Taiwán donde encontraron en un grupo de 19 pacientes de COVID-19 una duración máxima de 42 días de anticuerpos IgG anti SARS-CoV-2 (^{Lee et al., 2020}). Lui y col. reportan en un caso clínico de una paciente de 26 años en Wuhan, China, que la paciente mantuvo títulos positivos para anticuerpos IgG hasta 80 días después de la aparición de los primeros síntomas (^{Liu et al., 2020}). En Estados Unidos, Maine y col. Dieron seguimiento al suero obtenido de 427 pacientes con diagnóstico confirmado para COVID-19. Los anticuerpos IgG de dichas muestras se analizaron por más de 100 días y se obtuvo una permanencia promedio de anticuerpos IgG de 92.3% por un periodo de 3 a 6 meses posteriores al inicio de los síntomas (^{Maine et al., 2020}).

Al día de hoy se cuenta con una gran variedad de ensayos para la detección de anticuerpos contra el SARS-CoV-2 en el mercado. Estos incluyen desde tiras cualitativas por inmunocromatografía hasta inmunoensayos por quimioluminiscencia con antígenos recombinantes de proteína de espícula o de nucleoproteína. Estos ensayos permiten valorar la respuesta inmune ante la COVID-19 y arrojan información valiosa sobre el tiempo en que se generan los anticuerpos, si todos los pacientes recuperados los generan, cuánto tiempo permanecen detectables en el cuerpo (^{Krammer et al., 2020}).

Fuente: Secretaría de Salud de Guanajuato.

Fig. 1 Representación de la aplicabilidad de los diferentes estudios de laboratorio para el diagnóstico de SARS-CoV-2 y dinámica de aparición de anticuerpos. Los anticuerpos IgG se presentan en suero a partir del octavo día posterior al inicio de síntomas, teniendo su mayor concentración al día 17 posterior al inicio de síntomas. 

Al 18 de mayo de 2020, existían en México 3 ensayos serológicos, aprobados por la Comisión Federal de Protección contra Riesgos Sanitarios COFEPRIS, para efectuar la detección de anticuerpos desarrollados contra el SARS-CoV-2 (^{COFEPRIS, 2020}). Esta aprobación se estableció para garantizar la eficacia de los resultados de las pruebas serológicas IgG e IgM para COVID-19, la cual implicó la aplicación de un protocolo de evaluación, en conjunto con el Instituto Nacional de Nutrición y Ciencias Médicas “Salvador Zubirán” y TecSalud del Tecnológico de Monterrey, para la evaluación de las pruebas serológicas para determinar IgG e IgM para COVID-19. Dentro de estos ensayos aprobados se encuentra el Architect SARS-CoV-2 IgG (^{COFEPRIS, 2020}), el cual fue seleccionado por el LaESaP, tras realizarse una revisión bibliográfica (^{Bryan et al., 2020}) sobre los resultados de los ensayos de sensibilidad y especificidad (100% y 99.63% respectivamente) y obtener el mayor desempeño con respecto a las otras marcas aprobadas.

El Laboratorio Estatal de Salud Pública (LaESaP) de Guanajuato, es una entidad gubernamental que pertenece a la Red Nacional de Laboratorios de Salud Pública de México y se desprende del Instituto de Salud Pública del Estado de Guanajuato. Desde su creación en 1981, ha brindado servicio de análisis de Laboratorio al Estado de Guanajuato y Estados vecinos, en materia de control sanitario y epidemiológico, en todos los ámbitos de salud pública (^{Gallaga, 1995}). Los resultados emitidos han apoyado a los profesionales de la salud para la toma de decisiones y se ha participado activamente durante diferentes brotes epidémicos en la historia contemporánea del país; como fue la pandemia por el virus de Influenza A H1N1 en 2009, durante la cual se construyó un laboratorio de biología molecular con nivel de bioseguridad 2, el cual ha sido pieza fundamental para afrontar la pandemia actual de COVID-19, concentrando el diagnóstico de todo Guanajuato, desde marzo del 2020 hasta la actualidad, contabilizándose en las bases de datos internas un total de 144,372 estudios por rRT-PCR, con fecha de corte al 31 de diciembre de 2020.

En julio del 2020, el LaESaP, en coordinación con la Dirección General de Servicios de Salud del ISAPEG, implementaron un proyecto para realizar una encuesta de seroprevalencia, contemplando inicialmente la aplicación de 20,000 pruebas para la detección de anticuerpos IgG anti SARS-CoV-2 para el personal de salud de Guanajuato e investigación clínica. Dentro del marco de este proyecto se incluyó el presente estudio, con el objetivo de determinar la presencia de anticuerpos anti-SARS-CoV-2 en todo el personal que se encontraba laborando desde marzo de 2020, considerándose la fecha del inicio de la pandemia en Guanajuato, y poder establecer un mecanismo de seguimiento de los anticuerpos IgG detectados por quimioluminiscencia y evaluar su permanencia.

Aquí se describen los resultados obtenidos en la primera etapa del estudio que abarca desde julio a diciembre del 2020.

