Scielo RSS <![CDATA[Revista mexicana de fitopatología]]> http://www.scielo.org.mx/rss.php?pid=0185-330920170001&lang=pt vol. 35 num. 1 lang. pt <![CDATA[SciELO Logo]]> http://www.scielo.org.mx/img/en/fbpelogp.gif http://www.scielo.org.mx <![CDATA[Mulberry (<em>Morus alba</em>) leaf extracts as a control alternative of blue mold on postharvest apple fruit]]> http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0185-33092017000100001&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt Resumen. Penicillium expansum, agente causal del moho azul en manzana, causa pérdidas significativas en frutos de manzana en postcosecha, y es controlado mayormente con fungicidas sintéticos. El presente estudio tuvo como objetivo evaluar extractos de hojas de morera (Morus alba) como una alternativa de control del moho azul en frutos de manzana en postcosecha. Once tratamientos, incluyendo un testigo químico (Imazalil) y otro sin tratar, se evaluaron in vitro e in vivo. En los experimentos in vitro se midieron el crecimiento micelial y la esporulación del hongo, y en los experimentos in vivo se midieron la severidad y cambio de color del fruto mediante el análisis de imágenes. Para obtener los extractos de las hojas, se colectaron hojas asintomáticas de morera, se trituraron, y se pusieron en agua destilada esterilizada, metanol y acetato de etilo como solventes de separación de fases, o agua destilada, cada uno a concentraciones de 4, 8 y 12 %. Los resultados demostraron que el extracto obtenido conmetanol a 4 y 12 %, y el extracto acuoso a 12 %, inhibieron el crecimiento micelial. En cuanto a la esporulación del hongo, ésta fue menor en los extractos a base de metanol a 4 y 12 % y el de acetato de etilo a 8 %, igualando al testigo químico. La severidad de la enfermedad en frutos inoculados fue menor en el tratamiento con Imazalil, seguido por el extracto acuoso al 4 %. Solo el tratamiento con acetato de etilo al 8 % cambió la coloración de los frutos.<hr/>Abstract. Penicillium expansum, causal agent of blue mold on apple, causes significant postharvest losses in apple. This fungus is largely controlled with synthetic fungicides. The goal of this study was to evaluate the effect of leaf extracts of mulberry (Morus alba) as a control alternative of blue mold on postharvest apple fruits. Eleven treatments including a chemical and an untreated control, were evaluated in vitro and in vivo. In the in vitro experiments, mycelial growth and sporulation of the fungus were measured, and in the in vivo experiments severity and fruit decoloration were measured by image analysis. For the leaf extracts, asymptomatic mulberry leaves were collected, crushed and placed in a methanol or ethyl acetate as the solvent phase separation, or distilled water, each at concentrations of 4, 8 and 12%. The results showed that the extract methanol based at 4 % and 12 % inhibited mycelial growth. A treatment with 12 % aqueous extract had the same effect. As for the sporulation of the fungus, it was also observed that the extract methanol based at 4 and 12 % decreased sporulation, and the separated phase with ethyl acetate to 8 %, equaling the chemical control. The severity of disease on inoculated fruits was inhibited by Imazalil with 75.1 %, followed by extract (4 %) with a 40.3 % effectiveness. Only treatment with ethyl acetate at 8 % caused changes on the color of the fruits. <![CDATA[<em>Phytophthora hydropathica</em> and <em>Phytophthora drechsleri</em> isolated from irrigation channels in the Culiacan Valley]]> http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0185-33092017000100020&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt Resumen. En México, no existen reportes de la presencia de especies de Phytophthora en aguas superficiales, de ahí la importancia de determinarlas ya que representan un riesgo para la agricultura del país. En enero de 2015, se muestrearon 25 canales de irrigación en el Valle de Culiacán con el objetivo de identificar las especies de Phytophthora presentes. Los aislamientos fueron obtenidos con trampas que consistieron en hojas de azalea y frutos de pera. Se obtuvieron 29 aislamientos de Phytophthora, los cuales fueron identificados con base en características morfológicas y en secuencias de ADNr de los espaciadores internos transcritos (ITS) y del factor de elongación 1-α (TEF-1α). Se realizaron pruebas de patogenicidad en hojas de tomate y chile, debido a que son cultivos importantes en la región y son irrigados con agua de los canales muestreados. Se identificaron 2 especies: P. hydropathica y P. drechsleri. Los aislamientos de P. hydropathica ocasionaron lesiones necróticas en hojas de tomate y de chile; mientras que los aislamientos de P. drechsleri solamente causaron lesiones en hojas de tomate. De acuerdo con nuestro conocimiento, este es el primer reporte de P. hydropathica en México.