SciELO - Scientific Electronic Library Online

 
vol.37 número2Desinfestación reductiva, suelo desecado y Trichoderma harzianum para controlar Phymatotrichopsis omnivora en vivero de nogal pecaneroCambios ultraestructurales en blastosporas de Taphrina caerulescens en presencia de hospedante susceptible y no susceptible índice de autoresíndice de materiabúsqueda de artículos
Home Pagelista alfabética de revistas  

Servicios Personalizados

Revista

Articulo

Indicadores

Links relacionados

  • No hay artículos similaresSimilares en SciELO

Compartir


Revista mexicana de fitopatología

versión On-line ISSN 2007-8080versión impresa ISSN 0185-3309

Rev. mex. fitopatol vol.37 no.2 Texcoco may. 2019  Epub 30-Sep-2020

https://doi.org/10.18781/r.mex.fit.1901-1 

Notas Fitopatológicas

Inductores de resistencia vegetal en el control de Candidatus Liberibacter asiaticus en árboles de limón (Citrus aurantifolia) mexicano

Jesús Rafael Trinidad-Cruz1 

Gabriel Rincón-Enríquez1 

Evangelina Esmeralda Quiñones-Aguilar1  * 

Ángela Paulina Arce-Leal2 

Norma Elena Leyva-López2 

1 Laboratorio de Fitopatología de la línea de Biotecnología Vegetal, Centro de Investigación y Asistencia en Tecnología y Diseño del Estado de Jalisco A.C., El Bajío del Arenal, C.P. 45019, Zapopan, Jalisco, México;

2 CIIDIR, Unidad Sinaloa, Departamento de Biotecnología Agrícola, Instituto Politécnico Nacional, Bulevar Juan de Dios Bátiz Paredes No. 250, C.P. 81101, San Joachín, Guasave, Sinaloa, México.


Resumen.

El Huanglongbing representa un gran reto para su control, por lo que se requiere de alternativas efectivas a la aplicación de insecticidas al insecto vector. La inducción de resistencia sistémica es una alternativa para disminuir el progreso de la enfermedad en árboles infectados. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto de inductores de resistencia sistémica sobre la concentración de ʻCandidatus Liberibacter asiaticusʼ (CLas) en árboles de limón mexicano (Lm) en condiciones de invernadero. Los inductores de resistencia utilizados fueron ácido salicílico (T1), Azospirillum brasilense Cd (T2) y quitosano (T3), aplicados cada 20 días durante ocho meses. La cuantificación de CLas fue mediante qPCR. La concentración de CLas se determinó a los 1, 2, 5 y 8 meses pos-tratamiento. A los 8 meses pos-tratamiento, T1 y T3 no presentaron diferencias postratamiento en la reducción postratamiento de la concentración de CLas con respecto al control sin inductor (T4) (6.5×103 células bacterianas/100 ng de ADN), mientras que T2 disminuyó casi tres veces la concentración de CLas con respecto al control. La inoculación directa al suelo de A. brasilense Cd mostró un efecto significativo en la reducción de la concentración de CLas en los árboles de Lm en condiciones de invernadero.

Palabras clave: Ácido salicílico; Azospirillum brasilense; HLB; quitosano; bacterias promotoras de crecimiento

Abstract.

The Huanglongbing represents a great challenge for its control, thus, effective alternatives are required to the application of insecticides to the vector insect. The induction of systemic resistance is an alternative to decrease the progress of the disease in infected trees. The objective of this work was to evaluate the effect of inductors of systemic resistance on the concentration of ʻCandidatus Liberibacter asiaticusʼ (CLas) in Mexican lemon trees (Lm) under greenhouse conditions. The resistance inductors used were salicylic acid (T1), Azospirillum brasilense Cd (T2) and chitosan (T3), applied every 20 days for eight months. The quantification of CLas was through qPCR. The CLas concentration was determined at 1, 2, 5 and 8 months after treatment. At 8 months pos-treatment, T1 and T3 did not present significant differences in the reduction of CLas concentration with respect to control without inductor (T4) (6.5×103 bacterial cells/100 ng of DNA), whereas T2 decreased almost three times the titer of CLas with respect to control. Direct soil inoculation of A. brasilense Cd showed a significant effect in the reduction of CLas concentration in Lm trees under greenhouse conditions.