Método

Se diseñó un estudio observacional, descriptivo y longitudinal de la seroprevalencia de anticuerpos IgG anti SARS-CoV-2, en el personal que labora en el LaESaP. Fueron incluidos los 100 trabajadores que se encontraban laborando desde marzo de 2020 en las instalaciones y que no suspendieron actividades laborales, con motivo del resguardo domiciliario por pertenecer a un grupo de vulnerabilidad. Este grupo incluyó a 4 trabajadores que tenían resultado de una prueba positiva a SARS-CoV-2 por rRT-PCR previa y se conformó por 66 mujeres y 34 hombres. Para cada participante se determinó la presencia de anticuerpos IgG anti SARS-CoV-2 y la permanencia de dichos anticuerpos en los casos positivos, tras una toma de seguimiento, a los 5 meses de la toma inicial. Todos los participantes otorgaron su consentimiento por escrito, tras ser informados del estudio.

Para los trabajadores que obtuvieron resultados de rRT-PCR positivos, se estableció una escala para clasificar la gravedad del cuadro clínico presentado de COVID-19, con base en las orientaciones provisionales publicadas por la OMS, bajo el título Manejo clínico de la COVID-19:

De cada participante se obtuvieron muestras de sangre, por venopunción, las cuales fueron etiquetadas y centrifugadas; una vez obtenido el suero se refrigeró para su conservación. Posteriormente, los sueros de los participantes fueron analizados en las instalaciones del Laboratorio Estatal de Salud Pública de Guanajuato, en el Laboratorio de EPTV - Serología, perteneciente al Departamento de Control Clínico - Epidemiológico; la prueba fue realizada por personal calificado en técnicas de serología. Para ello se utilizó la plataforma ARCHITECT i System, de la casa comercial Abbott, con el reactivo SARS-CoV-2 IgG, de la misma casa comercial (Abbott Laboratories, REF. 6R86-20), mediante inmunoanálisis quimioluminiscente de micropartículas (CMIA), utilizado para la detección cualitativa de anticuerpos IgG frente al virus del SARS-CoV-2 (^{U.S. Food and Drug Administration., 2020}) así como los controles propios de la marca, 6R86-10 SARS-CoV-2 IgG Control Kit. Se selecciona el método por tener la sensibilidad y especificidad más altas (100% y 99.90% respectivamente), de las pruebas aprobadas disponibles en México durante la realización del estudio (^{Bryan et al., 2020}). La presencia o ausencia de anticuerpos en la muestra se determinó comparando las URL (Unidades Relativas de Luz) quimioluminiscente presentes en la reacción con las URL del calibrador. Los resultados se expresaron como la división del resultado de la muestra entre el resultado del calibrador almacenado y las unidades proporcionada para los resultados del ensayo son un índice muestra/punto de corte (S/C). El punto de corte, recomendado por el fabricante, corresponde a un índice (S/C) de 1.4 (^{U.S. Food and Drug Administration., 2020}). Los resultados se consideraron positivos cuando se obtuvo un valor ≥ 1.4 URL y negativos cuando fue < 1.4 URL.

Resultados

Se analizaron los sueros de los 100 trabajadores del LaESaP, tomadas del 15 al 18 de julio de 2020, para la determinación de Anticuerpos IgG, de los cuales 66 fueron mujeres y 34 hombres. El rango de edad fue de 22 a 60 años, con una media de 38.99 años y una mediana de 36 años. Se obtuvieron 6 muestras positivas (6%); de los cuales, 2 trabajadores no presentaron antecedente de prueba rRT-PCR y se consideraron como asintomáticos (Tabla 2). Estos trabajadores pertenecieron a áreas de apoyo diferentes al área donde se procesan muestras para diagnóstico de COVID-19. El 50% de ellos fueron mujeres, 3 mujeres y 3 hombres.

En el mes de diciembre de 2020 se tomaron las muestras de seguimiento; de las cuales 2 trabajadores obtuvieron resultados negativos a IgG (33%) y 4 obtuvieron resultados positivos (67%). A continuación, se resumen los resultados obtenidos en la siguiente tabla.

Fig. 2 Gráfica de la permanencia de anticuerpos IgG anti SARS-CoV-2, detectados en sueros de trabajadores del LaESaP. En esta gráfica se puede apreciar la depleción de anticuerpos IgG anti SARS-CoV-2, durante los 5 meses de duración del estudio. 

Posterior a la primera toma de muestra en julio de 2020 y hasta el 31 de diciembre de 2020, se detectaron 23 trabajadores positivos a SARS-CoV-2 por rRT-PCR y se analizó el suero para la detección de anticuerpos IgG anti SARS-CoV-2, bajo los mismos criterios descritos con anterioridad. De estos, 12 tuvieron resultado positivo, obteniéndose el 52.17% de seroconversión. El presente estudio no evaluó el desarrollo de anticuerpos neutralizantes en los trabajadores.

