nueva página del texto (beta)
Español (pdf)
Artículo en XML
Referencias del artículo
Traducción automática
Enviar artículo por email
Citado por SciELO 
Similares en
SciELO 
Permalink
ANTECEDENTES
Ciertos compuestos químicos pueden cristalizarse en formas diferentes, debido a que sus moléculas o átomos son capaces de agruparse en formas diversas. Esto se ilustra claramente con el ejemplo del carbono que puede cristalizarse en forma de diamante o como grafito dependiendo de la configuración de sus uniones atómicas, ambos con evidentes propiedades fisicoquímicas distintas. Esta capacidad de adoptar diferentes estructuras o configuraciones espaciales se ha llamado polimorfismo y cada forma resultante es un polimorfo. Existen varios fármacos que tienen polimorfos que a pesar de ser químicamente idénticos son físicamente distintos y exhiben propiedades fisicoquímicas diferentes, que incluyen estabilidad, reactividad, solubilidad y perfil de disolución que pueden afectar su farmacocinética y farmacodinamia. 1-3 Desde hace varias décadas se han informado diversos ejemplos del efecto del polimorfismo de los fármacos en la biodisponibilidad sistémica.4-6
La rifaximina es un antibiótico que tiene polimorfismo. En este fármaco se ha demostrado que los distintos polimorfos tienen propiedades farmacéuticas diferente entre sí, unos son mucho más absorbibles que otros.7 La rifaximina que se encuentra disponible para uso clínico desde hace décadas en el mundo y en México es un polimorfo α (rifaximina alfa) que es muy poco absorbible, no sólo en comparación con otros polimorfos, sino también con la rifaximina amorfa.8,9 La rifaximina-α actúa localmente en el tubo digestivo, por ello es importante que su absorción sea mínima y que su concentración en la luz intestinal sea alta. Se demostró que la absorción intestinal de una rifaximina genérica en otro país, compuesta de una mezcla de rifaximina-α y de rifaximina amorfa, fue significativamente mayor que la de la rifaximina-α.10 Las diferencias en la farmacocinética de un fármaco pueden repercutir en su seguridad y eficacia.
En México la rifaximina-α es el medicamento de referencia (Flonorm®). Recientemente apareció en este país una rifaximina genérica, sin especificar el polimorfismo. El propósito de este estudio es investigar, inicialmente en perros, el perfil farmacocinético de esta rifaximina genérica y compararla con la rifaximina-α.
MATERIAL Y MÉTODO
Estudio prospectivo experimental en el que se analizaron tabletas disponibles comercialmente que contenían 200 mg de rifaximina genérica en México (Arfla®, Laboratorios Senosiain SA de CV) y de rifaximina-α (Flonorm®, Alfasigma SpA), cada una de un solo lote. Se analizó el contenido de rifaximina por tableta, se molieron suavemente en un mortero y después en un mezclador Turbula a 32 rpm por 30 minutos. Con el polvo resultante se llenaron cápsulas de gelatina tamaño 13, en la cantidad adecuada de rifaximina para cada animal (100 mg/kg).
Determinación del polimorfismo
Dos alícuotas del polvo obtenido del medicamento genérico y dos de la rifaximina de referencia se analizaron por difracción de rayos X. Para ello se utilizó un difractómetro automático Panalytical X’Pert en geometría de Bragg-Brentano equipado con un monocromador de grafito, con las especificaciones y la configuración adecuadas para estudiar el polimorfismo de la rifaximina publicadas previamente.7,9
Pruebas de disolución
Se llevaron a cabo en 12 tabletas de cada pro- ducto, el de prueba (rifaximina genérica) y el de referencia (rifaximina-α), a dos diferentes pH (4.5 y 6.8) y con dos concentraciones diferentes de surfactante (SDS): 0.125 y 0.375%. Las pruebas se realizaron de acuerdo con la guía de la Dirección de Alimentos y Fármacos de Estados Unidos (FDA Draft Guidance on Rifaximin, Rev Mar 2017). Los perfiles de disolución de las muestras estudiadas se compararon con la prueba de similitud ƒ2 (de acuerdo con los lineamientos en la investigación de bioequivalencia EMEA Jan 2010). El muestreo se realizó a los siguientes tiempos: 10, 20, 30, 45, 60, 90 y 120 minutos.