Key words: Salicylic acid; Azospirillum brasilense; HLB; chitosan; growth promoting bacteria

México es el segundo productor y exportador a nivel mundial de limón. En el 2017, las exportaciones de limón generaron divisas por 500 millones de dólares (SIAP, 2018). A pesar de lo anterior, las enfermedades debidas a fitopatógenos asociados a los cítricos afectan el rendimiento del cultivo y; por lo tanto, el valor de la producción. El Huanglongbing (HLB), asociada a la α-Proteobacteria Candidatus Liberibacter spp., es una enfermedad devastadora de los cítricos y desde su introducción en América ha representado un reto para su control (Wang y Trivedi, 2013). En México, Robles-González et al. (2013) reportaron pérdidas en el rendimiento de frutos (kg árbol-1) de hasta el 40% en árboles de limón mexicano que presentaban síntomas de la enfermedad en más del 75% de su copa con respecto a árboles asintomáticos. El manejo tradicional para el control del HLB consiste en el control químico o biológico del insecto vector, la eliminación de árboles enfermos para reducir el inóculo y la producción de patrones e injertos libres de HLB, sin embargo, estas medidas no han sido completamente efectivas (Hall y Gottwald, 2011). Por otra parte, se han desarrollado estrategias alternativas para retrasar el progreso de la enfermedad y mantener el rendimiento de los cítricos, estas estrategias consisten en programas de nutrición mejorada (Gottwald et al., 2012), la aplicación de antibióticos (Zhang et al., 2011) e inductores de resistencia (Hu et al., 2018). La inducción de resistencia sistémica adquirida (SAR) o inducida (ISR) confieren protección o disminución de la severidad de la enfermedad contra un amplio espectro de fitopatógenos (Walters et al., 2013). El uso de inductores químicos en evaluaciones de campo se ha reportado para el manejo del HLB con efectos significativos en la reducción de la concentración de ʻCandidatus Liberibacter asiaticusʼ (CLas) y del progreso de la enfermedad tanto en aspersión foliar (Li et al., 2016) como en inyección directa al tronco (Hu et al., 2018). Hu et al. (2018) demostraron en pruebas de campo que la inyección directa al tronco de árboles de naranja dulce ʻHamlinʼ (Citrus sinensis) con ácido salicílico (0.8 g/árbol) disminuyó significativamente la concentración de CLas en un 65.8% con respecto al control inyectado con agua. El quitosano es bien conocido como un elicitor de la respuesta de los mecanismos de defensa en plantas, tales como, cambios en la acumulación de proteínas PR, enzimas y metabolitos secundarios relacionados con la defensa (Xing et al., 2015). Algam et al. (2010) demostraron que el pretratamiento de semillas de tomate cv. Hezou con quitosano (10 mg mL-1), dos semanas antes de la inoculación de Ralstonia solanacearum Rs-f.91, redujo significativamente un 31% la incidencia de la marchitez con respecto al control, además del aumento en la actividad de proteínas PR como quitinasa y β-1,3-glucanasa. Por otra parte, el uso de bacterias promotoras de crecimiento de plantas (BPCP) como inductores de resistencia sistémica para el control del HLB ha sido reportado. Tang et al. (2018) demostraron que la tasa de árboles enfermos de CLas disminuyó el 50% cuando se irrigaron las raíces de árboles de C. sinensis con Bacillus amyloliquefaciens GJ1 en condiciones de invernadero. El uso de ácido salicílico, quitosano y de BPCP puede ser una alternativa práctica para la inducción de resistencia en árboles de limón mexicano para el control del HLB. Por lo anterior, el objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de inductores de resistencia sistémica sobre la concentración de ʻCandidatus Liberibacter asiaticusʼ en árboles de limón mexicano en condiciones de invernadero.