<hr/>Abstract. Up to date, there are no reports of the presence of Phytophthora species in surface water bodies in Mexico, which represents a risk for the local agriculture. During January 2015, 25 irrigation channels from Culiacan Valley were sampled for the isolation of Phytophthora spp. Isolates were obtained with rhododendron leaves and pear fruits baits. Twenty-nine isolates of Phytophthora were obtained and identified, by morphological characteristics together with rDNA sequences of internal transcribed spacers (ITS) and elongation factor 1-α (TEF-1α). Pathogenicity tests were performed on tomato and pepper leaves, since they are important crops in the region and they are irrigated with water from the sampled channels. Two Phytophthora species were identified: P. hydropathica and P. drechsleri. Isolates of P. hydropathica caused necrotic lesions on tomato and pepper leaves while isolates of P. drechsleri caused necrotic lesions only on tomato leaves. To our knowledge, this is the first report of P. hydropathica in Mexico. <![CDATA[Severity of a <em>Phytophthora capsici</em> isolate in chayote <em>Sechium edule</em> plants at growth chamber level]]> http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0185-33092017000100040&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt Resumen. Se determinó la severidad de Phytophthora capsici en plantas de chayote y se propuso una escala de severidad, dada su reciente confirmación como agente causal de enfermedad. Se muestrearon plantas con síntomas de marchitez en dos huertos comerciales de chayote en Huatusco, Veracruz, México. El oomiceto aislado, a partir de frutos y tallos, fue caracterizado morfológica y molecularmente e identificado como P. capsici. Plantas de chayote desarrolladas en cámara de crecimiento fueron inoculadas con 1, 3 y 6 x 105 zoosporas 15 días después de la siembra. Se evaluaron la necrosis de la zona de transición entre el tallo y la raíz, el porcentaje de hojas marchitas y la marchitez de la planta. A los tres días después de la inoculación (ddi) se observó de 2.3 a 3.0 cm de longitud de la necrosis y 50 % de hojas marchitas. A los cinco ddi, la necrosis fue de 2.5 a 3.15 cm y 80 % de hojas marchitas. A los siete ddi, la necrosis fue de 2.67 a 3.3 cm con 100 % de hojas marchitas (planta muerta). Con base en los síntomas observados, se diseñó una escala de severidad para evaluar el avance del daño de P. capsici en plantas de chayote bajo condiciones controladas.<hr/>Abstract. The severity of Phytophthora capsici in chayote plants was determined and a scale of severity is proposed, given its recent confirmation as a causative agent of disease. Plants with wilting symptoms were sampled from two commercial chayote orchards in Huatusco, Veracruz, Mexico. The isolated oomycete, from fruits and stems, was characterized morphological and molecularly, which was identified as P. capsici. Chayote plants developed in growth chamber were inoculated with 1, 3 y 6 X 105 zoospores 15 days after sowing. Necrosis of the transition zone between the stem and roots, the percentage of wilted leaves and wilting of the plant were evaluated. Three days after inoculation (dai), 2.3 to 3.0 cm of necrosis length and 50 % of wilted leaves were observed. At five day, necrosis was 2.5 to 3.15 cm with 80 % of wilted leaves. At seven day, necrosis was 2.67 to 3.3 cm with 100 % wilted leaves (dead plant). Based on the observed symptoms, a severity scale was designed to evaluate the progression of damage P. capsici in chayote plants grown under controlled conditions. <![CDATA[Morphological and molecular characterization of native isolates of <em>Trichoderma</em> and its potential biocontrol against <em>Phytophthora infestans</em>]]> http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0185-33092017000100058&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt Resumen. El presente trabajo muestra la caracterización morfológica y molecular de 10 cepas nativas de Trichoderma (TL2, TL4, TL5, TL6, TX7, TX8, TT6, TF8, TF10 y TJ6) y su relación filogenética, así como su capacidad de biocontrol contra Phytophthora infestans. Los resultados de la caracterización molecular al amplificar la región ITS1-ITS4 del ADN ribosómico nuclear y un fragmento del gen tef1α mostraron que de las 10 cepas, seis corresponden a Trichoderma asperellum (TL2, TL4, TX7, TX8, TT6 y TF8) y cuatro a T. harzianum/Hypocrea lixii (TL5, TL6, TF10 y TJ6). El análisis filogenético por máxima parsimonia demostró que existe una estrecha relación entre las cepas de estos dos grupos. Las pruebas in vitro de biocontrol entre el antagonista y el patógeno indicaron diferencias significativas (p&lt;0.05). La cepa TX8 registró el mayor porcentaje (98 %) de inhibición, mientras que TL4 fue la de menor porcentaje (49 %). Las cuatro cepas de H. lixii (TL5, TL6, TF10 y TJ6) presentaron capacidad de inhibición media (55-66 %).