Animales y dietas.

Este estudio se realizó en el laboratorio de fisiología nutricional de la Unidad Académica de Agricultura, de la Universidad Autónoma de Nayarit-México. Se utilizaron 24 cerdos machos castrados cruza de Landrace-Yorkshire con un peso inicial de 55 ± 3 kg en etapa de engorda, alojando un cerdo en cada corral con comedero y bebedero, alimentados ad libitum, de acuerdo con las recomendaciones de la Norma Oficial Mexicana ^{NOM-062-ZOO-1999}. Después de cinco días de adaptación a la dieta asignada, más 56 días de alimentación experimental, los cerdos fueron sacrificados bajo la normativa ^{NOM-033-SAG/ZOO-2014}, alcanzando un peso vivo promedio de 109 ± 4 kg. La obtención de harina de aguacate se realizó de acuerdo con la metodología descrita por ^{Lemus et al. (2017)}, utilizando aguacates de la variedad Hass descartados para el consumo humano por su tamaño pequeño o daño físico, recolectado en plantas empacadoras. Los aguacates se dejaron a temperatura ambiente hasta que alcanzaron su madurez de consumo, se molieron frutos enteros y en forma fresca (pulpa, semilla y cascara), produciendo una pasta que se secó a temperatura ambiente por cuatro días, molida por segunda vez para obtener una harina, que se almacenó a temperatura ambiente en contenedores de plástico, sin adición de ninguna sustancia conservadora o de otro tipo. Los cerdos fueron distribuidos en igual número (n=8) y se les proporcionó una de tres diferentes dietas, con diferente inclusión de harina de aguacate (AM) mezclada en la dieta; AM0, AM5 y AM10 que corresponden al 0 (control), 5 y 10 % de la materia seca (Tabla 1).

Muestras.

Al momento del sacrificio, se tomó una muestra de aproximadamente 100 g del músculo Longissimus dorsi, se empacó al vacío y se congeló a una temperatura de -20 oC, hasta su uso en los análisis químicos. También, al momento del sacrificio se tomaron tres muestras de aproximadamente 0.5 g, del interior del músculo Longissimus dorsi e hígado, para el análisis de expresión genética. Las muestras se colectaron en criotubos de 2.0 mL sobre hielo, con una solución estabilizadora de ácidos nucleicos (DNA/RNA Shield, Zymo Research, USA) y se almacenaron a -20 ºC hasta su uso.

Análisis de la composición química proximal y γ-tocoferol del músculo Longissimus dorsi.

Se determinó la composición química siguiendo la metodología descrita por la Association of Official Agricultural Chemists AOAC (1997) para humedad (925,10), cenizas (923.03), proteínas (920.87) y lípidos (920.39). La cuantificación de γ-tocoferol se realizó con 500 mg de grasa intramuscular (IMF) diluida en 1 mL de 2-propanol. La determinación se realizó mediante cromatografía líquida de alta eficacia (HPLC). La separación se realizó en una columna Nucleosil C18 de fase inversa (250 mm x 4.6 mm, tamaño de partícula 5 µm) (^{Can-Cauich et al., 2019}). El sistema fue operado isocráticamente a un flujo de 1 mL/min, y los picos se registraron a 285 y 335 nm como longitud de onda de excitación y emisión, respectivamente. El volumen de inyección fue 20 μL. La identificación y cuantificación de los picos se realizaron por comparación con el estándar auténtico de γ-tocoferol. Los resultados fueron expresados como μg de γ-tocoferol/g de muestra en peso fresco.

Determinación del contenido de Compuestos Fenólicos Totales (TPC), actividad antioxidante DPPH y ABTS del músculo Longissimus dorsi.

Se utilizó 5 g de cada muestra de músculo Longissimus dorsi, mezclada con 10 mL de agua destilada y colocada en un baño de ultrasonido Grant XB3 (Boekel Scientifi Inc, USA.), por 30 minutos en un baño con agua fría. El extracto resultante fue centrifugado a 3,500 x g durante 15 min a 4 °C, el sobrenadante fue filtrado con papel Whatman No. 42. El filtrado obtenido fue almacenado a -20°C, hasta la medición del contenido de TPC y actividad antioxidante. El contenido de TPC de las muestras fue analizado de acuerdo al método colorimétrico Folin-Ciocalteu (^{Moo-Huchin et al., 2014}). Los resultados fueron expresados como mg equivalentes de ácido gálico (AG)/100 g de carne. La actividad antioxidante (DPPH y ABTS) de los extractos de carne fue medida siguiendo la metodología publicada por ^{Moo-Huchin et al. (2014)}. Para ambos análisis, una curva de calibración fue preparada usando Trolox como estándar, y los resultados fueron expresados como µM equivalentes de Trolox/100 g de carne.

