Localización del lugar del experimento

El estudio se realizó en la lechería "18 de Julio", propiedad de la Universidad Autónoma Chapingo, ubicada en el municipio de Tlahualilo, Durango (25º 54'0'' N y 103° 35' 09'' O). La lecheria contaba con 569 vacas Holstein-Friesian en ordeña. El manejo incluyó el uso de dietas completas, dos ordeños y sistemas técnico-mécanico para el sumistro de los alimentos. El sitio se encuentra a una altura de 1,137 metros sobre el nivel del mar, el clima es desértico, la temperatura media anual es 21.1°C con 239 mm de precipitación pluvial anual, distribuidos principalmente de julio a septiembre (^{García, 2005}).

Manejo de las vacas

En el desarrollo del experimento, se siguieron las técnicas y procedimientos de la Guía de Cuidado y Uso de Animales Agrícolas e Investigación y Enseñanza (^{Federación de Sociedades de Ciencia Animal, FASS, 2010}). Los animales utilizados en el presente estudio fueron 30 vacas adultas Holstein-Friesian gestantes, de aproximadamente 21 d previos su fecha probable de parto (peso corporal; PV=781±83 kg; condición corporal promedio de 3.5, escala: 1, muy delgada, 5, muy gorda; de más de dos lactancias (^{Edmonson et al., 1989}).

Las vacas se aleatorizaron y asignaron a uno de dos tratamientos (n=15): 1) Dieta completa (DC; Maíz-ensilado de Maíz), Control; y 2) DC+1.0 g kg^-1 de MS de β-mananasa (CTCZYME, patente 100477456-0000; CTC Bio Inc., Seoul, South Korea).

Manejo de la alimentación

La alimentación se manejó de acuerdo con los periodos estudiados. En el preparto, (aproximadamente, 21 d) los animales se alojaron en un corral con 30 alimentadores del tipo Calan Doors (Calan Doors, Northwood, NH). Las vacas recibieron diariamente una dieta balanceada acorde con las recomendaciones del NRC (^{NRC, 2001}). Los ingredientes y la composición química de las dietas experimentales se muestran en la Tabla 1. En cada dieta se usaron los mismos ingredientes durante el experimento. Las vacas tuvieron acceso a agua limpia y fresca ad libitum.

Después del parto, la alimentación se ofreció tres veces al día en partes iguales (33.33% de la dieta diaria total) a las 6:00, 14:00 y 22:00 h, lo cual es una práctica común en la industria lechera en está región de México (^{Ponce, 2013}). Las vacas se alojaron en un corral para vacas frescas. El corral fue equipado con 30 comederos (tipo Calan Door) y varias fuentes de agua limpia. Previo al inicio del experimento, las vacas se entrenaron para disponer del alimento de los comederos. Durante el entrenamiento, las vacas elijieron un comedero, que se compone de una caja con dos entradas. La principal tiene una puerta batible, que abre exclusivamente a cada vaca. La segunda, es para poner el alimento. Dicho alimento se depositó en la caja y estuvo disponible hasta servir nuevamente el alimento. El alimento se sirvió en función del tratamiento. Las vacas poseen un dispositivo computarizado (un medallón) en el cuello, que al hacer contacto con la puerta de la caja, está se abre y permite el acceso de la vaca al alimento contenido en el comedero. De forma que las vacas dispnen del alimento tanto como lo deseen durante todo el tiempo. El comedero es exclusivo para cada animal y puede contener aproximadamente 35.00 kg de alimento.

Durante el experimento, el alimento se preparó diariamente en un carro mezclador (Digi-Star, EZ3600) y se almacenó en un espacio exclusivo, para posteriormente pesarse y ofrecerse a los animales de manera individual. Acto seguido, el alimento no consumido se pesó y se registró; este procedimiento se repitió cada vez que se ofreció alimento nuevo. Al final del día, el alimento rechazado se sumó y se sustrajo de la cantidad ofrecida para determinar el consumo de materia seca (CMS) individual por día. El CMS se estableció proporcionando 15.0% más que el requerimiento de alimento sugerido por NRC (^{NRC, 2001}).