<hr/>Abstract. This paper presents the morphological and molecular characterization of 10 native isolates of Trichoderma (TL2, TL4, TL5, TL6, TX7, TX8, TT6, TF8, TF10 and TJ6) and their phylogenetic relation, as well as its biocontrol ability against Phytophthora infestans. The results of the molecular characterization by amplifying the ITS1ITS4 region of nucle1 and TJ6). The phylogenetic analysis by maximum parsimony showed a close relation among the isolates of these two groups. Biocontrol tests between the antagonist and the pathogen showed significant differences (p&lt;0.05). Strain TX8 had the highest inhibition percentage (98 %), while TL4 recorded the lowest percentage (49 %). The isolates of T. harzianum (TL5, TL6, TF10 y TJ6) showed percentages between 5565 %. <![CDATA[Extraction and purification of large dsRNAs from virus-infected plants and fungi; applications in virus detection and identification]]> http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0185-33092017000100080&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt Abstract. Various methods for the extraction and purification of large dsRNAs are used to conduct detection and identification of viruses in plants and fungi. The most widely used protocol consists in phenol extraction and selective binding of dsRNA to cellulose. Purified viral dsRNAs from plants and fungi have been analyzed by gel electrophoresis and used as a complementary tool for virus identification. Moreover, dsRNAs have been used as reagent for reverse transcription PCR, molecular cloning, preparation of probes, and sequencing of RNA viruses. Many RNA viruses and subviral molecules infecting plants and fungi have been discovered using dsRNA extraction protocols. Recent improvements on dsRNA extraction methods have increased their efficiency, and cost effectiveness. It has been shown that viral dsRNA can be used as an initial reagent for next generation sequencing of viral genomes.<hr/>Resumen. Se utilizan varios métodos para realizar la extracción y purificación de ARN de doble cadena (dsRNA) largo de plantas y hongos. Los protocolos más utilizados consisten en la extracción de fenol y la unión selectiva de dsRNA a la celulosa. Los dsRNAs virales purificados de plantas y hongos se han analizado por electroforesis con gel y se han utilizado como herramienta complementaria para identificar virus. Asimismo, los dsRNAs se han utilizado como reactivos en PCR de transcriptasa reversa, clonación molecular, preparación de sondas y secuenciación de virus ARN. Se han descubierto muchos virus ARN y moléculas subvirales que infectan plantas y hongos utilizando protocolos de extracción de dsRNA. Las recientes mejoras a los métodos de extracción de dsRNA han aumentado la eficiencia y la rentabilidad. Se ha comprobado que el dsRNA viral se puede utilizar como reactivo inicial para la secuenciación de próxima generación de genomas virales. <![CDATA[Powdery mildews in agricultural crops of Sinaloa: Current status on their identification and future research lines]]> http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0185-33092017000100106&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt Resumen. La presente revisión tiene como objetivo abordar la evolución de los procedimientos para identificar los agentes causales de las cenicillas. Las características morfométricas que se descifran mediante la utilización de microscopía de luz y microscopía electrónica de barrido, así como el rango de hospedantes y herramientas moleculares han permitido la identificación del anamorfo en diferentes especies de Erysiphales, en diversas regiones del mundo. En Sinaloa, México, la identificación de este tipo de patógenos inició en 2005. Los estudios morfométricos del teleomorfo y anamorfo en calabaza y pepino permitieron la identificación de Podosphaera xanthii en estos hospedantes; el anamorfo del mismo hongo se identificó en melón, sandía, bule y tomatillo recurriendo a las mismas técnicas. En estudios subsiguientes, además de la morfometría se recurrió a los espaciadores transcritos internos (ITS; por su abreviatura en inglés) para la identificación de los anamorfos de Erysiphe diffusa, Erysiphe quercicola y Podosphaera pannosa. Las especies de Erysiphales conocidas a la fecha en Sinaloa son sólo un segmento de muchas de ellas que actualmente atacan a plantas cultivadas y silvestres; por lo que existe espacio para el surgimiento de líneas de investigación direccionadas hacia la etiología, epidemiología y el manejo de este tipo de enfermedades.