Abstract

MORALES-GUTIERREZ, Ma. Emma et al. Microtécnica de enriquecimiento y extracción de ADN de cloroplastos y mitocondrias. Agrociencia [online]. 2016, vol.50, n.8, pp.977-988. ISSN 2521-9766.

Los protocolos publicados para enriquecimiento de ADN de cloroplasto y mitocondrial están basados en muestras grandes (más de 5 g) que implican costos altos y abundante material de muestra. La reducción en cantidades de muestra de tejido y de reactivos es posible y conveniente. Esta investigación describe una microtécnica eficiente para enriquecimiento y extracción de ADN de cloroplasto y mitocondria desde muestras de 500 mg de pericarpio de frutos de chile Manzano (Capsicum pubescens R. & P.). La eficiencia de la extracción en muestras de fruto fresco fue 20 µg ADN g-1 para cloroplastos, y 33 µg g-1 ADN de mitocondrias. El aislamiento con la microtécnica recomendada redujo costos en 160x para cloroplastos y hasta 8x para mitocondrias. La amplificación por PCR de los genes marcadores de referencia de cloroplasto (rbcL, subunidad grande de la Rubisco) y mitocondria (cox1, citocromo oxidasa) confirmó la identidad de ADN de cada extracción.

Keywords : Capsicum pubescens; ADN de cloroplasto; ADN de mitocondria; extracción de ADN.

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