Análisis de ácidos grasos del músculo Longissimus dorsi.

Los lípidos del músculo Longissimus dorsi se extrajeron siguiendo el procedimiento de ^{Hanson & Olley (1963)}, 500 mg de grasa fue convertida en ésteres metílicos de ácidos grasos con metanólica de hidróxido de potasio (KOH) y de trifluoruro de boro (BF₃₎ (^{Morrison & Smith, 1964}). Para el análisis cromatográfico se empleó un equipo de cromatografía de gases modelo Trace GC Ultra de la marca Thermo scientific (USA). El sistema cromatográfico fue acoplado a un detector de ionización de flama, fijada a una temperatura de 250 °C y con flujo de gas He de 35 mL/min, aire de 350 mL/ min, a una temperatura del inyector de 250 °C. Para la separación de los ácidos grasos se utilizó una columna capilar HP-Innowax, de 60 m por 0.32 mm de diámetro interno y 0.25 µm de espesor de la partícula, utilizando He como gas acarreador con un flujo de 3 mL/min. La separación de los ésteres metílicos de ácidos grasos fue lograda usando una rampa de temperatura: inicial de 60 °C por 3.5 min, 10 °C/min hasta 200 °C y se mantuvo por 15 min, 1 °C/min hasta 225 °C, 2°C/min hasta 240 °C y se mantuvo por 12.5 min. Los esteres metílicos de ácidos grasos de las muestras fueron identificadas, comparando sus tiempos de retención, con los correspondientes FAME de una mezcla de estándares de 37 componentes conocidos (Supelco 37 Component FAME Mix 47885-U Sigma-Aldrich). Los ácidos grasos fueron expresados, como la proporción de cada ácido graso individual, respecto al total del área de los ácidos grasos identificados en la muestra.

Análisis de expresión de genes en músculo Longissimus dorsi e hígado.

De los tejidos colectados se pesaron 75 mg, para la extracción de RNA se utilizó el kit de extracción de ácidos nucleicos Direct-zol^TM RNA MiniPrep (Zymo Research, USA), de acuerdo con las instrucciones del fabricante, se cuantificó su concentración y pureza por medio de espectrofotometría con Nanodrop. Posteriormente se llevó a cabo la síntesis de cDNA, con 1000 ng de RNA de cada muestra, utilizando el kit Maxima H Minus First Strand cDNA Synthesis Kit with dsDNase (Thermo Scientific, USA), de acuerdo con las instrucciones del fabricante.

Se evaluó la expresión de los genes ACACA (Acetil Co-A carboxilasa alfa), SCD (Estearoil-CoA desaturasa), SREBP1 (proteína de unión al elemento regulador del esterol), ACP (Proteína transportadora de acilos) y FASN (Ácido-grasosintasa), reportados por ^{Duran-Montgé et al. (2009a}, ^2009b) y asociados al metabolismo lipídico en cerdos (Tabla 2). El gen endógeno RNA18S se utilizó para normalizar la expresión de los genes, en una PCR en tiempo real (qPCR) empleando el kit SYBR Green/ROX qPCR Master Mix (2x) (Fermentas, USA), con un volumen final de 20 uL por reacción triplicada en cada muestra, en un equipo Step One Plus real Time PCR (Applied Biosystems, Stockholm, Sweden). La amplificación en tiempo real se llevó a cabo en 40 ciclos, considerando las siguientes condiciones: desnaturalización inicial (95 °C por 8min), ciclado (95 °C por 15s y 60 °C por 30s). La especificidad de la amplificación de cada arreglo fue confirmada por el análisis de curva de disociación, la rampa de temperatura de este análisis fue de 60 °C a 95 °C por 5s. La lectura para la curva de disociación arrojó un solo pico para cada una de las muestras, confirmando la amplificación de cada gen. No se detectó amplificación para las muestras negativas.