Se utilizaron árboles de limón mexicano (Citrus aurantifolia) injertados sobre el portainjerto de limón volkameriano (Citrus volkameriana) de nueve meses de edad. Los árboles fueron colocados en macetas de 40 L de capacidad con 25 L de una mezcla de sustrato de turba de esfagno-tierra de río-perlita (3:3:4/v:v). Los árboles permanecieron en condiciones de invernadero con luz natural entre 23-28 °C y 31-45% de HR. Los árboles de limón fueron fertilizados cada 20 días aplicando 3 L de una solución nutritiva que contenía 0.25 g L-1 de sulfato de magnesio, nitrato de calcio y nitrato de potasio, 0.15 mL L-1 de ácido fosfórico y 0.1 g L-1 de micronutrientes (Microfol® Combi P.S.); además cada seis meses se aplicó 40 g de fosfato monoamónico por planta. El control de plagas fue de manera química (AK-20® 2 mL L-1, Muralla Max® 0.5 mL L-1, Oberon® 2 mL L-1 y Talstar® 2 mL L-1) y orgánica previo al experimento (GreenCorp: eBioluzion® PlusvO 5 mL L-1, Akabrown® 5 mL L-1 y Specktron Plus 5 mL L-1) para insectos como araña roja, minador y pulgón cuando fue necesario. Los árboles de limón mexicano fueron inoculados por medio de injertos de yema de 2 a 3 cm de largo (Figuras 1A y 1B) obtenidas de varetas de árboles PCR positivos a CLas con síntomas característicos del HLB (Bové, 2006), considerado como un método eficiente de transmisión del patógeno (Coletta-Filho et al., 2010). La fuente de inóculo se recolectó en febrero de 2013 en una huerta de limón mexicano en Tecomán, Colima.

Previo al establecimiento del experimento, a los árboles de limón mexicano infectados a través de la inoculación con injertos de yema, cuatro meses después se les determinó la concentración de CLas por medio de la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa (qPCR) del ADN en tiempo real con la finalidad de iniciar el experimento con árboles que presentaran una concentración similar y así homogenizar esta variable entre los diferentes tratamientos. De cada árbol se recolectó la quinta hoja madura descendente del ápice de siete varetas. Las hojas fueron congeladas con nitrógeno líquido, liofilizadas durante 72 h y pulverizadas en un molino TissueLyser II (QIAGEN, Hilden, Germany) durante 1 min a 30 Hz. 20 mg del tejido liofilizado y molido fueron utilizados para la extracción de ADN genómico por el método de CTAB previamente descrito por Zhang et al. (1998) con ligeras modificaciones (Arratia-Castro et al., 2014). La concentración y pureza del ADN fue evaluado con un espectrofotómetro NanoDrop ND-2000 UV-Vis Spectrophotometer (NanoDrop Technologies, Wilmington, DE, USA). Las muestras de ADN fueron ajustadas a 20 ng µL-1 y almacenadas a -20 °C hasta su posterior uso. Para la cuantificación de CLas, todos los ensayos de qPCR fueron realizados mediante la combinación de PCR anidado y PCR TaqMan® en un solo tubo (Lin et al., 2010). Todos los ensayos de qPCR fueron realizados en un termociclador 7500 Fast Real-Time PCR System (Applied Biosystems, Foster City, CA). Dos repeticiones técnicas de cuatro repeticiones biológicas fueron utilizadas para los ensayos de qPCR. Cada reacción de qPCR fue realizada en un volumen de 25 µL que consistió en 12.5 µL de TaqMan® master mixture (ABI, Foster City, CA), 0.5 µL de iniciadores externos Las O-F y Las O-R (0.5 pmol), 0.2 µL de iniciadores internos Las I-F y Las I-R (20 pmol), 0.5 µL de la sonda Las-P TaqMan® (10 pmol), 5 µL de ADN (100 ng) y 5.6 µL de agua ultra pura. Las condiciones de la PCR anidada fueron: 50 °C durante 2 min y 95 °C durante 2 min, seguido de 20 ciclos de 95 °C durante 30 s, 67 °C durante 45 s y 72 °C durante 45 s, posteriormente 35 ciclos de 95 °C durante 30 s, 57 °C durante 45 s y 72 °C durante 45 s. La señal de fluorescencia se registró al final de cada paso de 57 °C durante la segunda ronda de PCR (Lin et al., 2010). Los valores de Ct fueron convertidos en concentración de células de CLas utilizando una curva estándar descrita previamente por Lin et al. (2010) mediante el Software 7500 System SDS versión 2.0.5. Después de determinar la concentración inicial de CLas por árbol, se seleccionaron árboles con concentraciones de entre 610 a 1700 células bacterianas/100 ng de ADN y se distribuyeron aleatoriamente entre los diferentes tratamientos (cuatro árboles por tratamiento). En la Figura 1C, se muestra el experimento en invernadero que se realizó de junio de 2013 a febrero de 2014.

