Investigación

Transfección de células por medio de ondas de choque

E. Armenta Ruiz*, A. Varela Echavarría*, G. Martínez de la Escalera*, A.M. Loske Mehling**

* Instituto de Neurobiología, Universidad Nacional Autónoma de México, Campus Juriquilla, 76230 Qro., Querétaro, e–mail: gmel@servidor.unam.mx

** Centro de Física Aplicada y Tecnología Avanzada, Universidad Nacional Autónoma de México, Apartado Postal 1–1010, 76000 Qro., Querétaro, División de Ciencias de la Salud, Universidad del Valle de México, Campus Querétaro, 76230 Qro., Querétaro, e–mail: loske@fata.unam.mx

Recibido el 30 de marzo de 2006
Aceptado el 6 de junio de 2006

Resumen

La incorporación de material genético al interior de una célula puede ser de gran utilidad para el tratamiento de algunas enfermedades heredadas y adquiridas. Desgraciadamente, la mayoría de los métodos para lograr dicha incorporación (transfección) no son selectivos. Este artículo describe la aplicación de ondas de choque como método para incorporar un gen reportero al interior de células en suspensión. Se diseñó un dispositivo experimental para generar ondas de choque por medio de descargas eléctricas en agua y enfocarlas con un reflector elipsoidal sobre los viales que contenían las celulas en suspensión. La transfección celular se logró debido a la cavitación acústica generada en el interior de los viales por el paso de las ondas de choque. A pesar de que el número de células transfectadas fue bajo, se demostró que, desde el punto de vista físico, es factible transfectar células con ondas de choque.

Descriptores: Ondas de choque; cavitación acústica; transfección.

Abstract

Treatments for inherited and acquired diseases are pointing towards gene therapy, which depends on methods to introduce foreign genetic material into cells. Unfortunately, most of the methods available to allow incorporation of transgenes into the genome are not selective to target a particular population of cells. The present article describes the use of shock waves as a cell – permeabilization method to load a reporter gene into cultured cells. Shock waves were generated by underwater electrical breakdown and focused on the vials containing cell suspension using an ellipsoidal reflector. Transfection was achieved due to acoustic cavitation generated inside the test vials after passage of each shock wave. The number of transfected cells was still low; nevertheless, our results show the feasibility of cell transfection by underwater shock waves.

Keywords: Shock waves; acoustic cavitation; transfection.

PACS: 43.25.Cb; 43.40.Jc; 47.40.Nm; 43.25.Yw; 43.35.Ei

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Agradecimientos

Los autores agradecen la ayuda técnica de Claudia Hernández, Arturo Méndez, René Preza, Esperanza Meléndez, Gabriela Trucco, Edgar Méndez y Carmen Mejía. La asesoría del Dr. Eduardo Castaño y del M. en C. Ulises Mora fue importante. Todas las fotografías de alta velocidad fueron obtenidas por el Dr. Roberto Zenit, el M. en C. Francisco Fernández y el M. en C. Guillermo Canseco con una cámara de alta velocidad proporcionada por el Instituto de Investigación en Materiales de la UNAM. La instrumentación y el mantenimiento de los equipos estuvieron a cargo del M. en C. Francisco Fernández. Este trabajo fue apoyado por la DGAPA de la UNAM, a través del Proyecto de Investigación IN–101202.

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