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Gaceta médica de México
versão On-line ISSN 2696-1288versão impressa ISSN 0016-3813
Resumo
DIMAS-GONZALEZ, Jisela; TREJO-GOMORA, Jorge E.; BONILLA-CISNEROS, Carlos e LAGUNAS-MARTINEZ, Alfredo. Optimización de unidades formadoras de colonias y detección del virus de papiloma humano en sangre de cordón umbilical. Gac. Méd. Méx [online]. 2021, vol.157, n.1, pp.30-36. Epub 18-Jun-2021. ISSN 2696-1288. https://doi.org/10.24875/gmm.19005696.
Introducción:
Se requiere analizar diversos parámetros para el control de calidad adecuado de las unidades de sangre de cordón umbilical (USCU) cuando se utilizan con fines terapéuticos.
Objetivo:
Optimizar las unidades formadoras de colonias (UFC) de cultivos clonogénicos y detectar el genoma del virus del papiloma humano (VPH) en USCU.
Métodos:
Se incluyeron 141 muestras de sangre de cordón umbilical (SCU), de segmento y de UFC de cultivos clonogénicos de USCU. Se realizó extracción de ADN, cuantificación y amplificación por PCR del gen endógeno GAPDH. Se detectó el gen L1 del VPH con los oligonucleótidos MY09/MY11 y GP5/GP6+; los productos de PCR se migraron en electroforesis de agarosa. El ADN purificado de las UFC se analizó mediante electroforesis de agarosa y algunos ADN, con la técnica sequence specific priming.
Resultados:
La concentración de ADN extraído de UFC fue superior comparada con la de SCU (p = 0.0041) y la de segmento (p < 0.0001); así como la de SCU comparada con la de segmento (p < 0.0001). Todas las muestras fueron positivas para la amplificación de GAPDH y negativas para MY09/MY11 y GP5/GP6+.
Conclusiones:
Las USCU criopreservadas fueron VPH netativas; además, es factible obtener ADN en altas concentraciones y con alta pureza a partir de UFC de los cultivos clonogénicos.
Palavras-chave : Virus del papiloma humano; Cultivos clonogénicos; Unidades formadoras de colonias; Unidades de sangre de cordón umbilical; ADN.