Los inductores de resistencia probados en condiciones de invernadero fueron quitosano (0.01%), ácido salicílico (5 mM) y Azospirillum brasilense Cd (2×107 ufc g-1 de sustrato). El quitosano (quitosano≥75% desacetilación, Sigma-Aldrich®) fue preparado como stock al 1%: 5 g de quitosano fueron disueltos en 100 mL de ácido acético al 1% y después el volumen fue ajustado a 500 mL con ácido acético al 1%. La solución stock de quitosano fue ajustada a un pH de 5.75 (NaOH 1M) y esterilizada a 121 °C durante 20 min. El ácido salicílico fue preparado como solución stock a 75 mM. El quitosano y ácido salicílico fueron aplicados de manera foliar con un aspersor manual (Swissmex®) de 5.5 L de capacidad de manera individual de entre 15 a 20 mL por planta (Figura 1D). Azospirillum brasilense Cd fue crecida en caldo NFb (nitrogen free broth) (Döbereiner et al., 1976) durante 16 h a 30 °C a 200 rpm. La solución con la rizobacteria fue ajustada a una concentración 2×107 ufc g-1 de sustrato y se aplicó de manera directa al sustrato en la rizosfera de las plantas. Los inductores fueron aplicados cada 20 días durante ocho meses. Se utilizó un diseño completamente al azar con cuatro repeticiones por tratamiento. Los tratamientos fueron los siguientes: T1 ácido salicílico; T2 Azospirillum brasilense Cd; T3 quitosano y T4 sin inductor. El efecto de los inductores de resistencia en la disminución del patógeno fue evaluado mediante la determinación de la concentración de CLas por qPCR como se describió anteriormente a los 1, 2, 5 y 8 meses postratamiento. La variable concentración de CLas fue analizada mediante un análisis de varianza (ANOVA) y una comparación de medias con la prueba de diferencia mínima significativa (LSD) utilizando el paquete estadístico StatGraphics Centurion XV (StatPoint Inc., 2005).

Figura 1 Inoculación de la bacteria ʻCandidatus Liberibacter asiaticusʼ (CLas) en plantas de limón mexicano (Citrus au rantifolia) por injerto de yema (A y B). Experimento de inductores de resistencia en la concentración de CLas en condiciones de invernadero (C) y forma en que se ve la aplicación foliar de las soluciones de inductores (D). 