El alimento ofrecido (antes de ser servido) y el no consumido por cada animal se muestreó diariamente. Al final de la semana, las muestras se mezclaron para formar muestras compuestas semanales. Después de obtener las muestras, se almacenaron a -20ºC. Posteriormente, se descongelaron, se pesaron y se secaron a 55.0-60.0°C en un horno de aire forzado por 48 h para determinar la MS de campo parcial; posteriormente, se molieron en un molino de Willey (A. H. Thomas, Philadelphia, PA), usando una criba de 1.00 mm.

La MS total, se determinó en una estufa a 100°C por 24 h utilizando los procedimientos descritos por la Asociación Oficial de Químicos Agrícolas (^{AOAC, 2006}). Finalmente, las muestras se incineraron en una mufla a 500 °C para determinar los contenidos de materia orgánica (MO) y cenizas. Los contenidos de FDN y FDA se determinaron usando el método descrito por ^{Goering y Van Soest (1970)}. Las muestras del alimento ofrecido y rechazado también se analizaron para determinar el contenido de proteína utilizando el método Kjeldahl (^{AOAC, 2006}). Los contenidos de Ca se determinaron mediante espectrofotometría de absorción atómica (^{Galyean y May, 1996}); mientras que la determinación de P fue por métodos colorimétricos y espectrofometría de luz ultravioleta.

Cambios de peso y medidas corporales

Las vacas se ordeñaron a las 08:00 y 20:00 h utilizando una ordeñadora en paralelo (Westfalia Surge, Bonen, DE). La leche producida se pesó y se registró con un lactómetro Waikato MK V (Waikato, NZ). La producción de leche (PL) diaria fue la suma de los dos ordeños del día. La leche corregida (LCG) al 4.0% de grasa se estimó utilizando la ecuación descrita por ^{Gaines y Davidson (1923)}:

Las muestras de leche se tomaron en viales de 120 mL semanalmente. Los viales contenían una pastilla de Bromopol (Bromopol BSM2 D & F Control, San Ramón, CA) como conservador. Los contenidos de grasa, proteína, lactosa, y sólidos totales, y nitrógeno úreico en la leche se analizaron utilizando un MilkoScan FT120TM (Multispec, Foss Feed Technology Corp., Eden Prairie, CA).

Análisis estadísticos

Los datos se analizaron con el procedimiento Mixed del programa estadístico SAS (^{SAS, 2013}), bajo un diseño complementamente al azar con medidas reptetidas en el tiempo. Las variables estudiadas incluyeron los cambios de PV, CMS, PL, composición de leche, nitrógeno ureico y conteo de células somáticas.

El modelo inicial incluyó los efectos fijos de tratamiento, semana, la interacción tratamiento×semana y vaca como efecto aleatorio. El modelo final, después de eliminar covariables e interacciones no significativas (p>0.05) dobles o triples, fue:

Donde: Y_ijkl es la variable de respuesta; μ es la media general; VACA_i es el efecto aleatorio de la i-ésima vaca; TRATAMIENTO_j es el efecto fijo del j-ésimo tratamiento (j=1, 2); SEMANA_k es el efecto fijo de la k-ésima semana (j=1, 2, ... , 9); TRATAMIENTO×SEMANA_jk es el efecto fijo de la interacción del tratamiento×semana; y E_ijkl es el término de error aleatorio.

El mismo modelo se utilizó para analizar las concentraciones de proteína, FDN, FDA y MS en las dietas. De los resultados obtenidos se presentan las medias de cuadrados mínimos y su error estándar. Cuando el efecto de TRATAMIENTO fue significativo, se realizó una prueba de comparación de medias, mediante se la opción PDIFF del procedimiento mixed de SAS para determinar las diferencias entre tratamientos. Para cada variable de respuesta se utilizó la mejor estructura de covarianza, de acuerdo con los criterios de información de Akaike y Schwartz. La estructura de covarianza más adecuada para porcentaje de grasa, proteína, lactosa, y sólidos totales en leche fue simetría compuesta; para CMS fue la autorregresiva; mientras que para PL, eficiencia de alimentación, rendimiento de grasa y proteína lo fue simetría de compuestos heterogéneos.

