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Acta médica Grupo Ángeles

versión impresa ISSN 1870-7203

Acta méd. Grupo Ángeles vol.17 no.2 México abr./jun. 2019  Epub 19-Mayo-2021

 

Imágenes en medicina

Tinción de Kinyoun para el diagnóstico de Cryptosporidium spp

Kinyoun stain for the diagnosis of Cryptosporidium spp

Brenda Janet Torres Murillo1  * 

Eva Melissa Collazo López1 

Juan Luis Mosqueda Gómez1  2 

José Antonio Álvarez Canales1  3 

José Aguirre Trigueros4 

1 Interno de Pregrado. Hospital Ángeles León. Universidad de Guanajuato, campus León. León, Guanajuato, México.

2 CAPASITS León. SSG. León, Guanajuato, México.

3 Laboratorio de Investigación en Microbiología Clínica. Hospital Regional de Alta Especialidad del Bajío, SSA. León, Guanajuato, México.

4 Jefe de Patología Clínica. Hospital Ángeles León. León, Guanajuato, México.


Paciente masculino de 49 años; acudió a la institución por presentar diarrea acuosa de tres meses de evolución, pérdida de peso e hipertermia no cuantificada, por lo que fue hospitalizado. En la exploración física se observó palidez, delgadez y presencia de placas blanquecinas en los carrillos y bordes laterales de la lengua; se sospechó VIH, que se confirmó con una prueba de ELISA en suero. Además, se encontró Cryptosporidium parvum en sus heces por tinción de Kinyoun. La cuenta de linfocitos T CD4+ fue de 20 células/μL. Se inició un tratamiento antirretroviral junto con trimetoprima/sulfametoxazol y claritromicina. El paciente mostró mejoría en los siguientes seis meses.

Las infecciones intestinales son causa de mortalidad hasta en 50% de los pacientes con VIH; en 2015 se reportaron 1.8 millones de muertes debido a complicaciones asociadas al VIH.1 Se estima que Cryptosporidium spp. es el responsable de 55% de los cuadros de diarrea severa en estos pacientes, la cual se asocia a conteos < 200 linfocitos T CD4+ células/μL.1

Cryptosporidium spp. es un protozoario intracelular obligado de tipo coccidio que infecta células epiteliales en las microvellosidades del sistema digestivo y respiratorio.2 Existen 13 especies de Cryptosporidium que pueden infectar al ser humano, las más frecuentes son C. hominis y C. parvum.3 Su principal manifestación es la diarrea de tipo acuoso, sin presencia de sangre o moco en las heces; se exacerba con la ingesta de alimentos y es de curso afebril y duración prolongada.4

El diagnóstico de la infección por Cryptosporidium spp. se realiza por medio de la detección de ooquistes en muestras fecales. Se utilizan las técnicas de PCR y la tinción ácido-alcohol resistente modificada de Kinyoun; esta última es la más económica, accesible y rápida en comparación con otras técnicas empleadas; tiene sensibilidad de 98% y especificidad de 98.3%.4,5

La preparación de la tinción es sencilla: se extiende la muestra fecal en una laminilla y se deja secar al aire, para después fijarla con calor o metanol. La muestra fijada se cubre con fucsina durante tres a cinco minutos; luego de este tiempo, se enjuaga con agua. El siguiente paso es decolorar con ácido-alcohol durante un minuto y enjuagar de nuevo con agua. Finalmente, se cubre con azul de metileno durante un minuto y se enjuaga. La laminilla se deja secar y se observa en un microscopio óptico de campo claro a 10X para enfoque y 100X para análisis. Se considera positiva cuando existe presencia de estructuras quísticas de color escarlata (Figura 1).

Figura 1: Ooquistes de Cryptosporidium parvum presentes en la muestra fecal con tinción ácido-alcohol resistente modificada de Kinyoun, caracterizados por estructuras quísticas. Objetivo: 100X, en un microscopio óptico de campo claro. 

El tratamiento antirretroviral en pacientes con VIH y sida disminuye la incidencia de diarrea por Cryptosporidium spp.1 En la actualidad, la nitazoxanida es el único fármaco antiparasitario empleado para esta infección; sin embargo, su eficacia disminuye en pacientes que presentan conteo celular bajo. Por ello, es importante realizar su diagnóstico oportuno a través de métodos accesibles y rápidos como la tinción de Kinyoun.

Referencias bibliográficas

1. Khalil S, Mirdha BR, Sinha S, Panda A, Singh Y, Joseph A et al. Intestinal parasitosis in relation to anti-retroviral therapy, CD4+ T-cell count and diarrhea in HIV patients. Korean J Parasitol. 2015; 53 (6): 705-712. doi: http://dx.doi.org/10.3347/kjp.2015.53.6.705. [ Links ]

2. Rodrigues RF, Aparecida RC, Silva AR, Matté M, Pires CR, Ibara TI et al. Intestinal and pulmonary infection by Cryptosporidium partum in two patients with HIV/AIDS. Rev Inst Med Trop Sao Paulo. 2016; 58: 21. doi: http://dx.doi.org/10.1590/S1678-9946201658021. [ Links ]

3. Sparks H, Nair G, Castellanos GA, White AC Jr. Treatment of Cryptosporidium: what we know, gaps, and the way forward. Curr Trop Med Rep. 2015; 2 (3): 181-187. doi: http://link.springer.com/article/10.1007%2Fs40475-015-0056-9. [ Links ]

4. Rivero RZ, Hernández A, Bracho A, Salazar S, Villalobos R. Prevalencia de microsporidios intestinales y otros enteroparásitos en pacientes con VIH positivo de Maracaibo, Venezuela. Biomédica. 2013; 4 (33): 538-545. doi: http://dx.doi.org/10.7705/biomedica.v33i4.1468. [ Links ]

5. Salleh FM, Al-Mekhlafi AM, Nordin A, Yasin’M, Al-Mekhlafi HM, Moktar N. Evaluation of gram-chromotrope kinyoun staining technique: its effectiveness in detecting microsporidial spores in fecal specimens. Diagn Microbiol Infect Dis. 2011; 69 (1): 82-85. doi: http://dx.doi.org/10.1016/j.diagmicrobio.2010.08.028. [ Links ]

Aprobado: 04 de Junio de 2018

*Autor para correspondencia: Brenda Janet Torres Murillo. Correo electrónico: bren20.to@gmail.com.

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