Para evaluar el efecto en la disminución de la concentración de CLas en los árboles de limón mexicano, dos inductores fueron aplicados de manera foliar (ácido salicílico y quitosano) y A. brasilense Cd al suelo cada 20 días durante 8 meses en condiciones de invernadero. Previo al inicio del experimento, no se encontraron diferencias estadísticas significativas en la concentración de CLas (datos no mostrados), por lo que, todos los tratamientos iniciaron con concentraciones similares, sin embargo, al concluir el primer mes postratamiento se empezaron a observar diferencias entre los tratamientos en la velocidad de incremento en la concentración de CLas (Figura 2). A los 2 meses postratamiento, el T3 quitosano presentó la menor concentración de CLas (643 células bacterianas/100 ng de ADN) con respecto al T4 sin inductor. A los 5 meses postratamiento, los tres inductores de resistencia aplicados mostraron una reducción significativa (LSD, p≤0.05) en la concentración de CLas de poco más de dos veces con respecto al T4 sin inductor (Figura 2). Finalmente, a los 8 meses postratamiento el T3 Azospirillum brasilense Cd mostró un efecto significativo en la reducción del incremento de la concentración de CLas de casi tres veces menos que el T4 sin inductor (Figura 2). El T3 quitosano presentó un efecto de reducción en la concentración de CLas a los 2 y 5 meses postratamiento, sin embargo, a los 8 meses postratamiento la concentración de CLas en este tratamiento fue estadísticamente similar al T4 sin inductor. Con respecto al tratamiento sin aplicación de inductor (T4), el progreso de la concentración de CLas fue incrementado a través del tiempo sin manifestarse alguna reducción. Al final del experimento, el valor promedio para la concentración de CLas fue de 6499 células bacterianas/100 ng de ADN para el T4 sin inductor, mientras que para los tres tratamientos con inductores fue de entre 2253 a 6463 células bacterianas/100 ng de ADN (Figura 2). Se conoce que la aplicación de inductores químicos o biológicos proveen de un impulso a la resistencia sistémica o local cuando la planta es confrontada contra algún fitopatógeno, disminuyendo la severidad de la enfermedad (Walters et al., 2013). En condiciones de campo, Hu et al. (2018) demostraron que la aplicación de ácido salicílico (0.8 g/árbol) vía inyección al tronco en árboles de naranja dulce (C. sinensis) disminuyó significativamente la concentración de CLas con respecto al tratamiento control (inyección con agua). En este estudio, la aplicación foliar de ácido salicílico redujo la concentración de CLas a los 5 meses postratamiento, sin embargo, a los 8 meses postratamiento, aunque el efecto de reducción de la concentración continuó, este tratamiento no superó al tratamiento con Azospirillum en la rizosfera de limón, donde se encontraron diferencias estadísticas significativas con respecto al control sin inductor (T4). Al respecto, Li et al. (2017) demostraron que en CLas, el gen sahA codifica la síntesis de la enzima salicilato hidroxilasa capaz de degradar el ácido salicílico y sus análogos (Li et al., 2017). Además, Li et al. (2017) demostraron que la aplicación foliar de ácido salicílico (1 mM) en árboles de naranja dulce, sanos e infectados con CLas, incrementó la expresión de genes PR y la acumulación de ácido salicílico. Sin embargo, la expresión de los genes PR y la acumulación de ácido salicílico fue significativamente menor en los árboles infectados con CLas, mientras que la aplicación foliar de ácido 2,6-dicloro-isonicotínico y benzotiadiazol (inductores de SAR) mostró un patrón de expresión de los genes PR similar entre los árboles sanos e infectados con CLas, estas moléculas no son degradadas por la enzima salicilato hidroxilasa (Li et al., 2017). A diferencia de lo reportado por Hu et al. (2018), la inyección directa al tronco del ácido salicílico puede superar la degradación por la enzima salicilato hidroxilasa, esto fue demostrado con el incremento en la expresión de los genes PR-1 y PR-2 en árboles de naranja tratados con ácido salicílico con respecto al control inyectado con agua. Al respecto Hu et al. (2018) menciona que la aplicación foliar de ácido salicílico presenta algunas desventajas como la degradación y la baja absorción del mismo ácido, por parte de la planta, lo que podría estar ocurriendo en los resultados de este trabajo.

Figura 2 Efecto de inductores de resistencia y Azospirillum brasilense en la concentración de ʻCandidatus Liberibacter asiaticusʼ en arboles de limón mexicano en condiciones de invernadero. Las barras en cada rectángulo indican el error estándar (n=4 repeticiones); valores con la misma letra en cada rectángulo por mes son estadísticamente iguales (LSD, p≤0.05). 