Consumo de materia seca

En la Tabla 2, se presentan los resultados del contenido nutrimental de los alimentos ofrecidos y rechazados de las dietas utilizadas durante ambos periodos pre- y posparto. Los análisis se hicieron por periodos. El periodo preparto fue de 21 días; mientras que el periodo posparto tuvo una duración de 63 días. Debido a que no hubo efectos de tratamiento (p>0.05), semana (p>0.05) o la interacción tratamiento por semana (p>0.05) en los periodos indicados, sólo se reportan las medias de cuadrados mínimos (Tabla 2).

Frecuentemente, se considera que la alternativa apropiada para obtener los consumos y producciones de leche mayores es proveer a las vacas con alimento de valor nutritivo alto con acceso ilimitado durante el día. Sin embargo, el acceso ilimitado, sugiere ofrecer a las vacas más alimento del que puede consumir. Como el consumo ad libitum no es exactamente igual de un día para otro en una misma vaca o grupos de vacas, se requiere proveer alimento extra al final del día para asegurar que cada animal consuma el alimento requerido (^{NRC, 2001}).

El manejo del rechazo es un balance entre proveer los necesario para asegurar que cada vaca tiene acceso al alimento que ella desea. En el presente estudio, la no diferencia en la calidad de los alimentos ofrecidos comparados con los rechazados, sugiere que las vacas no tuvieron restricciones de consumo por la calidad de las dietas.

En la Tabla 3, se muestran los resultados de consumos de MS en los periodos pre y posparto, producción y contenido de grasa, proteína, lactosa, sólidos no grasos, sólidos totales y nitrógeno ureico en la leche. Como se aprecia en los resultados, el consumo de MS no fue afectado (p>0.05) por la complementación con la enzima. Lo que quizás se deba a que la enzima mejoró la digestibilidad de MS, MO y los compuestos nitrogenados, incrementando la digestión de la fibra en el rumen. Sin embargo, los cambios no fueron suficientes para alterar la tasa de pasaje de las partículas ruminales (^{Zinn et al., 1999}), lo que inhibió el incremento en el consumo de alimento.

El incremento en el consumo de alimento de las vacas debido a la complementación con enzimas podría explicarse por el incremento en la tasa de pasaje de las partículas ruminales o por incremento en la digestión de la fibra, ninguno de los cuales se midieron en el presente experimento. Sin embargo, otros reportes de la literatura indicaron que los suplementos enzimáticos no aumentaron el CMS debido a que, aunque se incrementó la digestión de la fibra en el rumen (^{Feng et al., 1996}), dicho aumento no fue suficiente para alterar la tasa de pasaje de las partículas ruminales (^{Zinn et al., 1999}), lo que inhibió la expresión del consumo de alimento. Una de las bases de este postulado es el mejoramiento en la eficiencia alimenticia de las dietas.

Resultados similares fueron reportados por ^{Roque et al. (2019)}, quienes incluyeron 0.10% de β-mananasa en dietas con base en Maíz-ensilado de Maíz, misma que fue suministrada por 182 d de lactancia. En el mismo contexto, ^{Seo et al. (2016)}, observaron que la adición de 0.10% de la enzima a dietas de forraje: concentrados (25:75%) no influyó en el CMS de vaquillas Hanwoo en crecimiento. En los estudios de ^{Roque et al. (2019)} y ^{Seo et al. (2016)} no se observó diferencias en el CMS, sin embargo, si se observó el efecto de la enzima en la eficiencia de conversión del alimento.

Por el contrario, otros han autores como ^{Tewoldebrhan et al. (2017)} observaron reducción en el CMS por la adición de β-mananasa en vacas Holstein-Friesian de lactancia avanzada, donde encontraron que la complementación de las dietas con 0.10% de β-mananasa redujo el CMS en 1.8 kg vaca^-1 d^-1 en comparación con el de las vacas Control. La reducción en el consumo se atribuyó a una reducción en la digestibilidad aparente en el tracto total de MS, MO y proteína.