Analisis estadistico

Con las variables de la valoración nutricional, tocoferol, fenoles totales, actividad antioxidante y perfil de lípidos del músculo Longissimus dorsi se realizó un análisis de varianza, con un modelo de un solo efecto considerando a las dietas como efecto fijo y comparaciones de medias con la prueba de Tukey. Además de correlaciones y regresiones, entre los niveles de inclusión de AM y las variables medidas. De acuerdo a la metodología utilizada por ^{Benítez et al. (2015}, ²⁰¹⁶⁾, se realizaron análisis estadísticos de los datos de expresión génica para ambos tejidos (Longissimus dorsi e hígado) siguiendo el método de ^{Steibel et al. (2009)}, que consiste en el análisis de los valores Ct para genes objetivo y endógenos, utilizando simultáneamente un modelo mixto lineal. Para ello se utilizó el siguiente modelo en un análisis univariado, de las mediciones de expresión génica registrada para ACACA, SCD, SREBP1, ACP y FASN. ygijkr=Ti + Pj + Ak +Wr + eijkr. Donde ygijkr= -log2 (Eg^{-ct gijkr}), Eg aporta la eficiencia del PCR de cada gen, Ct ijkr es el valor obtenido del software termociclador para el gen del pozo r^th, en la j^th placa qPCR, correspondiente al k^th animal sometido al tratamiento i^th. Ti el efecto específico del tratamiento i^th en la expresión del gen. Pj y Ak los efectos aleatorios específicos sobre la expresión, en el r^th pozo qPCR por triplicado en cada muestra del gen, en la j^th P placa y el k^th A cerdo. eijkr el efecto residual. Se contemplaron tres Ti tratamientos diferentes en el modelo: efectos dietéticos (tres niveles: AM0, AM5 y AM10) en cerdos finalizados a los109±4 kg peso vivo. Para probar las diferencias entre las clases en la tasa de expresión de genes de interés (diffT) normalizados por el gen endógeno (∆Ct=Ct_objetivo-Ct_endógeno), se realizaron diferentes contrastes entre las dietas y tejidos. Los valores de probabilidad estadística (p) ajustados se calcularon utilizando el método de corrección de Bonferroni. Para obtener valores de cambio o fold change (FC) a partir de los valores diffT estimados, se aplicó la siguiente ecuación: FC =2^-diffT. Todos los cálculos se realizaron utilizando ^{SPSS versión 20 (2011)}.

Composición química proximal, γ-tocoferol, contenido de compuestos fenólicos totales (TPC), actividad antioxidante DPPH y ABTS del músculo Longissimus dorsi.

La alimentación de los cerdos con las dietas experimentales (AM5 y AM10) tuvo una reducción significativa (p <0.01) en los niveles de IMF (entre 9.7 y 26.6 % de reducción) en comparación con la dieta control (AM0) (Tabla 3). Disminuye en -0.21 % por cada 1 % de inclusión de AM en la dieta (Tabla 4).

Los porcentajes de proteína, cenizas y humedad se mantuvieron con porcentajes similares en las tres dietas. Significativamente (p < 0.01 a p < 0.001) se incrementaron los contenidos de γ-tocoferol, TPC, la actividad antioxidante DPPH y ABTS del músculo Longissimus dorsi al incluir AM en las dietas (Tabla 3); con un efecto lineal en estas variables (p < 0.01 a p < 0.001), por lo que es mayor el contenido con nivel de inclusión de AM más alto (Tabla 4).

En cerdos comerciales, la grasa dorsal y la IMF ha disminuido, porque genéticamente se ha ejercido una presión de selección muy intensa, afectando negativamente las propiedades sensoriales de la carne (^{Steven et al., 2019}; ^{Dzib-Cauich et al., 2020}). De acuerdo a ^{Katsumata (2011)}, promover el aumento de IMF en el cerdo es importante para la calidad de la carne, sin embargo, en exceso puede ser no saludable para humanos. Se considera que la IMF está relacionada con la jugosidad de la carne, actualmente en cerdos comerciales es baja, por los que existen estudios con la finalidad de modular su cantidad, pero también la calidad de los ácidos grasos, a través de los ingredientes de las dietas (Wood et al., 2008; Wood & Enser, 2017), tratando de explicar los mecanismos lipogenéticos (Katsumata, 2011). Un ejemplo de manipulación de la IMF es en jamones de cerdos Ibéricos, presentan más del 9.5 %, pero sucede que también disminuye a 7.08 %, cuando es alimentado con ácidos grasos monoinsaturados (^{Jiménez-Colmenero et al., 2010}). Similar efecto reporta ^{Hernández-López (2016b)} en cerdos Landrace-Yorkshire, donde disminuye la IMF en Longissimus thoracis al alimentar con aguacate, con aumento del tocoferol significativamente; este efecto es propiciado por el valor nutricional del aguacate (^{Lemus et al., 2017}), y actividad antioxidante más alta en cáscara y semilla (^{Tesfay et al., 2010}).