<hr/>Abstract. The present review aims to discuss the evolution of the procedures for the identification of the powdery mildew pathogens. The morphometric characteristics deciphered by light microscopy and scanning electron microscopy, and the availability of molecular tools have contributed to the identification of the anamorph in different species of Erysiphales in various regions around the world. In Sinaloa, the identification of these plant pathogens started in 2005. Applying morphometric studies to the teleomorph and anamorph of the powdery mildew fungus in squash and cucumber allowed the identification of Podosphaera xanthii as the causal agent; the anamorph of the same species was also identified in melon, watermelon, bottlegourd, and husk tomato. In subsequent studies, in addition to the morphometric characteristics, the ITS of rDNA was used for the identification of the anamorph of Erysiphe diffusa, Erysiphe quercicola, and Podosphaera pannosa on bean, mango, and roses, respectively. The known species of Erysiphales at the present time in Sinaloa might be only a segment of many of them infecting cultivated and wild species of plants; thus, there is an immense opportunity to focus research lines on the etiology, epidemiology, and control of this type of diseases. <![CDATA[Looking for natural antifungal agent: Sensitive assey to detect fungal endo-1,3-β-glucanase inhibitors from crude plant extracts]]> http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0185-33092017000100130&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt Resumen. La enzima 1,3-β-glucanasa está implicada en la construcción de la pared celular de hongos, en la formación del septum de división y en el ensamblado de la pared de ascosporas. Razón por la cual la 1,3-β-glucanasa es un sitio blanco para el desarrollo de nuevas generaciones de agentes antifúngicos naturales. Con el objetivo de buscar compuestos antifúngicos en extractos de plantas, nosotros implementamos un simple y sensible ensayo para detectar inhibidores de endo-1,3-β-glucanasa fúngica en extractos crudos de plantas. El ensayo es especialmente útil para evaluar un gran número de extractos crudos de plantas, está basado en la difusión radial de la enzima glucanasa incluida en pozos realizados en un gel de agarosa, el cual contiene el sustrato de la enzima (laminarina). Conforme el sustrato es depolimerizado en el gel por acción de la enzima, la cual difunde de forma radial, dejando unas zonas circulares alrededor de los pozos, las cuales no son teñidas por el colorante calcoflúor . La relación lineal entre el diámetro de la zona hidrolizada y las concentraciones de enzima pura, es la base del método. Se discuten resultados de la utilización del ensayo con extractos de plantas obtenidos con metanol o diclorometano.<hr/>Abstract. 1,3-β-glucanase is an enzyme involved in fungal cell wall construction, division septum deposition and ascospore wall assembly. Hence, the 1,3-β-glucanase is a target site to develop into new generations of natural antifungal agents. With the aim of seeking antifungal compounds in plant extracts, we implemented a simple and sensitive assay to detect inhibitors of endo-1,3-β-glucanase from crude plant extracts. The assay, especially useful for screen large number of crude plant extracts, is based on the diffusion of glucanase enzyme from wells through agarosa gel containing the enzyme substrate (laminarin). As the substrate is depolymerized, glucanase diffuses outward in a radial manner leaving a circular zone around the well, unstained by dye calcofluor. A linear relationship between the diameter of hydrolyzed zone and pure enzyme concentration, provide the basis for the method. Results of the assay using plant extracts obtained in methanol or dichloromethane are discussing. <![CDATA[In vitro first report of nutrients and silicon effect over the growth of Phaeocryptopus gaeumannii a pathogen of Pseudotsuga