Cada muestra de 5 mL se colectó y filtró; 2 mL se diluyeron en 5 mL de solución de metanol/agua (40/60). Las muestras así diluidas se analizaron con HPLC-UV; los resultados de la rifaximina liberada se calcularon por estándares externos.
Animales
Los animales fueron cuatro perros Beagle hembras con peso de 8-11 kg que se identificaron con número. Todos recibieron ambos medicamentos de prueba, con una semana de intervalo entre sí. Se mantuvieron en ayuno la noche anterior al estudio, en la mañana se administró una dosis única por vía oral, de dos cápsulas que contenían 100 mg/kg de rifaximina, seguida de 10 mL de agua; se les permitió comer dos horas después de la dosis. Se obtuvieron muestras de sangre de la vena yugular antes de la dosis y 1, 2, 4, 8 y 24 horas después, se separó el plasma, se dividió en dos alícuotas y se almacenó a -80°C, hasta la determinación de rifaximina.
Se observó clínicamente a los perros durante el estudio y una semana después.
Determinación de rifaximina
La concentración de rifaximina en plasma se midió con cromatografía líquida acoplada con espectrometría de masas, como está publicado.7,10 El límite inferior de cuantificación (LLOQ) fue de 0.249 ng/mL. La selectividad se probó en plasma blanco de seis diferentes perros y no se encontraron picos de interferencia a los tiempos de retención de rifaximina (ASTD) y 11-desmetil rifaximina (ISTD). La linealidad se evaluó en el intervalo de 0.2490 a 99.61 ng/mL en plasma de perro con pendiente media de 0.1188 mL·ng-1. La exactitud y precisión de la medición de rifaximina se probaron a 0.7471 mg/mL (QCL), 19.92 ng/mL (QCM) y 79.69 mg/ml (QCH). Se encontraron aceptables con los siguientes valores: exactitud intralote: 96.4-103.5%, precisión intralote: ≤ 7.7%, exactitud interlote: 99.1%, precisión interlote: 6.7%. La exactitud y precisión para rifaximina a 0.2490 ng/mL se estableció respectivamente a 99 y 7%.
Parámetros farmacocinéticos
En un análisis no compartimental, se calcularon la concentración máxima (Cmáx), el tiempo en el que apareció la máxima concentración (tmáx), el área bajo la curva concentración-tiempo (AUC0-t) con el método trapezoidal de t 0 a la última medición cuantificable, la concentración de t 0 al infinito (AUC0-∞) y la vida media (t1/2) asociada con la pendiente terminal (λZ) de una curva semilogarítmica de concentración-tiempo.
Cálculos estadísticos: los parámetros farmacocinéticos se estimaron o calcularon con el programa KineticaTM versión 4.4.1 PK/PD Analysis (Thermo Electron Corporation Informatics, Philadelphia, Estados Unidos). Las medias, medianas, desviación estándar y coeficiente de variación se calcularon con Microsoft Excel.
Consideraciones éticas
El cuidado de los perros para el estudio se llevó a cabo en instalaciones apropiadas, con temperatura y luz controladas, cumpliendo con la regulación y normas para la protección de los animales sujetos a experimentación (2019/63/ UE, RD 63/2013, BNV/JM/MONO [2000] 7) y las buenas prácticas de laboratorio (204/10/EC, RD 63/2013).
RESULTADOS
Análisis de los medicamentos
El peso promedio de las tabletas del producto genérico fue de 481.3 mg, mientras que el del medicamento de referencia fue de 362.4 mg. El contenido de rifaximina de las tabletas de ambos medicamentos fue uniforme de 200 ± 10 mg.
Determinación de los polimorfos
Con las dos muestras de la rifaximina genérica se observó un difractograma característico de rifaximina к (kappa; Figura 1A), mientras que en ambas alícuotas de rifaximina de referencia se comprobó un patrón de rifaximina-α (alfa; Figura 2B). Estos resultados demostraron también que el proceso de reducir a polvo las tabletas no afectó las propiedades de los cristales.