Discusión o Conclusiones

Hasta donde tenemos conocimiento, este es el primer estudio de seroprevalencia de anticuerpos IgG anti SARS-CoV-2, realizado a personal que procesa muestras para diagnóstico de COVID-19 en México, obteniendo una seroprevalencia del 6% (Figura 2). El estudio se realizó con la participación de la totalidad del personal del LaESaP, incluidos los trabajadores que procesan muestras para diagnóstico de COVID-19 por rRT-PCR y áreas de apoyo, en Guanajuato, desde el inicio de la pandemia. Dicho personal labora en distintas áreas, predominando el perfil de Químico analista y Técnico laboratorista. La seroprevalencia reportada en otros estudios realizados en personal de salud varía de acuerdo al país y tipo de institución considerablemente. Mulki Rashid y col., reportan una seroprevalencia del 15% en el personal que labora en el Departamento de Enfermedades Infecciosas en Vasteras, Suecia (^{Rashid-Abdi et al., 2020}). William B. Stubblefield y col., reporta en su estudio realizado al personal de salud del Vanderbilt University Medical Center, en Nashville, Estados Unidos, durante el primer mes de atención a pacientes COVID-19, una seroprevalencia del 7.6% (^{Stubblefield et al., 2020}). Asimismo, Joseph J. Grand y col., publicaron un estudio que reporta una seroprevalencia del 31.6% en el personal de salud del Whittington Health NHS Trust, ubicado en Londres, Inglaterra (^{Grant et al., 2020}). Estas diferencias pueden deberse al tipo de estudio diseñado, el método analítico utilizado, el nivel de exposición del personal participante, así como la prevalencia del SARS-CoV-2 en la región o país que se estudia.

Existen estudios que relacionan la gravedad de la enfermedad con el título de anticuerpos presentados en los participantes, teniendo una relación de mayor título de anticuerpos a mayor gravedad del paciente, así como títulos menores en pacientes asintomáticos o con sintomatología leve (^{Marklund et al., 2020}). En el caso de nuestro estudio, los participantes asintomáticos (sin prueba rRT-PCR positiva previa) que resultaron positivos para anticuerpos IgG anti SARS-CoV-2 obtuvieron títulos de anticuerpos mayores o similares a los 4 pacientes que presentaron síntomas leves a moderados (Tabla 2).

De acuerdo con Andrew Bryan y col., el reactivo de Abbott SARS-CoV-2 IgG para detección de anticuerpos anti SARS-CoV-2 IgG, presenta una especificidad de 99.90% y una sensibilidad de hasta el 100% al día 17 del inicio de los síntomas (^{Bryan et al., 2020}). En este estudio, los 4 participantes con una prueba rRT-PCR positiva previa al inicio del estudio presentaron anticuerpos anti SARS CoV-2 al momento del inicio del estudio (Tabla 2). Lo anterior es coincidente con la sensibilidad reportada por Andrew Bryan y col.

Algunas de las limitantes en el estudio realizado dependen de la metodología utilizada y la debilidad del uso de ensayos dirigidos a la proteína de nucleocápside sobre la proteína de espícula. El ensayo utilizado en este estudio, de la casa comercial Abbott, para detección de anticuerpos IgG anti SARS-CoV-2 está diseñado para detectar inmunoglobulinas del tipo G (IgG), dirigidas a la proteína de la nucleocápside del SARS-CoV-2 (^{U.S. Food and Drug Administration., 2020}). Zeeshan Sidiq y col., mencionan en su estudio una mayor propensión a obtener reacciones cruzadas con otras especies de Coronavirus utilizando ensayos dirigidos a la proteína de nucleocápside, en lugar ensayos dirigidos a la proteína de espícula que ofrecen otras marcas comerciales (^{Siqid et al., 2020} ), por lo que pudiera darse la aparición de resultados falsos positivos, en personas que hayan tenido infección previa por Coronavirus diferente a SARS-CoV-2. No se estableció una tasa de reducción de anticuerpos, ya que sólo se cuenta con dos cuantificaciones por participante. Por lo anterior, únicamente se estableció el porcentaje de participantes que mantuvieron un valor URL de anticuerpos anti SARS-CoV-2 positivo después de 5 meses. En ese sentido, los resultados obtenidos son consistentes con la bibliografía revisada, respecto al tiempo de disminución o desaparición de estos anticuerpos IgG.

El personal que labora en el LaESaP presentó una seroprevalencia del 6% durante uno de los momentos con mayor incidencia de casos en la pandemia en México por SARS-CoV-2. Dicha seroprevalencia se puede considerar baja, al compararse con otros estudios de personal de salud expuesto al virus. Lo anterior puede deberse al adecuado uso de equipo de protección y buenas prácticas de laboratorio, así como a la implementación de medidas para mitigar el riesgo de contagio dentro y fuera del LaESaP, correlacionándose con el hecho de que ningún trabajador que ejecuta actividades del diagnóstico de COVID-19 presentó contagio.

Este estudio ayudará a ampliar la información sobre la seroprevalencia de anticuerpos anti SARS-CoV-2 en el personal de salud que trabaja muestras biológicas para diagnóstico de COVID-19 en los diferentes laboratorios públicos y privados que brindan este servicio durante la pandemia. Lo anterior en apoyo a la toma de decisiones sobre (priorización en la vacunación) factores de riesgo e implementación de estrategias para reducirlos.