menziesii]]> http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0185-33092017000100139&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt Resumen. El desarrollo de Phaeocryptopus gaeumannii, Ascomycota, causante del Tizón Suizo del follaje de Douglas-fir (Pseudotsuga menziesii), es influenciado por la composición nutrimental de las acículas. El objetivo del estudio fue examinar el efecto de diferentes elementos esenciales, macronutrimentos y micronutrimentos, para las plantas y del silicio (Si), sobre el crecimiento in vitro de P. gaeumannii. Con diferentes nutrimentos y Si se establecieron dos experimentos completamente al azar. El primero fue el cultivo del hongo en Extracto de Malta-Agar al 2 % con 10 tratamientos, y se calculó la Tasa de Crecimiento Relativo instantánea; y el segundo fue en medio líquido de Papa Dextrosa con 21 tratamientos, y se midió masa del micelio. Los macronutrimentos favorecieron el crecimiento de P. gaeumannii. En contraste los micronutrimentos Cu, Mn y Zn inhibieron el desarrollo del hongo en dosis doble. En general, el Si inhibió el crecimiento del hongo. La solución nutritiva completa de macronutrimentos + micronutrimentos más 250 y 1000 ppm de Si, indicaron que estas formulaciones pueden contribuir para eventual control de P. gaeumannii. Este ensayo preliminar in vitro, al parecer es el primer estudio.<hr/>Abstract. The development of Phaeocryptopus gaeumannii, Ascomycota, the cause of Swiss needle cast on Douglas-fir foliage (Pseudotsuga menziesii), is influenced by the nutritional composition of the needles. The objective of the study was to examine the effect of different essential elements, macronutrients and micronutrients, for plants and silicon (Si), on the in vitro growth of P. gaeumannii. Two completely random experiments were established with different nutrients. The first was the culture of the fungus in 2 % Malt Extract Agar with 10 treatments, and the relative growth rate was calculated; and the second was in liquid medium of Potato Dextrose with 21 treatments, and the mass of the mycelium was measured. Macronutrients favored the growth of P. gaeumannii. In contrast, Cu, Mn and Zn micronutrients inhibited the development of the fungus in double doses. In general, Si inhibited the growth of the fungus. The complete nutrient solution of macronutrients + micronutrients with 250 and 1000 ppm of Si, indicated that these formulations may contribute to eventual control of P. gaeumannii. This preliminary in vitro trial appears to be the first study. <![CDATA[First record of <em>Fusarium solani</em> and <em>F. equiseti</em> in plantations of <em>Jatropha curcas</em> in Mexico]]> http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0185-33092017000100150&lng=pt&nrm=iso&tlng=pt Resumen. El piñón (Jatropha curcas) es una planta multipropósitos que ha adquirido importancia debido a que el aceite que se extrae de sus semillas, se puede transformar en biodiesel. Desde el año 2012, en plantaciones de J. curcas ubicadas en Yucatán, México, se observaron síntomas de marchitez, necrosamiento de tejido vascular y acortamiento de entrenudos. El objetivo del trabajo fue identificar el agente causal de los síntomas descritos por medio de métodos convencionales y moleculares. Las pruebas de patogenicidad en invernadero, caracterización morfológica, así como el análisis de secuencias mostraron que los agentes causales de los síntomas de la enfermedad fueron Fusarium solani y Fusarium equiseti. Este es el primer reporte de F. solani como agente causal de necrosamiento de tejido vascular, marchitez y pudrición de raíz, y también es el primer reporte de F. equiseti como responsable de muerte descendente y acortamiento de entrenudos en plantas de J. curcas en México.<hr/>Abstract. Physic nut (Jatropha curcas) is a multipurpose plant that has acquired importance as biofuel; due to the oil extracted, its seed can be used to produce biodiesel. Vascular tissue necrosis, vascular wilting, root rot, dieback and shortening symptoms were observed in J. curcas plantations in Yucatan, Mexico. The objective this work was to identify the causal agent of symptoms using conventional and molecular techniques. Pathogenicity tests in the greenhouse, morphological characterization and sequence analysis showed that the causal agents of the disease were Fusarium solani and Fusarium equiseti. This is the first report of F. solani as causal agent of vascular tissue necrosis, vascular wilting and root rot, and also the first report of F. equiseti to cause dieback and shortening in J. curcas in Mexico.