Figura 1 La difracción por rayos X de la rifaximina genérica (A) mostró un patrón de rifaximina к (kappa) y el de la rifaximina de referencia (B) mostró un patrón α (alfa).
Estudios de disolución
Las pruebas de disolución comparativas se condujeron aplicando la prueba ƒ2. Debido a que la rifaximina no se disuelve a los 15 minutos, se requirieron al menos tres mediciones a diferentes tiempos. La evaluación del factor de similitud se determinó con base en las siguientes condiciones:
Un mínimo de tres puntos mediciones a diferentes intervalos (excluido cero).
Los tiempos de medida deben ser los mismos en las dos formulaciones.
Doce valores individuales en cada punto para cada formulación, no más de un valor medio > 85% disuelto para cualquiera de las dos formulaciones.
La desviación estándar relativa o el coeficiente de variación para cualquiera de los productos probados debe ser menor de 20% en el primer punto y menor de 10% para el segundo y el último punto.
Para concluir que los dos perfiles de disolución de ambas rifaximinas son similares, los valores ƒ2 deberían encontrarse entre 50 y 100.
Los datos de los estudios de disolución a los dos valores de pH (4.5 y 6.8) y con las dos concentraciones de surfactante (SDS, 0.125 y 0.375%) se muestran en el Cuadro 1.
Cuadro 1 Pruebas de disolución comparativas de rifaximina genérica (G) y rifaximina de referencia (R)
| A | |||
|---|---|---|---|
| pH 4.5 SDS 0.125% | Rifaximina genérica (% disuelta) | Rifaximina de referencia (% disuelta) | |
| Tiempo (min) | G (t) | R (t) | [R(t)-G(t)]2 |
| 10 | 17.9 | 14.3 | 13.68 |
| 20 | 59.9 | 20.0 | 1592.65 |
| 30 | 75.1 | 23.6 | 2648.65 |
| 45 | 86.0 | 26.3 | 3554.54 |
| B | |||
| pH 4.5 SDS 0.375% | Rifaximina genérica (% disuelta) | Rifaximina de referencia (% disuelta | |
| Tiempo (min) | G (t) | R (t) | [R(t)-G(t)]2 |
| 10 | 21.8 | 32.4 | 111.65 |
| 20 | 77.1 | 50.2 | 723.73 |
| 30 | 88.9 | 61.2 | 769.51 |
| C | |||
| pH 6.8 SDS 0.125% | Rifaximina genérica (% disuelta) | Rifaximina de referencia (% disuelta) | |
| Tiempo (min) | G (t) | R (t) | [R(t)-G(t)]2 |
| 10 | 26.9 | 14.3 | 159.33 |
| 20 | 64.6 | 20.6 | 1943.17 |
| 30 | 79.7 | 24.9 | 3009.04 |
| 45 | 88.0 | 28.9 | 3491.46 |
| D | |||
| pH 6.8 SDS 0.375% | Rifaximina genérica (% disuelta) | Rifaximina de referencia (% disuelta) | |
| Tiempo (min) | G (t) | R (t) | [R(t)-G(t)]2 |
| 10 | 29.4 | 27.9 | 2.41 |
| 20 | 75.7 | 44.7 | 964.14 |
| 30 | 87.3 | 54.7 | 1064.67 |
A: pH 4.5 y solución surfactante (SDS) a 0.125%; B: pH 4.5 y SDS a 0.375%; C: pH 6.8 y SDS 0.125; D: pH 6.8 y SDS 0.375. Los cálculos de ƒ2 fueron respectivamente: 17.7, 31.8, 22.3 y 29.2.
Los valores de ƒ2 fueron respectivamente: 17.7, 31.8, 22.3 y 29.2, es decir, en todos los casos ƒ2< 50 por lo que se concluye que los perfiles de disolución de la rifaximina alfa y la rifaximina genérica son diferentes.
