Notas de Investigación

 

Neumonía lipídica endógena en tlacuaches (Didelphis virginiana) capturados en el estado de Colima, México

 

Endogenous lipid pneumonia in opossum (Didelphis virginiana) captured in the state of Colima, Mexico

 

Luis Jorge García Márquez* Rubén Arturo López Crespo** Alfonso López Mayagoitia*** Omar Francisco Prado Rebolledo**

 

* Centro Universitario de Investigación y Desarrollo Agropecuario (CUIDA) Crucero de Tecomán, km 40 carretera Colima-Manzanillo, 28100 Teléfono 313 32 2 94 13. e-mail: ljgm_cmv@hotmail.com.

** Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad de Colima. México. Crucero de Tecomán, km 40 carretera Colima-Manzanillo, 28100 Teléfono 313 32 2 94 07. e-mail: mvzrubenlopez@hotmail.com

*** Department of Pathology and Microbiology Atlantic Veterinary College. University of Prince Edward Island. 550 University Ave. Charlottetown, PEI. Canada C1A 4P3 Tel: (902) 566 0943 e-mail: lopez@upei.ca

 

Responsable de correspondencia:
Luis Jorge García Márquez, tel.: 313 32 2 94 13,
correo electrónico: ljgm_cmv@hotmail.com

 

Recibido el 16 de diciembre de 2011
Aceptado el 12 de julio de 2012.

 

Abstract

Endogenous lipid pneumonia was found in 11 out of 15 (73.3%) opossums (Didelphis virginiana) captured in six municipalities from the state of Colima, Mexico. Macroscopically, multifocal yellow white subpleural plaques were found in the dorsocaudal region of both lungs. These lesions were extended to the pulmonary parenchyma. Microscopically, they were characterized by aggregates of macrophages in the alveolar walls and spaces. These macrophages had small lipid vacuoles in the cytoplasm. Also, hyperplasia of pneumocytes type II, perivascular lymphoid hyperplasia, emphysema and fibrosis were discovered. Based on these findings, endogenous lipid pneumonia was diagnosed, which seemed to be associated in 11 (73.3%) opossums with the presence of Didelphostrongylus hayesi in lungs.

Key words: Opossum, Didelphis virginiana, endogenous lipid pneumonia, Didelphostrongylus hayesi

 

Resumen

Se encontró neumonía lipídica endógena en 11 (73.3%) de 15 tlacuaches (Didelphis virginiana) capturados en seis municipios del estado de Colima, México. Macroscópicamente se observaron placas subpleurales multifocales (1-5 mm) de color amarillo pálido en la región dorso caudal de ambos pulmones. Estas lesiones se extendían al parénquima pulmonar. Microscópicamente se caracterizaban por agregados de macrófagos en los espacios y paredes alveolares. Los macrófagos tenían abundantes vacuolas pequeñas lipídicas en el citoplasma. También se observó hiperplasia de neumocitos tipo II, hiperplasia linfoide perivascular, enfisema y fibrosis. Con base en estos hallazgos se diagnosticó neumonía lipídica endógena, la cual parecía estar asociada en 11 de los tlacuaches, con la presencia de Didelphostrongylus hayesi en los pulmones.

Palabras clave: Tlacuaches, Didelphis virginiana, neumonía lipídica endógena, Didelphostrongylus hayesi.

 

Introducción

La neumonía lipídica es una enfermedad respiratoria poco frecuente, caracterizada por la acumulación de abundantes macrófagos llenos de lípidos en los espacios alveolares y en el intersticio pulmonar.¹ La neumonía lipídica se clasifica, de acuerdo con el origen del lípido pulmonar, en dos tipos: exógena y endógena. La primera se debe a la aspiración de lípidos, como sucede en una intubación naso-esofágica mal hecha en la que se administra aceite mineral a los pulmones.^1,2 La otra forma es la neumonía lipídica endógena, cuando la acumulación de lípidos se debe a una excesiva producción de lípidos, aunada a un deficiente metabolismo de estas sustancias en el pulmón.¹ Este último tipo de neumonía lipídica es generalmente idiopática, es decir, se desconoce la causa primaria de las alteraciones en el metabolismo de los lípidos.² La forma endógena también se asocia con obstrucción bronquial como sucede en pulmones con parásitos pulmonares, exudados y neoplasias. La obstrucción de las vías aéreas interfiere con la eliminación normal de lípidos pulmonares a través de la carpeta mucociliar.³ La neumonía lipídica endógena se ha presentado en humanos, ratas y ratones, gatos, perros, llamas, osos, hurones, mapaches y tlacuaches.^4-14 En México, no existen descripciones de neumonía lipídica endógena en animales domésticos y silvestres. Este informe describe la neumonía lipídica endógena en un grupo de tlacuaches (Didelphis virginiana) en el estado de Colima, México.

