Resumo

IRACHETA CARDENAS, María Magdalena; SALAZAR MARTINEZ, Sanjuanita Lyzzeth; CARDENAS AVILA, María Luisa  e  ROCHA PENA, Mario A.. Localización In Situ de Inclusiones del Virus Tristeza de los Cítricos con Anticuerpos Desarrollados Contra la Proteína Recombinante no Estructural p20. Rev. mex. fitopatol [online]. 2012, vol.30, n.2, pp.161-166. ISSN 2007-8080.

Se describe el desarrollo de un inmunoensayo para la localización in situ de inclusiones virales inducidas por el virus tristeza de los cítricos (Citrus tristeza virus = CTV) mediante microscopía de luz con anticuerpos preparados contra la proteína recombinante p20 no estructural del CTV. Se emplearon cortes manuales de aproximadamente 100 µm de grosor a partir de corteza de varetas de plantas de cítricos sanas e infectadas por el CTV. Los cortes se fijaron en 70 % de etanol y se incubaron subsecuentemente con anticuerpos anti-p20 desarrollados ya sea en rata o conejo en diluciones de 1:5,000 y 1:10,000 y 1:1,000 y 1:3,000 respectivamente, y con conjugados comerciales IgG anti-especie en diluciones de 1:30,000 para cada uno de ellos, agregando al final la solución cromogénica compuesta por NBT/BCIP. Las inclusiones virales se visualizaron en un microscopio de luz a 10 y 40 aumentos en forma de áreas irregulares con coloración azul obscura en el área del floema y fibras del floema en cortes efectuados con plantas infectadas por el CTV; los tejidos provenientes de plantas sanas no presentaron ningún tipo de coloración, lo que permitió discriminar plantas sanas e infectadas por el CTV.

Palavras-chave : DIBA; serología; proteína recombinante; microscopía de luz.

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