Parámetros farmacocinéticos
Las concentraciones plasmáticas de rifaximina con los dos productos se ilustran en la Figura 2. El perfil farmacocinético de la rifaximina genérica mostró que en todos los animales hubo exposición sistémica a la rifaximina. El pico máximo de concentración plasmática de esta rifaximina (Cmáx = 244 ± 193 ng/mL) se obtuvo en 1.5 horas. La exposición sistémica total a la rifaximina medida con el área bajo la curva durante las 24 horas después de la administración del medicamento (AUC0-t) fue de 835 ± 594 ng/ mL/h, con variabilidad importante porque en dos perros se observó un valor muy alto (media 1319 ng/mL/h) y en otros dos un valor menor (media 351 ng/mL/h). El fármaco se eliminó del cuerpo lentamente como se determinó en la vida media (t½ 6.1 ± 0.3 h), a las 24 horas se encontró mayor cantidad de rifaximina, que fue 4% de la concentración máxima.
Figura 2 Concentraciones plasmáticas de rifaximina después de la administración de 100mg/kg de rifaximina genérica y de rifaximina de referencia (alfa)
La exposición sistémica a la rifaximina-α fue en todos los casos menor a la de la rifaximina genérica. El pico máximo (Cmáx = 30.5 ± 17.1 ng/mL) ocurrió a la hora. El área bajo la curva (AUC0-t) fue de 98 ± 56 ng/mL/h. La eliminación fue lenta (t½ 5.1 ± 2.6 h), a las 24 horas la concentración se elevó ligeramente en 3 de los 4 animales. En el Cuadro 2 se resumen los parámetros farmacocinéticos con ambos medicamentos de estudio.
Cuadro 2 Parámetros farmacocinéticos después de la administración de rifaximina genérica (100 g/kg) y rifaximina alfa (100 g/ kg) por vía oral en perros Beagle
| Medicamento | Cmáx (ng/mL) | Tmáx (h, mediana) | AUC (ng/mL/h) | AUC (ng/mL/h) | T½ (h) | C 24h (ng/mL) |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Rifaximina genérica | 244 ± 193.3 | 1.5 | 835 ± 594 | 926 ± 658 | 6.1 ± 0.3 | 10.1 ± 8.2 |
| Rifaximina alfa | 30.5 ± 17.1 | 1 | 98 ± 56 | 106 ± 62 | 5.1 ± 2.6 | 0.85 ± 0.9 |
Es evidente que la absorción de la rifaximina genérica fue mucho mayor que la de rifaximina alfa. Aunque hubo variabilidad en los valores de la rifaximina genérica, en cada perro hubo mayores concentraciones plasmáticas con rifaximina genérica que con rifaximina alfa, el pico máximo con rifaximina genérica fue, en promedio, 212.9 ng/mL (intervalo: 59.2-423.2 ng/ mL), mayor que con rifaximina alfa (Figura 3). El área bajo la curva durante 24 horas (AUC0-t) con rifaximina genérica fue en promedio 8.5 veces la de rifaximina-α. La biodisponibilidad sistémica relativa (AUC0-t alfa/AUC0-t genérica x 100) fue 10.8 ± 13.1.
Figura 3 Concentracion máxima (Cmax) individual con rifaximina genérica y con rifamixina de referencia (alfa). En todos los casos la Cmáx con rifaximina genérica fue mas alta que la rifaximina α.
No se observaron efectos adversos en los perros durante el tiempo de observación.
DISCUSIÓN
La prueba de disolución es una herramienta importante para caracterizar el comportamiento de las formas farmacéuticas de sólidos orales. De hecho, la disolución de un fármaco en su forma oral puede afectar su desempeño in vivo. Los perfiles de disolución in vitro de la rifaximina de referencia y la rifaximina genérica se investigaron a dos diferentes pH (4.5 y 6.8) y con dos concentraciones de surfactante (0.125 y 0.375%) de acuerdo con las guías aceptadas. Con base en los valores de la prueba ƒ2, los resultados de este estudio evidenciaron que en cualquier condición probada, la rifaximina de referencia y la rifaximina genérica no son iguales en cuanto a sus perfiles de disolución.