Por otra parte, se ha demostrado que el quitosano tiene la capacidad de inducir los mecanismos de defensa vegetal; sin embargo, su mecanismo de acción en la inducción de resistencia no ha sido completamente elucidado, además de que puede variar la respuesta dependiendo del patosistema, así como de otros factores (Orzali et al., 2017) como el tipo de quitosano y la forma de preparación o almacenamiento de la solución. En este estudio, la aplicación de A. brasilense Cd mostró una reducción en la concentración de CLas. La resistencia sistémica inducida (ISR) por bacterias promotoras de crecimiento de plantas (BPCP) podría proveer una alternativa para el control del HLB. Tang et al. (2018) aislaron, a partir de hojas sanas de naranja navel (C. sinensis) cv. ʻNewhallʼ, un potencial agente de control biológico para el HLB identificado como B. amyloliquefaciens GJ1. En pruebas en invernadero, plantas de naranja navel enfermas de HLB fueron irrigadas con 1.5 L de la solución de B. amyloliquefaciens GJ1 (OD600 ≈1) cada semana, después de siete irrigaciones, B. amyloliquefaciens GJ1 redujo el 50% de plantas con presencia del patógeno (Tang et al., 2018). Se ha demostrado que la capacidad para inducir resistencia o tolerancia en las plantas depende de la BPCP (Jain et al., 2014). Al respecto, Riera et al. (2018) probaron la efectividad de siete aislamientos bacterianos inoculados a las raíces de árboles ʻDuncanʼ grapefruit en el control del cancro de los cítricos, encontrando que los aislados Burkholderia territorri A63, B. metallica A53 y Pseudomonas geniculata 95 redujeron significativamente la severidad de la enfermedad con respecto a las plantas control. Por otro lado, Zhang et al. (2017) encontraron que, al inocular árboles de naranjo dulce cv. Valencia con las bacterias B. metallica A53 y B. territori A63 se incrementó la expresión relativa de genes PR1, PR2 y SAM, dependiendo de la bacteria y el tiempo después de la inoculación. Bajo este contexto, para la continuación de este estudio sería importante evaluar si la disminución de la concentración de CLas en los árboles de limón mexicano por efecto de A. brasilense Cd, está relacionada con la expresión de genes relacionados con los mecanismos de defensa vegetal. En nuestro experimento, algunos productos utilizados para el control de plagas aplicados a todos los árboles de limón durante los primeros cuatro meses cuando fue necesario, previo al inicio del experimento, podrían haber contribuido a la inducción de resistencia. Estudios previos han demostrado que algunos componentes de estos productos son capaces de inducir resistencia como el imidacloprid (Francis et al., 2009), algunos aceites esenciales (Banani et al., 2018) y extractos vegetales (Fought y Kuć, 1996; Khoa et al., 2017). A pesar de lo anterior, en nuestro experimento el tratamiento sin inductor (T4) no mostró un efecto significativo en la disminución de CLas después de 8 meses de no haberse aplicado estos productos.

En conclusión, el ácido salicílico y el quitosano evaluados como inductores de resistencia, aplicados de manera foliar, presentaron menor efectividad en disminuir la velocidad de incremento de la concentración de ʻCandidatus Liberibacter asiaticusʼ en limón mexicano. La inoculación de A. brasilense Cd en la rizosfera de limón mexicano mostró un efecto significativo en la reducción de la concentración de CLas en condiciones de invernadero. La inducción de resistencia sistémica a través de BPCP como A. brasilense en cítricos podría ser una alternativa para mitigar los efectos del HLB manteniendo la productividad del árbol por más tiempo al reducir el progreso de la enfermedad. Se sugiere la inoculación de A. brasilense Cd en cítricos, en condiciones de campo, para evaluar la inducción de resistencia a través de la expresión de genes implicados en la defensa vegetal en árboles enfermos y mostrar la disminución de la concentración de CLas.

Agradecimientos

Al Fondo Mixto del gobierno del estado de Michoacán y al CONACYT por el financiamiento del Proyecto: “Efecto de distintos bioprotectores en el desarrollo de la enfermedad del HLB (HuanLongBing) en limón mexicano del estado de Michoacán” (MICH-2012-03-193066).

Literatura citada

Algam SAE, Xie G, Li B, Yu S, Su T and Larsen J. 2010. Effects of Paenibacillus strains and chitosan on plant growth promotion and control of Ralstonia wilt in tomato. Journal of Plant Pathology 92:593-600. Disponible en línea: http://www.sipav.org/main/jpp/index.php/jpp/article/view/303Links ]

Arratia-Castro AA, Santos-Cervantes ME, Fernández-Herrera E, Chávez-Medina JA, Flores-Zamora GL, Camacho-Beltrán E, Méndez-Lozano J and Leyva-López NE. 2014. Occurrence of ʻCandidatus Phytoplasma asterisʼ in citrus showing Huanglongbing symptoms in Mexico. Crop Protection 62:144-151. http://dx.doi.org/10.1016/j.cropro.2014.04.020 [ Links ]