Se recolectaron 15 tlacuaches (Didelphis virginiana) con trampas-jaulas tipo Tomahawk de 12" × 24" × 42" utilizando sardina enlatada como cebo. Se les aplicó la eutanasia con una sobredosis de anestésico intraperitoneal (Pentobarbital sódico) en dosis de 3 ml/2.5 kg de peso vivo. Se realizó necropsia de rutina. Se extrajeron los pulmones y se examinaron macroscópicamente. Las muestras de pulmón se fijaron en formalina amortiguada al 10%, pH 7.2, y las muestras se procesaron con la técnica histológica de rutina, con cortes de 6 µm de espesor teñidos con hematoxilina y eosina.¹⁵

Se extrajeron tres fragmentos de pulmón de 3 mm², fijados previamente en formalina al 10%, los cuales fueron desparafinados e hidratados y posteriormente fijados con glutaraldehído al 2.5% y fijados con tetraóxido de osmio al 1% por 2 horas; posteriormente se lavaron con solución amortiguada de cacodilatos con pH de 7.2 a 0.1 M. Las muestras se deshidrataron con concentraciones ascendentes de acetona, se incluyeron en resinas epóxicas* (Epón 812) y finalmente se polimerizaron a 60°C por 24 horas. Se realizaron cortes semifinos de 200 µm de grosor utilizando un ultramicrotomo y se montaron en laminillas, teñidas con azul de toluidina. Se realizaron cortes finos de 60 µm, los cuales se montaron en rejillas de cobre y finalmente se contrastaron con acetato de uranilo y citrato de plomo, se observaron en un microscopio electrónico de transmisión.^16*

De los 15 tlacuaches examinados, 11 (73.3%) presentaron neumonía lipídica endógena, caracterizada por placas bilaterales de color amarillo pálido de 1-5 mm de diámetro, presentes tanto en la región subpleural como dentro del parénquima pulmonar. Estas lesiones nodulares estaban distribuidas al azar, pero se observaban con más frecuencia en la región dorsal de los lóbulos caudales (Figura 1).

Al corte, 11 (73.3%) de 15 pulmones presentaron macroscópicamente una dilatación bronquial con exudado mucopurulento y el parásito adulto de Didelphostrongylus hayesi. Las lesiones histológicas observadas consistieron en una acumulación de macrófagos con abundantes vacuolas pequeñas de lípidos en su citoplasma. Estos macrófagos se infiltraron en las paredes y en los espacios alveolares (Figura 2 y 3). En algunos casos se observó también enfisema alveolar, hiperplasia de neumocitos II e hiperplasia linfoide perivascular. En los bronquios y en el parénquima pulmonar se observaron nematodos Didelphostrongylus hayesi (Figura 4), ocasionando una reacción granulomatosa eosinofílica con metaplasia de las células caliciformes. Los pulmones afectados también mostraban hipertrofia e hiperplasia del músculo liso y fibrosis focal intersticial.

Las placas lipídicas, ultraestructuralmente consistieron en infiltrados de numerosos macrófagos con abundante citoplasma, el cual mostraba numerosas vacuolas ligeramente electrolúcidas de diferentes tamaños (sugerentes a lípidos). El retículo endoplásmico era de tipo rugoso dilatado y con abundantes estructuras redondas con discreta dilatación de la cisterna nuclear, con abundante heterocromatina electrodensa (Figura 5).

Los tlacuaches con neumonía lipídica endógena (NLE) no presentaron signos clínicos de enfermedad respiratoria, lo cual también se ha observado en humanos, animales domésticos y silvestres, como una neumonía incidental y subclínica.^4-13

La NLE se presenta con frecuencia en animales de laboratorio, por ejemplo, en las ratas ocurre espontáneamente con una frecuencia que varía entre 0-55%.^5,17 Este tipo de neumonía también se ha registrado en gatos⁶ y raramente en perros.⁷ En animales silvestres se ha observado en mapaches, llamas, osos, hurones y tlacuaches.^8-13

En 19 de 27 tlacuaches (Didelphis virginiana) atrapados en Baton Rouge, Louisiana, se ha registrado NLE.¹³ La frecuencia, así como el tipo de lesiones neumónicas son semejantes a las registradas en este caso, lo que indica que es una lesión común en esta especie animal. La causa de NLE en tlacuaches (D. virginiana) posiblemente esté asociada con una obstrucción bronquial y bronquiolar causada por parásitos pulmonares (D. hayesi).^18,19

En humanos, se describe proteinosis alveolar que es un proceso muy similar al que se presenta en gatos y perros, pero la patogenia es muy parecida y se han descrito tres formas clínicas: congénita o primaria, en la que se observan alteraciones genéticas que alteran la homeostasis de los fosfolípidos; la secundaria, asociada con procesos neoplásicos hematológicos, irritantes, tabaco, fármacos inmunodepresores, parásitos y algunas otras infecciones que alteran el número y función de los macrófagos alveolares y la forma adquirida o idiopática, actualmente considerada autoinmune, en la que se observan anticuerpos anti factor estimulante de colonias granulomonocíticas (GM-CSF), que es la responsable de la diferenciación de los macrófagos alveolares y neumocitos tipo II.²⁰

La hipótesis es que D. hayesi obstruye los bronquios y causa lesiones en las paredes alveolares, lo que provoca necrosis de neumocitos tipo I, seguido por hiperplasia de los neumocitos tipo II y éstos aumentan la producción de fosfolípidos, que se acumulan para ser finalmente fagocitados por macrófagos alveolares. Una vez dentro del citoplasma, el fosfolípido alveolar se almacena en los fagolisosomas dando lugar a la formación de vacuolas. Sin embargo, sería necesario hacer estudios más detallados para confirmar esta hipótesis. Si esta hipótesis fuese aceptada podrían usarse tlacuaches (D. virginiana) como modelo experimental para estudiar NLE.

 

Agradecimientos

Se agradece el apoyo de la Dra. Adriana Méndez Bernal, por el procesamiento de Microscopía Electrónica y al Técnico Víctor Montaño Plasencia por el procesamiento histológico. Este proyecto 770/11 fue financiado por el Fideicomiso de Ramón Álvarez Bullya de Aldana (FRABA), Universidad de Colima.

 

Referencias

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NOTAS

* Shell Chemical Co., Estados Unidos de América.

* Zeiss West Germany. Carl Zeiss 7082 Oberkochen.