Los compuestos fenólicos al igual que el tocoferol se incrementan en carne, al alimentar cerdos con aguacate, como lo publicó ^{Hernández-López et al. (2016a}, ^2016b), mejorando la calidad de la carne y la estabilidad oxidativa de grasas y proteína. ^{Tejerina et al. (2011)}, encuentra que las bellotas tienen una alta capacidad antioxidante y ácidos grasos saludables, por componerse de alto tocoferol, compuestos fenólicos (principalmente taninos) y n-9 MUFA; esta descripción es muy similar a la AM. Al aguacate se le reconocen sus efectos potenciales en la salud humana, por su composición de nutrientes y actividad antioxidante (^{Méndez-Zúñiga et al., 2019}); estos nutrientes pueden ser aprovechados por el cerdo, ya que los aguacates descartados por bajo peso, no demeritan sus propiedades nutricionales (^{Grageola et al., 2010}), y es una fruta que puedes modular la calidad de la carne, de acuerdo a las consideraciones de ^{Wood et al. (2008)} y ^{Wood & Enser (2017)}. Considerando además que la digestibilidad aparente de los nutrientes, de este tipo de alimento es relativamente alta, cuando se ofrece a los cerdos (^{Grageola et al., 2010}; ^{Ly et al., 2015}; ^{Hernández-López et al., 2016a}).

El uso de la fruta entera de aguacate descartada por su tamaño y transformada en harina, es una alternativa interesante para la alimentación animal, ya que no es práctico la separación de la pulpa de la fruta de la semilla y la cáscara (^{Grageola et al., 2010}), y se pueden utilizar nutrientes importantes, evitando con los desechos contaminar el medio ambiente. La harina de aguacate contiene un alto contenido de grasa y de energía total, con cantidades no despreciables de proteína y alfa tocoferol, lo que hacen de este subproducto del aguacate, una perspectiva en la alimentación animal (^{Lemus et al., 2017}), al mejorar la calidad de la carne a través de retardar la oxidación de los lípidos, además de incrementar el porcentaje de ácidos grasos mono y poliinsaturados. Por otro lado, es importante considerar el alto contenido de taninos que pueden deprimir su consumo, como lo reporta ^{Fránquez et al. (2017)}, al alimentar cerdos con pasta de aguacate. Comparando la AM con bellota de española, lo acerca en calidad nutricional y como alternativa para la alimentación de cerdos, para producir carne diferenciada (^{Lemus et al., 2017}; ^{Rey et al., 2006}; ^{Tejerina et al., 2011}).

Ácidos grasos del músculo Longissimus dorsi.

La alimentación con las dietas experimentales que incluyeron AM, modificó la composición de los ácidos grasos presentes en la IMF del músculo Longissimus dorsi (Tabla 5). Al alimentar con AM5 mostró un efecto importante en los ácidos grasos, en relación a las otras dos dietas (p < 0.05 a p < 0.001); aumentaron los ácidos grasos palmítico (16:0), palmitoleico (16:1), araquidónico (20:4 n6) y eicosapentaenoico (20:3 n3), mientras que disminuyó el ácido esteárico (18:0) con una relación 18:1/18:0 mayor (9.66).

Al alimentar los cerdos con mayor inclusión AM10, los efectos más notorios en la medición de ácidos grasos saturados, es la disminución de palmítico (C16:0), el cual suele ser el más abundante en la carne de cerdo (^{Wood & Enser, 2017}). Los contenidos de ácidos grasos araquídico (20:0) y linoleico (18:2 n6) aumentaron, con mayor proporción de PUFA y de las relaciones PUFA/SFA y PUFA/MUFA (p < 0.01 a p < 0.001). No se observó efecto significativo en la relación MUFA/SFA y en ácido oleico (C18:1) al incluir AM.