Banani H, Olivieri L, Santoro K, Garibaldi A, Gullino ML and Spadaro D. 2018. Thyme and savory essential oil efficacy and induction of resistance against Botrytis cinerea through priming of defense responses in apple. Foods 7:11. http://dx.doi.org/10.3390/foods7020011 [ Links ]

Bové JM. 2006. Huanglongbing: A destructive, newly-emerging, century-old disease of citrus. Journal of Plant Pathology 88:7-37. Disponible en línea: http://www.sipav.org/main/jpp/index.php/jpp/article/view/828Links ]

Coletta-Filho HD, Carlos EF, Alves KCS, Pereira MAR, Boscariol-Camargo RL, de Souza AA and Machado MA. 2010. In planta multiplication and graft transmission of ‘Candidatus Liberibacter asiaticus’ revealed by Real-Time PCR. European Journal of Plant Pathology 126:53-60. http://dx.doi.org/10.1007/s10658-009-9523-2 [ Links ]

Döbereiner J, Marriel IE and Nery M. 1976. Ecological distribution of Spirillum lipoferum Beijerinck. Canadian Journal of Microbiology 22:1464-1473. http://dx.doi.org/10.1139/m76-217 [ Links ]

Fought L and Kuć JA. 1996. Lack of specificity in plant extracts and chemicals as inducers of systemic resistance in cucumber plants to anthracnose. Journal of Phytopathology 144:1-6. http://dx.doi.org/10.1111/j.1439-0434.1996.tb01479.x [ Links ]

Francis MI, Redondo A, Burns JK and Graham JH. 2009. Soil application of imidacloprid and related SAR-inducing compounds produces effective and persistent control of citrus canker. European Journal of Plant Pathology 124:283-292. http://dx.doi.org/10.1007/s10658-008-9415-x [ Links ]

Gottwald TR, Graham JH, Irey MS, McCollum TG and Wood BW. 2012. Inconsequential effect of nutritional treatments on Huanglongbing control, fruit quality, bacterial titer and disease progress. Crop Protection 36:73-82. http://dx.doi.org/10.1016/j.cropro.2012.01.004 [ Links ]

Hall DG and Gottwald TR. 2011. Pest management practices aimed at curtailing citrus Huanglongbing disease. Outlooks on Pest Management 22:189-192. http://dx.doi.org/10.1564/22aug11 [ Links ]

Hu J, Jiang J and Wang N. 2018. Control of citrus Huanglongbing via trunk injection of plant defense activators and antibiotics. Phytopathology 108:186-195. http://dx.doi.org/10.1094/PHYTO-05-17-0175-R [ Links ]

Jain S, Vaishnav A, Kasotia A, Kumari S and Choudhary DK. 2014. Plant growth-promoting bacteria elicited induced systemic resistance and tolerance in plants. Pp:109-132. In: Ahmad P and Rasool S (eds.). Emerging technologies and management of crop stress tolerance. Academic Press. San Diego, USA. 514p. http://dx.doi.org/10.1016/B978-0-12-800875-1.00005-3 [ Links ]

Khoa NĐ, Xạ TV and Hào LT. 2017. Disease-reducing effects of aqueous leaf extract of Kalanchoe pinnata on rice bacterial leaf blight caused by Xanthomonas oryzae pv. oryzae involve induced resistance. Physiological and Molecular Plant Pathology 100:57-66. http://dx.doi.org/10.1016/j.pmpp.2017.06.005 [ Links ]

Li J, Pang Z, Trivedi P, Zhou X, Ying X, Jia H and Wang N. 2017. ʻCandidatus Liberibacter asiaticusʼ encodes a functional Salicylic Acid (SA) Hydroxylase that degrades SA to suppress plant defenses. Molecular Plant-Microbe Interactions 30:620-630. http://dx.doi.org/10.1094/MPMI-12-16-0257-R [ Links ]

Li J, Trivedi P and Wang N. 2016. Field evaluation of plant defense inducers for the control of citrus Huanglongbing. Phytopathology 106:37-46. http://dx.doi.org/10.1094/PHYTO-08-15-0196-R [ Links ]