La diferencia entre el estudio de ^{Tewoldebrhan et al. (2017)} y el presente, fue que en el primero las vacas estuvieron en la segunda fase de la lactancia (después del pico de producción, 116(19 d en leche), y en el presente estudio, estuvieron en una etapa más temprana (17(6 d en leche), cuando el metabolismo del animal presenta demandas mayores por nutrientes. Dicha demanda, posiblemente, proviene de un metabolismo más acelerado, debido a que la primera etapa de la lactancia, la vaca moviliza una mayor cantidad de sustratos para mantener la PL, y quizás esto permite un incremento en la eficiencia de utilización (^{Mendoza et al., 2014}).

Producción de leche

Las vacas adicionadas con la enzima produjeron 10.36 % (p<0.05) más leche que las Control (Tabla 2). Este incremento, posiblemente, se deba a que la β-mananasa influyó en la digestibilidad de la materia seca, materia orgánica y los compuestos nitrogenados de las dietas. Este hecho, quizás mejoró la digestión de la fibra, sin promover cambios en la tasa de pasaje de las partículas del rumen, por lo que no hubo cambios en el consumo de MS. Ninguno de los aspectos antes mencionados fueron medidos en el presente estudio. Sin embargo, en varios reportes de literatura (^{Yang et al.,1999}; ^{Rode et al., 1999}; ^{Yang et al., 2000}) se observó que el consumo de MS no incrementó por efecto de la enzima suplementada, aunque la digestión de la fibra incremento sin cambiar la tasa de pasaje de las partículas en el rumen (^{Rode et al., 1999}), por lo que no se observó cambio alguno en el consumo de materia seca.

^{Beauchemin et al. (1995)} y ^{Rode et al. (1999)} indicaron que la adición de enzimas fibrolíticas a las dietas de rumiantes promueven incrementos en la digestibilidad de la MS y NDF sin afectar el consumo de alimento. El incremento en la digestibilidad de los nutrientes se relaciona con el modo de acción de la enzima cuando se suministra al alimento. La enzima altera la estructura del alimento haciéndolo más susceptible a la degradación (^{Dean et al., 2013}).

Los resultados obtenidos en el presente estudio son contradictorios a los observados por otros, donde frecuentemente, la acción de β-mananasa no influyó el volumen de leche producido. Al respecto, ^{Roque et al. (2019)} no observaron incrementos en PL en vacas que recibieron 0.10% de β-mananasa en la dieta comparadas con el Control. Las dietas fueron similares a las utilizadas en el presente estudio. Estos resultados también concuerdan con los observados con enzimas fibrolíticas exógenas como endonucleasas y xilanasas en vacas lecheras (^{Arriola et al., 2011}; ^{Peters et al., 2015}).

^{Tewoldebrhan et al. (2017)} observaron que la complementación con 0.10% de β-mananasa en la dieta, no influyó el volumen de leche producido (34.4 vs 34.0 kg d^-1) en comparación con el Control. La diferencia entre el estudio de ^{Tewoldebrhan et al. (2017)} y el presente, fue que en el primero las vacas estuvieron en la segunda fase de la lactancia (después del pico de producción, 116(19 d en leche), y en el presente estudio estaban en una etapa más temprana (17(6 d en leche), cuando el metabolismo del animal presenta una demanda mayor por nutrientes.

De acuerdo con ^{Kong et al. (2011)}, el efecto positivo de la adición de β-mananasa, puede deberse a una mayor cantidad de energía disponible en la dieta, como producto de la degradación de β-mananos por la acción de la enzima. La cual anticipa un mejoramiento en el metabolismo energético con un incremento en la digestión de la fibra (^{Wu et al., 2005}). Sin embargo, ^{Peters et al. (2015)} utilizaron enzimas exógenas fibrolíticas como celulasas y xilanasas, y concluyeron que dichas enzimas no modificaron el volumen de leche producida.

Un resultado único del presente estudio es el incremento en PL por la complementación con β-mananasa, lo que hasta ahora no se había reportado en vacas lecheras al inicio de la lactancia. Como se indicó anteriormente, la cantidad extra de leche se explicó por la presencia de la enzima que, posiblemente, mejoró la digestión de la fibra e incrementó la fermentación ruminal. Sin embargo, el uso de la enzima dependerá del nivel de producción, edad de las vacas y costo local de la enzima con relación al incremento en el volumen de leche.