^{Duran-Monge et al. (2008)} cuando adicionaron en la dieta cerca de 10 % de aceite de girasol, de linaza o combinación aceite de pescado-linaza, también encontraron una disminución en músculo Longissimus, de ácidos grasos palmitoleico(C16:1), esteárico (C18:0), oleico (C18:1) y monoinsaturados totales. Similares resultados encontraron ^{Hernández-López et al. (2016b)} al incluir pasta de aguacate en la dieta, disminuyó el ácido palmitoleico (C16:1) y el valor de la suma de ácidos grasos saturados (SFA), sin efecto en ácido oleico (C18:1). Cuando se alimenta cerdos con bellota de acuerdo a ^{Rey et al. (2006)} y ^{Jiménez-Colmenero et al. (2010)}, mantiene valores >49 % de ácido oleico (C18:1) y >57 % de ácidos grasos monosaturados. Un efecto importante es que con AM no disminuyó el ácido oleico (C18:1) del 48 % lo que si sucede con Duran-Monge et al. (2008), que reportan <38 % con fuentes alimenticias ricas en oleico e insaturados.

Al igual que en esta investigación cuando se alimentó con AM10, el ácido linoleico (C18:2) también se incrementó, al proporcionar dietas con aceite de girasol o linaza en la investigación de ^{Duran-Monge et al. (2008)}; lo mismo sucedió con la dieta que contenía pasta de aguacate (^{Hernández-López et al., 2016b}). El incremento de la proporción total de PUFA en AM10, no llegó a valores críticos de 15 %, concentración a partir de la cual empiezan a presentarse problemas de grasas blandas y aceitosas o “floppy meat” (^{Wood et al., 2004}). El equilibrio en la dieta determina el equilibrio en los tejidos, la composición del % ácido graso almacenado en los tejidos adiposos, refleja en gran medida la de los lípidos ingeridos (^{Wood et al., 2008}).

La relación PUFA/SFA es benéfica, con 0.45 % en este estudio al alimentar con AM10, está un poco arriba de la recomendada por los nutricionistas, que debe ser mayor de 0.4 %. La alta proporción de PUFA no necesariamente es saludable, si no está en una proporción adecuada con la relación n6/n3 (^{Fernández et al, 2007}). Consideraciones de ^{Jiménez-Colmenero et al. (2010)} indican que hay algunos casos de jamones ibéricos en los que sí rebasan este valor de 0.4 PUFA/SFA, en estos casos los cerdos han sido alimentados, con aceite de maíz o con suplementos de ácidos grasos monoinsaturados y n3. ^{Hernández-López et al. (2016b)} reportan que cerdos alimentados con pasta de aguacate, cuantificaron en el músculo Longissimus dorsi una relación PUFA/SFA de 0.26; ^{Rey et al. (2006)} cuantificaron 0.13 en el músculo Longissimus dorsi alimentando con bellota, ^{Fernández et al. (2007)} en cerdos ibéricos reportaron valores entre 0.19-0.30, ^{Duran-Monge et al. (2008)} reportaron una relación PUFA/SFA 0.78 en músculo Longissimus, alimentando con aceite de linaza y de 0.82 con aceite de girasol. ^{Benítez et al. (2015)}, muestran un aumento de la relación PUFA/SFA, al comparar dietas poliinsaturadas (0.16) contra saturadas (0.08).

Expresión de genes en el músculo Longissimus dorsi e hígado.

Como se observa en la Tabla 6, en el músculo Longissimus dorsi e hígado, los FC muestran diferencias en las diferentes comparaciones (p < 0.001); situación prevista de acuerdo con los reportes de diversos investigadores, al señalar que la expresión es diferente de acuerdo al tejido y alimentación (^{Duran-Mongé et al., 2009a}, ^2009b; ^{Benítez et al., 2015}; ^{Benítez et al., 2016}; ^{Fernández et al., 2017}; ^{Wang et al., 2020}).

Con la dieta AM5 en contraste con AM0, el contenido de expresión de mRNA en el músculo Longissimus dorsi fue mayor en los cinco genes (p < 0.001). En cuanto al tejido del hígado solo los genes ACACA y SCD tuvieron diferencias, con mayor expresión para AM5 en contraste con AM0 (p < 0.001).

Cuando se alimenta con AM10 al compararse con la dieta control AM0, en ambos tejidos sucedieron efectos similares; no hay diferencias en la expresión de SREBP1, pero disminuye, igual que la del resto de los genes donde si fue significativa (p < 0.01).

Con la dieta AM5 la expresión alta de genes lipogénicos (ACACA, ACP y FASN), de acuerdo a lo reportado en la literatura (^{Li et al., 2020}; ^{Fernández et al., 2017}), se puede asociar al aumento de los ácidos araquidónico (20:4 n6) y eicosapentaenoico (20:3 n3), por efectos de biogénesis de los ácidos grasos de cadena larga (ver Tabla 5). Mientras que, la esterificación de ácidos grasos (SCD), se puede asociar a la disminución de ácido esteárico (18:0) y aumento de una relación 18:1/18:0. Se ha asociado a la SCD con catalizar la síntesis de MUFA (ácidos palmitoleico y oleico) a partir de SFA (ácidos palmítico y esteárico) (^{Fernández et al., 2017}).