Lin H, Chen C, Doddapaneni H, Duan Y, Civerolo EL, Bai X and Zhao X. 2010. A new diagnostic system for ultra-sensitive and specific detection and quantification of Candidatus Liberibacter asiaticus, the bacterium associated with citrus Huanglongbing. Journal of Microbiological Methods 81:17-25. http://dx.doi.org/10.1016/j.mimet.2010.01.014 [ Links ]

Orzali L, Corsi B, Forni C and Riccioni L. 2017. Chitosan in agriculture: A new challenge for managing plant disease. Pp:17-36. In: Shalaby E (ed.). Biological activities and application of marine polysaccharides. IntechOpen. Rijeka, Croatia. 318p. http://dx.doi.org/10.5772/66840 [ Links ]

Riera N, Wang H, Li Y, Li J, Pelz-Stelinski K and Wang N. 2018. Induced systemic resistance against citrus canker disease by rhizobacteria. Phytopathology 108:1038-1045. http://dx.doi.org/10.1094/PHYTO-07-17-0244-R [ Links ]

Robles-González MM, Velázquez-Monreal JJ, Manzanilla-Ramirez MA, Orozco-Santos M, Medina-Urrutia VM, López-Arroyo JI and Flores-Virgen R. 2013. Huanglongbing (HLB) disease in mexican lime trees [Citrus aurantifolia (Christm) Swingle] and its dispersion in Colima state, México. Revista Chapingo Serie Horticultura 19:15-31. http://dx.doi.org/10.5154/r.rchsh.2012.01.005 [ Links ]

SIAP (Servicio de Información Agroalimentaria y Pesquera). 2018. Atlas agroalimentario 2012-2018, 1ª Edición. México, Distrito Federal. https://nube.siap.gob.mx/gobmx_publicaciones_siap/pag/2018/Atlas-Agroalimentario-2018 (consulta, marzo 2019). [ Links ]

StatPoint Inc. 2005. StatGraphics Centurion XV version 15.02.06. Warrenton, Virginia, USA. http://www.statgraphics.com. [ Links ]

Tang J, Ding Y, Nan J, Yang X, Sun L, Zhao X and Jiang L. 2018. Transcriptome sequencing and ITRAQ reveal the detoxification mechanism of Bacillus GJ1, a potential biocontrol agent for Huanglongbing. PLoS ONE 13:e0200427. http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0200427 [ Links ]

Walters DR, Ratsep J and Havis ND. 2013. Controlling crop diseases using induced resistance: challenges for the future. Journal of Experimental Botany 64:1263-1280. http://dx.doi.org/10.1093/jxb/ert026 [ Links ]

Wang N and Trivedi P. 2013. Citrus Huanglongbing: A newly relevant disease presents unprecedented challenges. Phytopathology 103:652-665. http://dx.doi.org/10.1094/PHYTO-12-12-0331-RVW [ Links ]

Xing K, Zhu X, Peng X and Qin S. 2015. Chitosan antimicrobial and eliciting properties for pest control in agriculture: a review. Agronomy for Sustainable Development 35:569-588. http://dx.doi.org/10.1007/s13593-014-0252-3 [ Links ]

Zhang MQ, Powell CA, Zhou LJ, He ZL, Stover E and Duan YP. 2011. Chemical compounds effective against the citrus Huanglongbing bacterium ʻCandidatus Liberibacter asiaticusʼ in planta. Phytopathology 101:1097-1103. http://dx.doi.org/10.1094/PHYTO-09-10-0262 [ Links ]

Zhang YP, Uyemoto JK and Kirkpatrick BC. 1998. A small-scale procedure for extracting nucleic acids from woody plants infected with various phytopathogens for PCR assay. Journal of Virological Methods 71:45-50. http://dx.doi.org/10.1016/S0166-0934 (97)00190-0 [ Links ]

Zhang Y, Xu J, Riera N, Jin T, Li J and Wang N. 2017. Huanglongbing impairs the rhizosphere-to-rhizoplane enrichment process of the citrus root-associated microbiome. Microbiome 5:97. http://dx.doi.org/10.1186/s40168-017-0304-4 [ Links ]

Recibido: 11 de Enero de 2019; Aprobado: 27 de Marzo de 2019

*Autor para correspondencia: equinones@ciatej.mx.

Creative Commons License Este es un artículo publicado en acceso abierto bajo una licencia Creative Commons