Componentes de leche

La complementación con β-mananasa no influyó (p>0.05) en la composición y producción de componentes de la leche (Tabla 2). Esto quizás se debe a que las dietas se formularon para cubrir las necesidades de mantenimiento y producción de las vacas en forma apropiada (^{NRC, 2001}).

Recientemente, ^{Arriola et al. (2017)} reportó en un metaanálisis de 15 estudios, donde se evaluó la complementación con enzimas fibrolíticas y sus efectos en el comportamiento de las vacas lecheras. El reporte indica que no hubo efecto en la composición de la leche. Los ejes principales de esta falta de efectos se relacionaron con el estado energético y de lactancia.

De acuerdo con el mismo estudio publicado por ^{Arriola et al. (2017)}, el efecto de la adición con enzimas puede ser enmascarado por la preparación del producto, la dosis, la actividad enzimática y el método de suministro. También puede ser afectado por el mecanismo de acción (^{Beauchemin y Holtshausen, 2010}) y la composición de la dieta basal (^{Tirado-González et al., 2018}).

El poco impacto en la concentración y producción de componentes de leche también fue observado por ^{Zilio et al. (2019)}, en vacas Holstein-Friesian que recibieron enzimas fibrolíticas, amilolíticas y una combinación de ambas al inicio de la lactancia. Las enzimas exógenas no afectaron la producción y composición de la leche, sugiriendo una pérdida de evidencia de que las enzimas amilolíticas y fibrolíticas pueden afectar la digestibilidad de nutrimentos, fermentación ruminal, y el comportamiento de los animales en lactancia avanzada.

Los efectos de las enzimas en la composición de la leche son poco perceptibles y no logran alcanzar significancia estadística. Por ejemplo, ^{Romero et al. (2016)} reportaron valores de concentración de grasa (3.60 vs 3.62%; para control vs xilanasas, respectivamente) de leche en vacas Holstein-Friesian al inicio de la lactancia.

Otro caso fue observado por ^{Zilio et al. (2019)}, quienes observaron que la adición de xilanasas no impactó ni el porcentaje (3.05 vs 3.06%; control vs xilanasas), ni la producción de proteína de vacas Holstein-Friesian durante la parte media de la lactancia.

Eficiencia de utilización del alimento

En el presente estudio, la complementación con enzimas mejoró (p<0.05) 8.0% la eficiencia de conversión del alimento a leche comparado con el Control (Tabla 2), lo que quizás se explique por una movilización de lípidos provenientes de las reservas corporales que son susceptibles de uso después del parto. Este hecho se relaciona con el incremento en los requerimientos de los animales debido al inicio de la lactancia.

Aunque la movilización de lípidos no se evaluó en el presente estudio, está respuesta se ha observado en diversos estudios. ^{Lee et al. (2014)} observaron que cabras en crecimiento que recibieron dietas forraje: concentrado (25:75%) más 0.10% de β-mananasa, mejoraron en 29.5% tanto la ganancia diaria de peso como la eficiencia de utilización del alimento. Ambos aspectos se explicaron: primero, por el mejoramiento en el consumo de alimento (11.3 vs 11.2 g dia^-1) y, segundo, la excreción de N más baja (5.6 vs 4.7 mg dL^-1) en las cabras complementadas.

El mejoramiento en la eficiencia de conversión y la salud de los animales tiene beneficios ambientales y económicos en las operaciones lecheras. Las β-mananasas pueden mejorar la digestión y la utilización de los nutrimentos liberando mananos y xilanos. ^{Kebreab et al. (2016)} indicaron que la adición de 0.10% de β-mananasas a la dieta mejoró la eficiencia de conversión del N a proteína de leche, la ganancia de peso y la salud de la ubre de vacas en la lactancia sin afectar las excreciones de metano y el N fecal.