Alimentar con dieta AM5 en contraste de AM0, en Longissimus dorsi se expresó más la biogénesis de los ácidos grasos de cadena larga y la esterificación de ácidos grasos. La mayor expresión de SREBP1 en el músculo Longissimus dorsi y no en hígado para esta dieta AM5, indica que existió una asociación entre este gen y el resto de los evaluados en músculo. No se concuerda con ^{Duran-Mongé et al. (2009b)} que encontraron diferencias de expresión en los tejidos, pero expresando más ACACA y SREBP1 en hígado, con más SCD y FASN en tejido adiposo.

La situación fue contraria al alimentar con AM10, ya que disminuyó la expresión de los genes estudiados, situación similar a la que señalan ^{Mohan et al. (2012)}, al reportar que la expresión del importante mediador lipogénico SREBP1, puede afectarse por el tipo de dieta, como sucedió en la dieta AM10, donde no se sobre expresa. La dieta con aceite de girasol de acuerdo con ^{Mohan et al. (2012)} y ^{Benítez et al. (2018)} también disminuye la expresión de FASN, SCD y SREBP1; la reducción de SREBP1 señalaron que puede deberse al aumento de n-6 PUFA, que a su vez reduce la expresión de FASN y SCD. En investigaciones como las de ^{Duran-Montgé et al. (2009a}, ^2009b) se observó que la expresión de los genes FASN y SCD, se redujeron considerablemente en hígado y músculo de cerdos alimentados con PUFA, como sucedió en este trabajo, cuando se incrementó la AM al 10 % (AM10). La menor actividad de estas enzimas lipogénicas en el músculo, ya se ha demostrado en el cerdo, y pueden estar relacionadas con la baja cantidad de grasa en el músculo (^{Guillevic et al., 2009}).

En esta investigación disminuyó la IMF al incluir más nivel de AM en las dietas (ver Tablas 3 y 4), pero es importante nutricionalmente, que se presentó un aumento en las proporciones de PUFA y ácidos grasos de cadena larga araquídico (20:0) y linoleico (18:2 n6) a mayor AM; considerando las publicaciones de ^{Wood et al. (2008)} y ^{Wood & Enser (2017)}, es probable la incorporación de ácidos grasos de cadena larga a través del alimento con AM proporcionado. Por otro lado, de acuerdo con ^{Li et al. (2020)}, existen otros genes como el grupo de los Receptores Activadores de la Proliferación de Peroxisoma (PPARs) que regulan la expresión de genes involucrados en el metabolismo de lípidos, que pudieron influir en los resultados y que no fueron incorporados para su análisis en este estudio.

En relación a dietas sin incorporar grasas, ^{Duran-Mongé et al. (2009a)} reportaron que, los cerdos presentaron una expresión más alta de los genes involucrados en la síntesis de esteárico (ACACA y FASN), y también del gen involucrado en la desaturación (SCD); esto mismo sucedió al comparar la dieta AM0 contra AM10 (con menor expresión), sin embargo, no se incrementa en la dieta AM0 la síntesis de ácidos grasos de cadena larga. De acuerdo a los resultados de ^{Wang et al. (2020)}, el aumento de FASN en dieta AM0, pudo influir en mayor deposición de IMF, ya que es un predictor del contenido de IMF en el músculo Longissimus dorsi en cerdos Laiwu.

^{Muñoz et al. (2007)} señalan que en cerdos ibéricos ACACA es un buen predictor, su sobre expresión está relacionada al incremento y el contenido de ácidos grasos monoinsaturados (palmitoleico, vaccénico y oleico), reduciendo el porcentaje de ácido esteárico; cuando se alimentó con AM5 sucede este efecto al disminuir el ácido esteárico y aumentar el ácido palmitoleico, pero no sucede en AM10, ya que tuvo baja expresión.

Considerando los resultados obtenidos y la bibliografía consultada, se puede considerar que alimentar con harina de aguacate a los cerdos, influyó sobre la IMF, presencia de antioxidantes y modulación de los lípidos en el Longissimus dorsi, con diferente expresión de genes en los tejidos Longissimus dorsi e hígado.