Esta falta de similitud in vitro se confirmó también en los estudios de biodisponibilidad en perros. En estos estudios la rifaximina de referencia y la rifaximina genérica se administraron a perros a la misma dosis (100 mg/kg) en dosis ÚNICA. Aunque se observó gran variabilidad interindividual en la absorción sistémica de las dos formas de rifaximina, en todos los perros se apreció mayor exposición sistémica a la rifaximina genérica (kappa) que a la de referencia (alfa). De acuerdo con todos los parámetros farmacocinéticos, la absorción de esta rifaximina genérica identificada posteriormente como rifaximina kappa es al menos ocho veces superior a la de la rifaximina alfa.
La importancia de este hecho reside en la seguridad y en la eficacia. La mayor parte, si no es que todos, los estudios publicados que muestran que la rifaximina es segura, bien tolerada y eficaz en las distintas enfermedades gastrointestinales se han llevado a cabo con la rifaximina comercial en la mayor parte de los países occidentales, que es rifaximina alfa. Su seguridad, tolerabilidad y eficacia se han demostrado en la terapia aguda de la diarrea del viajero,11,12 en tratamientos a corto plazo únicos o repetidos en individuos con síndrome de intestino irritable,13-16 con tratamiento continuo a largo plazo en pacientes con cirrosis hepática,17-19 así como con la administración cíclica en sujetos con enfermedad diverticular del colon sintomática no complicada.20-22
En los pacientes con insuficiencia hepática, después de la administración de rifaximina alfa pueden observarse concentraciones plasmáticas varias veces mayores que en los individuos sanos, en relación con el grado de insuficiencia hepática.23 Las concentraciones plasmáticas de rifaximina en estos pacientes siguen siendo bajas y seguras. Sin embargo, si se administrara una rifaximina cuya absorción es mayor, es posible que las concentraciones circulantes fueran mucho mayores, la seguridad en este caso no se ha demostrado.
La interacción con otros medicamentos de una rifaximina con mayor absorción podría ser otra preocupación. La rifampicina induce varios citocromos P450, incluyendo CYP3A4, por lo que puede incrementar el metabolismo de otros fármacos,24 las investigaciones con rifaximina alfa a largo plazo en animales y a corto plazo en humanos no han mostrado alteraciones significativas de esta vía, probablemente por las insignificantes concentraciones sanguíneas.25 Es otro aspecto desconocido con una rifaximina no alfa.
Una preocupación ha sido la inducción de cepas de Mycobacterium tuberculosis resistentes a la rifampicina en individuos con tuberculosis pulmonar o de otro órgano. Por un lado, se ha demostrado que esto no ocurre en presencia de concentraciones muy bajas de rifaximina,26 por otro lado, una revisión de la susceptibilidad antimicrobiana de M. tuberculosis durante 10 años en Italia no mostró incremento en la resistencia a la rifampicina.27 Podría ser un panorama distinto con una rifaximina de mayor absorción.
La eficacia del tratamiento con rifaximina alfa depende de su alta concentración en el lumen intestinal que alcanza alrededor de 8000 μg/ mL después de tan sólo tres días de tratamiento con 800 mg/día de este fármaco.26 Esta concentración es superior a la necesaria para obtener el efecto antimicrobiano de la mayor parte de las bacterias enteropatógenas.28 El tratamiento del sobrecrecimiento bacteriano del intestino delgado es un ejemplo en el que la dosis mayor obtiene un mejor efecto terapéutico.29 No hay datos de las concentraciones fecales de las rifaximinas no alfa.
En este estudio no se observaron efectos clínicos adversos en los animales estudiados, pero se les dio una dosis única.
En suma, se ignoran muchos aspectos de seguridad y de eficacia de otros polimorfos de rifaximina. Los datos obtenidos con rifaximina alfa podrían no ser extrapolables a formas polimórficas diferentes.
Limitante del estudio. Esta investigación se hizo en perros y no en humanos. La farmacocinética no es necesariamente idéntica entre las diversas especies de animales y los humanos, sobre todo por su metabolismo,30 aunque en este caso no haya razones de peso para pensar que el comportamiento farmacocinético de estos dos polimorfos de rifaximina sea muy diferente en los seres humanos. Los estudios farmacológicos en animales de experimentación son una práctica común en la investigación farmacológica y son elementos obligados en los estudios pre-clínicos.31