En el presente estudio, el mejoramiento en la eficiencia también puede asociarse con la posibilidad de que el consumo de MS y la digestibilidad de la proteína de la dieta, cubrieron los requerimientos de N de los animales. Esto posiblemente, evitó gastos energéticos por la excreción del exceso de N. En el presente estudio, el contenido de N ureico en leche fue similar en ambos grupos experimentales, lo que sugiere que el N contenido en la dieta fue utilizado eficientemente por las vacas tratadas con enzimas.

Nitrógeno ureico en la leche

El nitrógeno ureico en la leche es un metabolito que permite predecir la excreción y la eficiencia de utilización del nitrógeno en los animales. En el presente estudio, la complementación con1.0 g día^-1 de β-mananasa en la dieta no influyó (p>0.05) la concentración de N ureico en la leche (Tabla 2). Lo que quizás se explique por los contenidos y usos de los compuestos nitrogenados que fueron proporcionados por las dietas.

Resultados similares a los del presente estudio fueron observados por otros investigadores. ^{Zilio et al. (2019)} indicaron que la complementación con 8.0 g d^-1 de enzimas amilolíticas, y 12.0 g d^-1 de fibrolíticas incluidas en la dieta no influyeron en la excreción del N ureico en leche. Dicha conclusión se basó en que las enzimas no modificaron la digestibilidad, la fermentación ruminal y la producción de leche. En el presente estudio, la concentración de la enzima fue de 1.0 g día^-1. Si se asocia con el consumo diario, se tendría 22.9 kg de MS multiplicado por 1.0 g día^-1 de β-mananasa, daría un resultado de 22.9 g día^-1 de la enzima. Este valor sería similar a los 20 g día^-1 suministrados en el estudio de ^{Zilio et al. (2019)}.

En adición, la respuesta de los animales al uso efectivo del N de la dieta tiene varias aristas. Como se demostró anteriormente, el manejo efectivo del N depende mucho de la enzima. Sin embargo, también depende de otros aspectos como la calidad de los ingredientes, su digestibilidad y su habilidad para transformarse en ácidos grasos volátiles en el rumen y la producción de proteína microbiana. Cualquier cantidad de energía y proteína extra, debido a la condición de la vaca, se priorizará para formación de leche.

La concentración de urea en leche puede utilizarse como una herramienta para determinar si la dieta está provocando fallas en la producción o infertilidad del hato. La urea también puede ser un indicador del funcionamiento ruminal. Los niveles excesivos (>18 mg dL^-1) serían señales de alerta relacionados con desbalances de proteínas, niveles reducidos de carbohidratos o ambiente ruminal pobre. Sin embargo, como puede observarse en ambos grupos de animales, las concentraciones estuvieron alrededor de 7.0 mg dL^-1. Lo que sugeriría que el metabolismo fue apropiado a las condiciones actuales de producción de leche y salud de los animales.

Conteo de células somáticas

La mayoría de las células en el CCS son células blancas como macrófagos, linfocitos, y neutrófilos, los que pelean contra infecciones de la ubre y reparan los tejidos dañados (^{Bradley y Green, 2005}). En forma práctica, el CCS se toma como un indicador de las inflamaciones de la ubre, que se conoce como mastitis. En el presente estudio, la complementación con 1.0 g de MS kg^-1 d^-1 de β-mananasa disminuyó (p<0.05) 86% el CCS con respecto a las Control (Fig. 1). Esto quizás se deba a la liberación de oligosacáridos de manosa incrementando la energía disponible en el animal. Esto posiblemente, promueva la activación del sistema inmunológico en la glándula mamaria, resultando en una producción mayor de células blancas.

Fig. 1 Concentración de células somáticas en leche de vacas alimentadas con dietas completas Maíz-ensilado de Maíz complementadas con 0.10% de β-mananasa o no (Testigo) durante los primeros 63 días de lactancia de vacas Holstein-Friesian en condiciones de confinamiento (p<0.05). 

Aunque en el presente experimento no se estudió el metabolismo de β-mananos, algunos reportes de literatura indican que la liberación de mananos responde con incrementos en el nivel energético del animal, logrado por la hidrólisis de los oligosacáridos de mananos. ^{Tewoldebrhan et al. (2017)} indicaron que las vacas que consumieron dietas con enzimas mostraron CCS menores con respecto al Control (59 vs 72 miles de células mL^-1). Lo que se atribuyó a un incremento en la producción de células blancas como neutrófilos, linfocitos y macrófagos (^{Durr et al., 2008}), propiciado por el consumo de β-mananasa en una proporción similar a la usada en el presente estudio.

En otro estudio, ^{Roque et al. (2019)} indicaron que la adición de β-mananasa a una dieta completa produjo niveles inferiores de haptoglobina durante lactancia en las vacas complementadas con la enzima. La haptoglobina es una proteína transportadora de hemoglobina, que elimina la formación de coágulos sanguíneos, mediante la unión de fragmentos de hemoglobina. Los fragmentos se metabolizan en las células hepáticas, y esto previene la formación de coágulos, lo que sugiere que la enzima se relaciona con efectos antiinflamatorios de la ubre.

El incremento en la producción de células blancas por la adición de la enzima se demostró en aves y porcinos. En aves, ^{Bortoluzzi et al. (2019)} evaluaron la diversidad y la composición de la microbiota ileal y cecal en pollos de engorda contaminados con Coccidia. La microbiota cecal, fue dominada por familias como Ruminococcae y Bacteroides del orden de los Costridiales en los animales testigo en los primeros 21 d. Por el contrario, la adición de β-mananasa moduló la microbiota incrementando las poblaciones benéficas como Lactobacillus, Akkermansia. Paralelamente, promovió la reducción de Bacteroides que se relaciona con eficiencias de utilización del alimento bajas.

En porcinos, ^{Qiao et al. (2018)} indicaron que animales Landrace×Yorkshire alimentados con 200 mg kg^-1 de β-mananasa en la dieta, incrementaron los niveles de albumina, creatinina y Ca, y decrecieron el N ureico en la sangre mesentérica. Por el contrario, restablecieron los niveles de albumina, aminotransferasas y de aminotransferasas glutámico oxaloacético en las venas portal y carótidas. Aparentemente, β-mananasa parece interactuar en el metabolismo del N y minerales en la reparación de los tejidos dañados en cerditos en crecimiento.

Las evidencias anteriores, sugieren, que posiblemente, la reducción observada en CCS se relaciona con el sistema inmune de la vaca que responde con la inflamación de la glándula mamaria. Esta inflamación es como respuesta a la liberación de mananos oligosacáridos liberados por la acción de β-mananasa. El párrafo anterior, permite suponer que vacas con CCS bajos deberían gastar menos energía en funciones inmune comparados con aquellas con CCS altos como fue el caso del presente estudio.

^{Bradley y Green, (2005)}, indicaron que cuando el CCS es menor que 100,000 células mL^-1 se considera normal y refleja la salud de la glándula mamaria. Por el contrario, CCS mayores que 200,000 células mL^-1 se relacionaron con mastitis subclínica (^{Bradley y Green, 2005}). Sin embargo, ^{Nyman et al. (2016)} demostraron que vacas con CCS de 74,000 células mL^-1 pueden presentar infecciones mamarias. Lo que indicaría que las vacas del presente estudio debieran presentar algunos signos asociados con mastitis subclínica. Sin embargo, si los hubo, fueron imperceptibles durante el estudio. Lo que indicaría que, independientemente, de los niveles de células somáticas encontradas en el presente estudio, no hubo efectos directos en el rendimiento lechero de los animales.

A pesar de las limitaciones del presente estudio, los resultados observados sugieren que la adición de pequeñas cantidades de β-mananasa (1.0 g por kg de MS por día), a dietas completas de Maíz-ensilado de Maíz, puede ser una alternativa práctica para que los productores puedan mejorar la calidad de la materia seca de las dietas, producción de leche y reducción de mastitis. Los resultados tienen inferencia en vacas en confinamiento con el uso de dietas completas, que representan las condiciones propias del estudio. Dichas inferencias se pueden hacer extensivas para lecherías con dietas incompletas o de ingredientes por separado. También pueden ser viables para vacas que se manejan en condiciones de pastoreo.